عدد التعديلات للمستخدم (user_editcount) | 72 |
اسم حساب المستخدم (user_name) | 'تسنيم مصطفى' |
عمر حساب المستخدم (user_age) | 31700840 |
المجموعات (متضمنة غير المباشرة) التي المستخدم فيها (user_groups) | [
0 => '*',
1 => 'user',
2 => 'autoconfirmed'
] |
ما إذا كان المستخدم يعدل من تطبيق المحمول (user_app) | false |
ما إذا كان المستخدم يعدل عبر واجهة المحمول (user_mobile) | false |
المجموعات العامة التي ينتمي إليها الحساب (global_user_groups) | [] |
هوية الصفحة (page_id) | 8618059 |
نطاق الصفحة (page_namespace) | 0 |
عنوان الصفحة (بدون نطاق) (page_title) | 'إنتاج البروتين' |
عنوان الصفحة الكامل (page_prefixedtitle) | 'إنتاج البروتين' |
آخر عشرة مساهمين في الصفحة (page_recent_contributors) | [
0 => 'JarBot',
1 => 'Mr.Ibrahembot',
2 => 'عمر',
3 => 'تسنيم مصطفى'
] |
عمر الصفحة (بالثواني) (page_age) | 16488 |
أول مستخدم ساهم في الصفحة (page_first_contributor) | 'تسنيم مصطفى' |
فعل (action) | 'edit' |
ملخص التعديل/السبب (summary) | 'التعديل على بعض المصطلحات.' |
نموذج المحتوى القديم (old_content_model) | 'wikitext' |
نموذج المحتوى الجديد (new_content_model) | 'wikitext' |
نص الويكي القديم للصفحة، قبل التعديل (old_wikitext) | '{{مقالة غير مراجعة|تاريخ = يناير 2022}}
{{يتيمة|تاريخ=يناير 2022}}
[[ملف:Genetic code.svg|تصغير|العقيدة المركزية التي تصور النسخ من كود الحمض النووي إلى كود الحمض النووي الريبي إلى البروتينات في الخطوة الثانية التي تغطي إنتاج البروتين.]]
'''إنتاج البروتين''' هو تقانة حيوية لتوليد بروتين معين. يتم تحقيقه عادةً عن طريق التلاعب [[تعبير جيني|بالتعبير الجيني]] في كائن حي بحيث يعبر عن كميات كبيرة من [[حمض نووي معاد التركيب]]. يتضمن ذلك نسخ الحمض النووي معاد التركيب إلى [[حمض نووي ريبوزي رسول|الحمض النووي الريبوزي الرسول]] (mRNA) ، وترجمة الحمض النووي الريبوزي الرسول إلى سلاسل [[ببتيد|متعددة الببتيد]]، والتي يتم طيها في النهاية إلى [[بروتين|بروتينات]] وظيفية ويمكن [[توجيه البروتين]] لمواقع محددة تحت خلوية أو خارج خلوية.<ref>{{استشهاد بدورية محكمة
| عدة مؤلفين = Gräslund S, Nordlund P, Weigelt J, Hallberg BM, Bray J, Gileadi O, Knapp S, Oppermann U, Arrowsmith C, Hui R, Ming J, dhe-Paganon S, Park HW, Savchenko A, Yee A, Edwards A, Vincentelli R, Cambillau C, Kim R, Kim SH, Rao Z, Shi Y, Terwilliger TC, Kim CY, Hung LW, Waldo GS, Peleg Y, Albeck S, Unger T, Dym O, Prilusky J, Sussman JL, Stevens RC, Lesley SA, Wilson IA, Joachimiak A, Collart F, Dementieva I, Donnelly MI, Eschenfeldt WH, Kim Y, Stols L, Wu R, Zhou M, Burley SK, Emtage JS, Sauder JM, Thompson D, Bain K, Luz J, Gheyi T, Zhang F, Atwell S, Almo SC, Bonanno JB, Fiser A, Swaminathan S, Studier FW, Chance MR, Sali A, Acton TB, Xiao R, Zhao L, Ma LC, Hunt JF, Tong L, Cunningham K, Inouye M, Anderson S, Janjua H, Shastry R, Ho CK, Wang D, Wang H, Jiang M, Montelione GT, Stuart DI, Owens RJ, Daenke S, Schütz A, Heinemann U, Yokoyama S, Büssow K, Gunsalus KC
| إظهار المؤلفين = 6
| عنوان = Protein production and purification
| صحيفة = Nature Methods
| المجلد = 5
| العدد = 2
| صفحات = 135–46
| تاريخ = February 2008
| pmid = 18235434
| pmc = 3178102
| doi = 10.1038/nmeth.f.202
}}</ref>
تُستخدم أنظمة إنتاج البروتين (المعروفة أيضًا باسم أنظمة [[تعبير جيني|التعبير]]) في [[قائمة علوم الحياة|علوم الحياة]] و[[تقانة حيوية|التكنولوجيا الحيوية]] و[[طب|الطب]]. تستخدم أبحاث [[علم الأحياء الجزيئي|البيولوجيا الجزيئية]] العديد من [[بروتين|البروتينات]] و[[إنزيم|الإنزيمات]]، وكثير منها من أنظمة التعبير؛ بشكل خاص [[بوليمراز الدنا|بوليميريز DNA]] [[تفاعل البوليمراز المتسلسل|لـتفاعل البوليمراز المتسلسل]] (PCR)، [[منتسخة عكسية|النسخ العكسي]] لتحليل RNA، [[إنزيمات الاقتطاع]] للاستنساخ، ولصنع البروتينات التي يتم فحصها في [[اكتشاف الدواء|اكتشاف الأدوية]] [[مستهدف حيوي|كأهداف بيولوجية]] أو كأدوية محتملة بحد ذاتها. هناك أيضًا تطبيقات مهمة لأنظمة التعبير في [[تخمر صناعي|التخمر الصناعي]]، ولا سيما إنتاج [[مستحضرات دوائية حيوية|الأدوية الحيوية]] مثل [[إنسولين|الأنسولين]] البشري لعلاج [[السكري|مرض السكري]]، وتصنيع [[إنزيم|الإنزيمات]].
== أنظمة إنتاج البروتين ==
تشمل أنظمة إنتاج البروتين المستخدمة بشكل شائع تلك المشتقة من [[بكتيريا|البكتيريا]]،<ref name="pmid10508629">{{استشهاد بدورية محكمة
| عدة مؤلفين = Baneyx F
| عنوان = Recombinant protein expression in Escherichia coli
| صحيفة = Current Opinion in Biotechnology
| المجلد = 10
| العدد = 5
| صفحات = 411–21
| تاريخ = October 1999
| pmid = 10508629
| doi = 10.1016/s0958-1669(99)00003-8
}}</ref> [[خميرة|الخميرة]]،<ref name="pmid11098467">{{استشهاد بدورية محكمة
| عدة مؤلفين = Cregg JM, Cereghino JL, Shi J, Higgins DR
| عنوان = Recombinant protein expression in Pichia pastoris
| صحيفة = Molecular Biotechnology
| المجلد = 16
| العدد = 1
| صفحات = 23–52
| تاريخ = September 2000
| pmid = 11098467
| doi = 10.1385/MB:16:1:23
| s2cid = 35874864
}}</ref><ref name="pmid21943899">{{استشهاد بكتاب
| عدة مؤلفين = Malys N, Wishart JA, Oliver SG, McCarthy JE
| عنوان = Methods in Systems Biology
| الفصل = Protein production in Saccharomyces cerevisiae for systems biology studies
| صحيفة = Methods in Enzymology
| المجلد = 500
| صفحات = 197–212
| سنة = 2011
| pmid = 21943899
| doi = 10.1016/B978-0-12-385118-5.00011-6
| isbn = 9780123851185
}}</ref> [[فيروس عصوي|الفيروس البكتيري]] / [[حشرة|الحشرات]]،<ref name="pmid15877075">{{استشهاد بدورية محكمة
| عدة مؤلفين = Kost TA, Condreay JP, Jarvis DL
| عنوان = Baculovirus as versatile vectors for protein expression in insect and mammalian cells
| صحيفة = Nature Biotechnology
| المجلد = 23
| العدد = 5
| صفحات = 567–75
| تاريخ = May 2005
| pmid = 15877075
| pmc = 3610534
| doi = 10.1038/nbt1095
}}</ref> خلايا [[ثدييات|الثدييات]]،<ref name="pmid15766864">{{استشهاد بدورية محكمة
| عدة مؤلفين = Rosser MP, Xia W, Hartsell S, McCaman M, Zhu Y, Wang S, Harvey S, Bringmann P, Cobb RR
| عنوان = Transient transfection of CHO-K1-S using serum-free medium in suspension: a rapid mammalian protein expression system
| صحيفة = Protein Expression and Purification
| المجلد = 40
| العدد = 2
| صفحات = 237–43
| تاريخ = April 2005
| pmid = 15766864
| doi = 10.1016/j.pep.2004.07.015
}}</ref><ref name="pmid18541133">{{استشهاد بدورية محكمة
| عدة مؤلفين = Lackner A, Genta K, Koppensteiner H, Herbacek I, Holzmann K, Spiegl-Kreinecker S, Berger W, Grusch M
| عنوان = A bicistronic baculovirus vector for transient and stable protein expression in mammalian cells
| صحيفة = Analytical Biochemistry
| المجلد = 380
| العدد = 1
| صفحات = 146–8
| تاريخ = September 2008
| pmid = 18541133
| doi = 10.1016/j.ab.2008.05.020
}}</ref> ومؤخرًا الفطريات الخيطية مثل Myceliophthora thermophila.<ref name="Visser 214–223">{{استشهاد بدورية محكمة
| الأخير1 = Visser
| last8 = Visser
| صفحات = 214–223
| العدد = 3
| المجلد = 7
| صحيفة = Industrial Biotechnology
| عنوان = Development of a mature fungal technology and production platform for industrial enzymes based on a Myceliophthora thermophila isolate, previously known as Chrysosporium lucknowense C1
| تاريخ = June 2011
| إظهار المؤلفين = 6
| name-list-style = vanc
| first9 = Arkady P.
| last9 = Sinitsyn
| first8 = Jaap
| first7 = Jeffrey
| الأول1 = Hans
| last7 = Bartels
| first6 = Rob
| last6 = Joosten
| الأول5 = Phil T.
| الأخير5 = Olson
| الأول4 = Alexander V.
| الأخير4 = Gusakov
| الأول3 = Peter J.
| الأخير3 = Punt
| الأول2 = Vivi
| الأخير2 = Joosten
| doi = 10.1089/ind.2011.7.214
}}</ref> عندما يتم إنتاج المستحضرات الصيدلانية الحيوية باستخدام أحد هذه الأنظمة ، فإن الشوائب المرتبطة بالعملية المسماة [[بروتينات الخلية المضيف|بروتينات الخلية المضيفة]] تصل أيضًا إلى المنتج النهائي بكميات ضئيلة.<ref>{{استشهاد بدورية محكمة
| الأخير1 = Wang
| المجلد = 103
| issn = 0006-3592
| s2cid = 22707536
| pmid = 19388135
| doi = 10.1002/bit.22304
| صفحات = 446–458
| العدد = 3
| لغة = en
| الأول1 = Xing
| صحيفة = Biotechnology and Bioengineering
| عنوان = Host cell proteins in biologics development: Identification, quantitation and risk assessment
| تاريخ = 2009-06-15
| الأول3 = Ned M.
| الأخير3 = Mozier
| الأول2 = Alan K.
| الأخير2 = Hunter
| doi-access = free
}}</ref>
=== الأنظمة المستندة إلى الخلية ===
تعتمد أنظمة التعبير الأقدم والأكثر استخدامًا على الخلايا ويمكن تعريفها على أنها "مزيج من [[ناقل العبارة]]، وحمضه النووي المستنسخ، والمضيف للناقل الذي يوفر سياقًا للسماح بوظيفة الجين الأجنبي في خلية مضيفة، والذي هو إنتاج بروتينات على مستوى عالٍ ".<ref name="urlDefinition: expression system from Online Medical Dictionary">{{استشهاد ويب
| مسار = http://cancerweb.ncl.ac.uk/cgi-bin/omd?expression+system
| عنوان = Definition: expression system
| تاريخ = 1997-11-13
| عمل = Online Medical Dictionary
| ناشر = Centre for Cancer Education, University of Newcastle upon Tyne: Cancerweb
| تاريخ الوصول = 2008-06-10
| مسار أرشيف = https://web.archive.org/web/20081221225545/http://cancerweb.ncl.ac.uk/cgi-bin/omd?expression+system | تاريخ أرشيف = 21 ديسمبر 2008 }}</ref><ref name="urlExpression system">{{استشهاد ويب
| مسار = http://www.biology-online.org/dictionary/Expression_system
| عنوان = Expression system - definition
| تاريخ = 2005-10-03
| عمل = Biology Online
| ناشر = Biology-Online.org
| تاريخ الوصول = 2008-06-10
| مسار الأرشيف = https://web.archive.org/web/20180625050654/https://www.biology-online.org/dictionary/Expression_system | تاريخ الأرشيف = 25 يونيو 2018 }}</ref>الإفراط في التعبير هو مستوى مرتفع بشكل غير طبيعي ومفرط من [[تعبير جيني|التعبير الجيني]] الذي ينتج عنه [[نمط ظاهري]] مرتبط بالجين.<ref name="Overexpression - Oxford">{{استشهاد ويب
| مسار = https://en.oxforddictionaries.com/definition/overexpression
| عنوان = overexpression
| تاريخ = 2017
| موقع = Oxford Living Dictionary
| ناشر = Oxford University Press
| تاريخ الوصول = 18 May 2017
| اقتباس = The production of abnormally large amounts of a substance which is coded for by a particular gene or group of genes; the appearance in the phenotype to an abnormally high degree of a character or effect attributed to a particular gene.
| مسار الأرشيف = https://web.archive.org/web/20181020095243/https://en.oxforddictionaries.com/definition/overexpression | تاريخ الأرشيف = 20 أكتوبر 2018 }}</ref><ref name="مولد تلقائيا1">{{استشهاد بدورية محكمة
| الأخير1 = Jeong
| last18 = Daegelen
| last14 = Kim
| first14 = SC
| last15 = Oh
| first15 = TK
| last16 = Lenski
| first16 = RE
| last17 = Studier
| first17 = FW
| first18 = P
| last13 = Ségurens
| last19 = Kim
| first19 = JF
| عنوان = Genome sequences of Escherichia coli B strains REL606 and BL21(DE3).
| صحيفة = Journal of Molecular Biology
| تاريخ = 11 December 2009
| المجلد = 394
| العدد = 4
| صفحات = 644–52
| doi = 10.1016/j.jmb.2009.09.052
| first13 = B
| first12 = HS
| الأول1 = H
| first6 = SH
| الأخير2 = Barbe
| الأول2 = V
| الأخير3 = Lee
| الأول3 = CH
| الأخير4 = Vallenet
| الأول4 = D
| الأخير5 = Yu
| الأول5 = DS
| last6 = Choi
| last7 = Couloux
| last12 = Park
| first7 = A
| last8 = Lee
| first8 = SW
| last9 = Yoon
| first9 = SH
| last10 = Cattolico
| first10 = L
| last11 = Hur
| first11 = CG
| pmid = 19786035
}}</ref>
هناك العديد من الطرق لإدخال [[حمض نووي ريبوزي منقوص الأكسجين|DNA]] غريب إلى خلية للتعبير، ويمكن استخدام العديد من الخلايا المضيفة المختلفة للتعبير- لكل نظام تعبير مزايا ومسؤوليات مميزة. عادةً ما يُشار إلى أنظمة التعبير من قبل المضيف ومصدر الحمض النووي أو آلية توصيل المادة الجينية. على سبيل المثال، [[عائل (أحياء)|العوائل]] الشائعة هي [[بكتيريا|البكتيريا]] (مثل [[إشريكية قولونية|البكتيريا الإشريكية القولونية]]، و[[عصوية رقيقة|العصوية الرقيقة]])، و[[خميرة|الخميرة]] (مثل S.cerevisiae <ref name="pmid21943899" />) أو [[حقيقيات النوى|سلالات الخلايا حقيقية النواة]]. مصادر الحمض النووي وآليات التوصيل الشائعة هي [[فيروس|الفيروسات]] (مثل [[فيروس عصوي|الفيروس العصوي]] و[[فيروس راجع|الفيروسات القهقرية]] و[[فيروسات غدانية|الفيروسات الغدية]]) و[[بلازميد|البلازميدات]] و[[كروموسوم اصطناعي للخميرة|الكروموسومات الاصطناعية]] و[[عاثية|العاثية]] (مثل لامدا). يعتمد أفضل نظام تعبير على الجين المعني، على سبيل المثال، غالبًا ما يُفضل [[سكيراء جعوية|السكيراء الجعوية]] للبروتينات التي تتطلب [[تعديل ما بعد الترجمة|تعديلًا كبيرًا بعد الترجمة]]. تُستخدم خطوط [[حشرة|الخلايا الحشرية]] أو [[ثدييات|الثديية]] عند الحاجة إلى ربط مرنا يشبه الإنسان. ومع ذلك، فإن التعبير البكتيري يتميز بسهولة إنتاج كميات كبيرة من البروتين ، وهو أمر ضروري [[دراسة البلورات بالأشعة السينية|لتصوير البلورات بالأشعة السينية]] أو تجارب [[رنين مغناطيسي نووي|الرنين المغناطيسي النووي]] لتحديد الهيكل.
نظرًا لأن [[بدائيات النوى|البكتيريا بدائيات النوى]]، فهي غير مجهزة بالآلية الأنزيمية الكاملة لتحقيق التعديلات المطلوبة بعد الترجمة أو الطي الجزيئي. ومن ثم، فإن البروتينات حقيقية النواة متعددة المجالات التي يتم التعبير عنها في البكتيريا غالبًا ما تكون غير وظيفية. أيضًا، تصبح العديد من البروتينات غير قابلة للذوبان كأجسام متضمنة يصعب استردادها دون عوامل تغيير طبيعة قاسية وما تلاه من إعادة تقوية البروتين المرهقة.
لمعالجة هذه المخاوف، تم تطوير أنظمة التعبيرات باستخدام العديد من الخلايا حقيقية النواة للتطبيقات التي تتطلب تطابق البروتينات كما هو الحال في الكائنات حقيقية النواة أو أقرب إليها: يتم نقل خلايا النباتات (مثل التبغ) أو الحشرات أو الثدييات (مثل الأبقار) مع الجينات و مزروعة في المعلق وحتى الأنسجة أو الكائنات الحية الكاملة ، لإنتاج البروتينات مطوية بالكامل. ومع ذلك ، فإن أنظمة التعبير عن الثدييات [[في الجسم الحي]] لها عائد منخفض وقيود أخرى (تستغرق وقتًا طويلاً ، وسمية للخلايا المضيفة، ..). للجمع بين الغلة / الإنتاجية العالية وميزات البروتين القابلة للتطوير للبكتيريا والخميرة، والميزات اللاجينية المتقدمة للنباتات والحشرات وأنظمة الثدييات، تم تطوير أنظمة إنتاج البروتين الأخرى باستخدام حقيقيات النوى أحادية الخلية (أي خلايا "[[ليشمانيا]]" غير المسببة للأمراض).
==== الأنظمة البكتيرية ====
===== الإشريكية القولونية =====
[[ملف:EscherichiaColi NIAID.jpg|تصغير|E. coli ، أحد أكثر العوائل شهرة للتعبير الجيني الاصطناعي]]
تعتبر الإشريكية القولونية (E. coli ) واحدة من أكثر مضيفات التعبير استخدامًا، وعادةً ما يتم إدخال الحمض النووي في ناقل التعبير [[بلازميد|البلازميدي]]. تم تطوير تقنيات الإفراط في التعبير في الإشريكية القولونية بشكل جيد وتعمل عن طريق زيادة عدد نسخ الجين أو زيادة قوة الارتباط لمنطقة المحفز، مما يساعد على النسخ.
على سبيل المثال، يمكن [[استنساخ]] تسلسل DNA لبروتين ذي أهمية أو [[استنساخ فرعي|استنساخه جزئيًا]] في بلازميد ذي رقم نسخ مرتفع يحتوي على محفز lac (غالبًا LacUV5)، والذي يتم [[تحول (وراثة)|تحويله]] بعد ذلك إلى بكتيريا E. coli. تعمل إضافة IPTG (تناظرية اللاكتوز) على تنشيط محفز اللاكتوز (lac) ويسبب البكتيريا للتعبير عن البروتين الفائدة.
سلالة الإشريكية القولونية BL21 و BL21 (DE3) سلالتان تستخدمان بشكل شائع لإنتاج البروتين. كأعضاء في سلالة B ، فإنهم يفتقرون إلى البروتياز lon و OmpT ، مما يحمي البروتينات المنتجة من التدهور. يوفر Prophage DE3 الموجود في BL21 (DE3) بوليميريز [[تي 7 بوليميراز الحمض النووي الرايبوزي|T7 RNA]] (مدفوعًا بمحفز LacUV5)، مما يسمح باستخدام نواقل مع محفز T7 بدلاً من ذلك.<ref name="مولد تلقائيا1" />
===== الوتدية =====
تستخدم الأنواع غير المسببة للأمراض من [[وتدية|الوتديات]] موجبة الجرام للإنتاج التجاري للأحماض الأمينية المختلفة. تُستخدم أنواع C. glutamicum على نطاق واسع لإنتاج [[حمض الجلوتاميك|الغلوتامات]] و[[لايسين|الليسين]]،<ref>{{استشهاد بدورية محكمة
| عدة مؤلفين = Brinkrolf K, Schröder J, Pühler A, Tauch A
| عنوان = The transcriptional regulatory repertoire of Corynebacterium glutamicum: reconstruction of the network controlling pathways involved in lysine and glutamate production
| صحيفة = Journal of Biotechnology
| المجلد = 149
| العدد = 3
| صفحات = 173–82
| تاريخ = September 2010
| pmid = 19963020
| doi = 10.1016/j.jbiotec.2009.12.004
}}</ref> ومكونات أغذية الإنسان وعلف الحيوانات والمنتجات الصيدلانية.
تم التعبير عن عامل نمو البشرة البشري النشط وظيفيًا في C. glutamicum،<ref>{{استشهاد بدورية محكمة
| عدة مؤلفين = Date M, Itaya H, Matsui H, Kikuchi Y
| عنوان = Secretion of human epidermal growth factor by Corynebacterium glutamicum
| صحيفة = Letters in Applied Microbiology
| المجلد = 42
| العدد = 1
| صفحات = 66–70
| تاريخ = January 2006
| pmid = 16411922
| doi = 10.1111/j.1472-765x.2005.01802.x
| doi-access = free
}}</ref>مما يدل على إمكانية الإنتاج على نطاق صناعي للبروتينات البشرية. يمكن استهداف البروتينات المعبر عنها [[إفراز|للإفراز]] إما من خلال المسار الإفرازي العام (Sec) أو مسار الانتقال التوأم أرجينين (Tat).<ref>{{استشهاد بدورية محكمة
| عدة مؤلفين = Meissner D, Vollstedt A, van Dijl JM, Freudl R
| عنوان = Comparative analysis of twin-arginine (Tat)-dependent protein secretion of a heterologous model protein (GFP) in three different Gram-positive bacteria
| صحيفة = Applied Microbiology and Biotechnology
| المجلد = 76
| العدد = 3
| صفحات = 633–42
| تاريخ = September 2007
| pmid = 17453196
| doi = 10.1007/s00253-007-0934-8
| s2cid = 6238466
}}</ref>
على عكس [[بكتيريا سلبية الغرام|البكتيريا سالبة الجرام]]، تفتقر الوتدية موجبة الجرام إلى [[عديد السكاريد الشحمي|عديدات السكاريد الدهنية]] التي تعمل كسموم داخلية مستضدية في البشر.
===== زائفة متألقة =====
تُستخدم البكتيريا غير الممرضة وسالبة الجرام، [[زائفة متألقة]]، لإنتاج البروتينات المؤتلفة عالية المستوى؛ عادة لتطوير المداواة الحيوية واللقاحات. P. fluorescens هو كائن حي متعدد الاستخدامات من الناحية الأيضية، مما يسمح بفحص الإنتاجية العالية والتطور السريع للبروتينات المعقدة. تشتهر P. fluorescens بقدرتها على إنتاج عيارات عالية من البروتين النشط والقابل للذوبان بشكل سريع وناجح.<ref>{{استشهاد بدورية محكمة
| عدة مؤلفين = Retallack DM, Jin H, Chew L
| عنوان = Reliable protein production in a Pseudomonas fluorescens expression system
| صحيفة = Protein Expression and Purification
| المجلد = 81
| العدد = 2
| صفحات = 157–65
| تاريخ = February 2012
| pmid = 21968453
| doi = 10.1016/j.pep.2011.09.010
}}</ref>
==== أنظمة حقيقية النواة ====
===== الخميرة =====
تسمح أنظمة التعبير التي تستخدم إما [[سكيراء جعوية]] أو Pichia pastoris بإنتاج مستقر ودائم للبروتينات التي تتم معالجتها بشكل مشابه لخلايا الثدييات، بإنتاجية عالية، في وسائط محددة كيميائيًا من البروتينات.
===== الفطريات الخيطية =====
تم تطوير الفطريات الخيطية، خاصة [[رشاشية|الرشاشيات]] والتريكوديرما، ولكن مؤخرًا تم تطوير Myceliophthora thermophila C1<ref name="Visser 214–223" /> إلى منصات تعبير لفحص وإنتاج [[إنزيمات صناعية|الإنزيمات الصناعية]] المتنوعة. يُظهر نظام التعبير C1 مورفولوجيا منخفضة اللزوجة في الثقافة المغمورة ، مما يتيح استخدام وسائط النمو والإنتاج المعقدة.
===== الخلايا المصابة بفيروس باكولوفيروس =====
تسمح الخلايا الحشرية المصابة [[فيروس عصوي|بفيروس باكولوفيروس]]<ref name="ReferenceA">{{استشهاد بدورية محكمة
| عدة مؤلفين = Altmann F, Staudacher E, Wilson IB, März L
| عنوان = Insect cells as hosts for the expression of recombinant glycoproteins
| صحيفة = Glycoconjugate Journal
| المجلد = 16
| العدد = 2
| صفحات = 109–23
| تاريخ = February 1999
| pmid = 10612411
| doi = 10.1023/A:1026488408951
| s2cid = 34863069
}}</ref> (Sf9 ، Sf21 ، خمسة سلالات عالية) أو خلايا الثدييات<ref>{{استشهاد بدورية محكمة
| عدة مؤلفين = Kost TA, Condreay JP
| عنوان = Recombinant baculoviruses as expression vectors for insect and mammalian cells
| صحيفة = Current Opinion in Biotechnology
| المجلد = 10
| العدد = 5
| صفحات = 428–33
| تاريخ = October 1999
| pmid = 10508635
| doi = 10.1016/S0958-1669(99)00005-1
}}</ref> ([[خلايا هيلا]]، و خلايا HEK 293) بإنتاج بروتينات غشائية أو غليكوزيلات لا يمكن إنتاجها باستخدام أنظمة فطرية أو بكتيرية.<ref name="ReferenceA" /> يفيد في إنتاج البروتينات بكميات عالية. لا يتم التعبير عن الجينات بشكل مستمر لأن الخلايا المضيفة المصابة تتلاشى في النهاية وتموت خلال كل دورة عدوى.<ref>{{استشهاد بدورية محكمة
| عدة مؤلفين = Yin J, Li G, Ren X, Herrler G
| عنوان = Select what you need: a comparative evaluation of the advantages and limitations of frequently used expression systems for foreign genes
| صحيفة = Journal of Biotechnology
| المجلد = 127
| العدد = 3
| صفحات = 335–47
| تاريخ = January 2007
| pmid = 16959350
| doi = 10.1016/j.jbiotec.2006.07.012
}}</ref>
===== تعبير خلية حشرية غير ليتي =====
يُعد التعبير عن خلية الحشرات غير اللايتية بديلاً لنظام التعبير عن فيروس باكولوفيروس. في التعبير غير الليلي، يتم [[تعداء|نقل]] النواقل بشكل عابر أو ثابت إلى الحمض النووي الصبغي لخلايا الحشرات من أجل التعبير الجيني اللاحق.<ref name="Dyring">{{استشهاد بدورية محكمة
| الأخير1 = Dyring
| الأول1 = Charlotte
| سنة = 2011
| عنوان = Optimising the drosophila S2 expression system for production of therapeutic vaccines
| صحيفة = BioProcessing Journal
| المجلد = 10
| العدد = 2
| صفحات = 28–35
| doi = 10.12665/j102.dyring
}}</ref><ref name="Olczak">{{استشهاد بدورية محكمة
| عدة مؤلفين = Olczak M, Olczak T
| عنوان = Comparison of different signal peptides for protein secretion in nonlytic insect cell system
| صحيفة = Analytical Biochemistry
| المجلد = 359
| العدد = 1
| صفحات = 45–53
| تاريخ = December 2006
| pmid = 17046707
| doi = 10.1016/j.ab.2006.09.003
}}</ref> ويتبع ذلك اختيار وفحص الحيوانات المستنسخة المؤتلفة.<ref name="McCarroll">{{استشهاد بدورية محكمة
| عدة مؤلفين = McCarroll L, King LA
| عنوان = Stable insect cell cultures for recombinant protein production
| صحيفة = Current Opinion in Biotechnology
| المجلد = 8
| العدد = 5
| صفحات = 590–4
| تاريخ = October 1997
| pmid = 9353223
| doi = 10.1016/s0958-1669(97)80034-1
}}</ref> تم استخدام النظام غير اللاحلالي لإعطاء إنتاجية أعلى للبروتين وتعبير أسرع عن الجينات المؤتلفة مقارنة بالتعبير الخلوي المصاب بالفيروس البكتيري.<ref name="Olczak" /> خطوط الخلايا المستخدمة لهذا النظام تشمل: Sf9 ، Sf21 من خلايا [[دودة الحشد الخريفية]]، Hi-5 من خلايا [[وبير الملفوف]]، وخلايا Schneider 2 وخلايا Schneider 3 من خلايا [[ذبابة فاكهة شائعة]].<ref name="Dyring" /><ref name="McCarroll" /> مع هذا النظام، لا تتلاشى الخلايا ويمكن استخدام العديد من طرق الزراعة.<ref name="Dyring" /> بالإضافة إلى ذلك، عمليات إنتاج البروتين قابلة للتكاثر.<ref name="Dyring" /><ref name="Olczak" /> يعطي هذا النظام منتجًا متجانسًا.<ref name="Olczak" /> عيب هذا النظام هو الحاجة إلى خطوة فرز إضافية لاختيار الحيوانات [[استنساخ (علم الأحياء الخلوي)|المستنسخة]] القابلة للحياة.<ref name="McCarroll" />
===== طلائعيات كهفية =====
تسمح أنظمة تعبير [[ليشمانيا]] (لا يمكن أن تصيب الثدييات) بإنتاج مستقر ودائم للبروتينات بإنتاجية عالية، في وسائط محددة كيميائيًا. تُظهر البروتينات المُنتجة تعديلات ما بعد الترجمة حقيقية النواة بالكامل، بما في ذلك الارتباط [[غلكزة|بالجليكوزيل]] وتشكيل رابطة ثنائي كبريتيد.
===== أنظمة الثدييات =====
* أنظمة التعبير الأكثر شيوعًا للثدييات هي خلايا مبيض الهامستر الصيني (CHO) وخلايا الكلى الجنينية البشرية (HEK).<ref name="Zhu 1158–1170">{{استشهاد بدورية محكمة
| عدة مؤلفين = Zhu J
| عنوان = Mammalian cell protein expression for biopharmaceutical production
| صحيفة = Biotechnology Advances
| المجلد = 30
| العدد = 5
| صفحات = 1158–70
| تاريخ = 2012-09-01
| pmid = 21968146
| doi = 10.1016/j.biotechadv.2011.08.022
}}</ref><ref name=":0">{{استشهاد بدورية محكمة
| عدة مؤلفين = Almo SC, Love JD
| عنوان = Better and faster: improvements and optimization for mammalian recombinant protein production
| صحيفة = Current Opinion in Structural Biology
| المجلد = 26
| صفحات = 39–43
| تاريخ = June 2014
| pmid = 24721463
| pmc = 4766836
| doi = 10.1016/j.sbi.2014.03.006
| سلسلة = New constructs and expression of proteins / Sequences and topology
}}</ref><ref>{{استشهاد بدورية محكمة
| عدة مؤلفين = Hacker DL, Balasubramanian S
| عنوان = Recombinant protein production from stable mammalian cell lines and pools
| صحيفة = Current Opinion in Structural Biology
| المجلد = 38
| صفحات = 129–36
| تاريخ = June 2016
| pmid = 27322762
| doi = 10.1016/j.sbi.2016.06.005
| سلسلة = New constructs and expression of proteins • Sequences and topology
}}</ref>
* خلية مبيض الهامستر الصيني<ref name=":0" />
* الورم اللمفاوي النخاعي الفأر (على سبيل المثال خلية NS0)<ref name="Zhu 1158–1170" />
* إنسان كامل
** خلايا الكلى الجنينية البشرية (HEK-293)<ref name=":0" />
** خلايا الشبكية الجنينية البشرية (Cru cell's Per.C6)<ref name=":0" />
** خلايا السلى البشرية (Glycotope و CEVEC)
=== أنظمة خالية من الخلايا ===
يتم إنتاج البروتينات الخالية من الخلايا في المختبر باستخدام بوليميراز الحمض النووي الريبي المنقى، والريبوسومات، و tRNA، والنيوكليوتيدات الريبية. يمكن إنتاج هذه الكواشف عن طريق الاستخراج من الخلايا أو من نظام التعبير القائم على الخلية. نظرًا لانخفاض مستويات التعبير والتكلفة العالية للأنظمة الخالية من الخلايا، تُستخدم الأنظمة القائمة على الخلايا على نطاق واسع.<ref>{{استشهاد بدورية محكمة
| عدة مؤلفين = Rosenblum G, Cooperman BS
| عنوان = Engine out of the chassis: cell-free protein synthesis and its uses
| صحيفة = FEBS Letters
| المجلد = 588
| العدد = 2
| صفحات = 261–8
| تاريخ = January 2014
| pmid = 24161673
| pmc = 4133780
| doi = 10.1016/j.febslet.2013.10.016
}}</ref>
== انظر أيضًا ==
* [[تعبير جيني]]
* [[بروتين وحيد الخلية]]
* [[تنقية البروتين]]
* [[تخمر (كيمياء حيوية)]]
* [[بروتينات الخلية المضيف]]
== مراجع ==
{{مراجع}}
{{شريط بوابات|علوم}}
[[تصنيف:تعبير جيني]]
[[تصنيف:تقانة حيوية]]' |
نص الويكي الجديد للصفحة، بعد التعديل (new_wikitext) | '[[ملف:Genetic code.svg|تصغير|العقيدة المركزية التي تصور النسخ من كود الحمض النووي إلى كود الحمض النووي الريبي إلى البروتينات في الخطوة الثانية التي تغطي إنتاج البروتين.]]
'''إنتاج البروتين''' هي تقانة حيوية لتوليد بروتين معين. يتم تحقيقه عادةً عن طريق التلاعب [[تعبير جيني|بالتعبير الجيني]] في كائن حي بحيث يعبر عن كميات كبيرة من [[حمض نووي معاد التركيب]]. يتضمن ذلك نسخ الحمض النووي معاد التركيب إلى [[حمض نووي ريبوزي رسول|الحمض النووي الريبوزي الرسول]] (mRNA)، وترجمة الحمض النووي الريبوزي الرسول إلى سلاسل [[ببتيد|متعددة الببتيد]]، والتي يتم طيها في النهاية إلى [[بروتين|بروتينات]] وظيفية ويمكن [[توجيه البروتين]] لمواقع محددة تحت خلوية أو خارج خلوية.<ref>{{cite journal
| vauthors = Gräslund S, Nordlund P, Weigelt J, Hallberg BM, Bray J, Gileadi O, Knapp S, Oppermann U, Arrowsmith C, Hui R, Ming J, dhe-Paganon S, Park HW, Savchenko A, Yee A, Edwards A, Vincentelli R, Cambillau C, Kim R, Kim SH, Rao Z, Shi Y, Terwilliger TC, Kim CY, Hung LW, Waldo GS, Peleg Y, Albeck S, Unger T, Dym O, Prilusky J, Sussman JL, Stevens RC, Lesley SA, Wilson IA, Joachimiak A, Collart F, Dementieva I, Donnelly MI, Eschenfeldt WH, Kim Y, Stols L, Wu R, Zhou M, Burley SK, Emtage JS, Sauder JM, Thompson D, Bain K, Luz J, Gheyi T, Zhang F, Atwell S, Almo SC, Bonanno JB, Fiser A, Swaminathan S, Studier FW, Chance MR, Sali A, Acton TB, Xiao R, Zhao L, Ma LC, Hunt JF, Tong L, Cunningham K, Inouye M, Anderson S, Janjua H, Shastry R, Ho CK, Wang D, Wang H, Jiang M, Montelione GT, Stuart DI, Owens RJ, Daenke S, Schütz A, Heinemann U, Yokoyama S, Büssow K, Gunsalus KC
| display-authors = 6
| title = Protein production and purification
| journal = Nature Methods
| volume = 5
| issue = 2
| pages = 135–46
| date = February 2008
| pmid = 18235434
| pmc = 3178102
| doi = 10.1038/nmeth.f.202
}}</ref>
تُستخدم أنظمة إنتاج البروتين (المعروفة أيضًا باسم أنظمة [[تعبير جيني|التعبير]]) في [[قائمة علوم الحياة|علوم الحياة]] و<nowiki/>[[تقانة حيوية|التكنولوجيا الحيوية]] و<nowiki/>[[طب|الطب]]. تستخدم أبحاث [[علم الأحياء الجزيئي|البيولوجيا الجزيئية]] العديد من [[بروتين|البروتينات]] و<nowiki/>[[إنزيم|الإنزيمات]]، وكثير منها من أنظمة التعبير؛ بشكل خاص [[بوليمراز الدنا|بوليميريز الحمض النووي الريبوزي منقوص الأكسجين]] [[تفاعل البوليمراز المتسلسل|لـتفاعل البوليمراز المتسلسل]]، [[منتسخة عكسية|النسخ العكسي]] لتحليل الحمض النووي الريبوزي، [[إنزيمات الاقتطاع]] للاستنساخ، ولصنع البروتينات التي يتم فحصها في [[اكتشاف الدواء|اكتشاف الأدوية]] [[مستهدف حيوي|كأهداف بيولوجية]] أو كأدوية محتملة بحد ذاتها. هناك أيضًا تطبيقات مهمة لأنظمة التعبير في [[تخمر صناعي|التخمر الصناعي]]، ولا سيما إنتاج [[مستحضرات دوائية حيوية|الأدوية الحيوية]] مثل [[إنسولين|الأنسولين]] البشري لعلاج [[السكري|مرض السكري]]، وتصنيع [[إنزيم|الإنزيمات]].
== أنظمة إنتاج البروتين ==
تشمل أنظمة إنتاج البروتين المستخدمة بشكل شائع تلك المشتقة من [[بكتيريا|البكتيريا]]،<ref name="pmid10508629">{{cite journal
| vauthors = Baneyx F
| title = Recombinant protein expression in Escherichia coli
| journal = Current Opinion in Biotechnology
| volume = 10
| issue = 5
| pages = 411–21
| date = October 1999
| pmid = 10508629
| doi = 10.1016/s0958-1669(99)00003-8
}}</ref> [[خميرة|الخميرة]]،<ref name="pmid11098467">{{cite journal
| vauthors = Cregg JM, Cereghino JL, Shi J, Higgins DR
| title = Recombinant protein expression in Pichia pastoris
| journal = Molecular Biotechnology
| volume = 16
| issue = 1
| pages = 23–52
| date = September 2000
| pmid = 11098467
| doi = 10.1385/MB:16:1:23
| s2cid = 35874864
}}</ref><ref name="pmid21943899">{{cite book
| vauthors = Malys N, Wishart JA, Oliver SG, McCarthy JE
| title = Methods in Systems Biology
| chapter = Protein production in Saccharomyces cerevisiae for systems biology studies
| journal = Methods in Enzymology
| volume = 500
| pages = 197–212
| year = 2011
| pmid = 21943899
| doi = 10.1016/B978-0-12-385118-5.00011-6
| isbn = 9780123851185
}}</ref> [[فيروس عصوي|الفيروس البكتيري]]/[[حشرة|الحشرات]]،<ref name="pmid15877075">{{cite journal
| vauthors = Kost TA, Condreay JP, Jarvis DL
| title = Baculovirus as versatile vectors for protein expression in insect and mammalian cells
| journal = Nature Biotechnology
| volume = 23
| issue = 5
| pages = 567–75
| date = May 2005
| pmid = 15877075
| pmc = 3610534
| doi = 10.1038/nbt1095
}}</ref> خلايا [[ثدييات|الثدييات]]،<ref name="pmid15766864">{{cite journal
| vauthors = Rosser MP, Xia W, Hartsell S, McCaman M, Zhu Y, Wang S, Harvey S, Bringmann P, Cobb RR
| title = Transient transfection of CHO-K1-S using serum-free medium in suspension: a rapid mammalian protein expression system
| journal = Protein Expression and Purification
| volume = 40
| issue = 2
| pages = 237–43
| date = April 2005
| pmid = 15766864
| doi = 10.1016/j.pep.2004.07.015
}}</ref><ref name="pmid18541133">{{cite journal
| vauthors = Lackner A, Genta K, Koppensteiner H, Herbacek I, Holzmann K, Spiegl-Kreinecker S, Berger W, Grusch M
| title = A bicistronic baculovirus vector for transient and stable protein expression in mammalian cells
| journal = Analytical Biochemistry
| volume = 380
| issue = 1
| pages = 146–8
| date = September 2008
| pmid = 18541133
| doi = 10.1016/j.ab.2008.05.020
}}</ref> ومؤخرًا الفطريات الخيطية.<ref name="Visser 214–223">{{Cite journal
| last1 = Visser
| last8 = Visser
| pages = 214–223
| issue = 3
| volume = 7
| journal = Industrial Biotechnology
| title = Development of a mature fungal technology and production platform for industrial enzymes based on a Myceliophthora thermophila isolate, previously known as Chrysosporium lucknowense C1
| date = June 2011
| display-authors = 6
| name-list-style = vanc
| first9 = Arkady P.
| last9 = Sinitsyn
| first8 = Jaap
| first7 = Jeffrey
| first1 = Hans
| last7 = Bartels
| first6 = Rob
| last6 = Joosten
| first5 = Phil T.
| last5 = Olson
| first4 = Alexander V.
| last4 = Gusakov
| first3 = Peter J.
| last3 = Punt
| first2 = Vivi
| last2 = Joosten
| doi = 10.1089/ind.2011.7.214
}}</ref> عندما يتم إنتاج المستحضرات الصيدلانية الحيوية باستخدام أحد هذه الأنظمة، فإن الشوائب المرتبطة بالعملية المسماة [[بروتينات الخلية المضيف|بروتينات الخلية المضيفة]] تصل أيضًا إلى المنتج النهائي بكميات ضئيلة.<ref>{{Cite journal
| last1 = Wang
| volume = 103
| issn = 0006-3592
| s2cid = 22707536
| pmid = 19388135
| doi = 10.1002/bit.22304
| pages = 446–458
| issue = 3
| language = en
| first1 = Xing
| journal = Biotechnology and Bioengineering
| title = Host cell proteins in biologics development: Identification, quantitation and risk assessment
| date = 2009-06-15
| first3 = Ned M.
| last3 = Mozier
| first2 = Alan K.
| last2 = Hunter
| doi-access = free
}}</ref>
=== الأنظمة المستندة إلى الخلية ===
تعتمد أنظمة التعبير الأقدم والأكثر استخدامًا على الخلايا ويمكن تعريفها على أنها "مزيج من [[ناقل العبارة]]، وحمضه النووي المستنسخ، والمضيف للناقل الذي يوفر سياقًا للسماح بوظيفة الجين الأجنبي في خلية مضيفة، والذي هو إنتاج بروتينات على مستوى عالٍ".<ref name="urlDefinition: expression system from Online Medical Dictionary">{{cite web
| url = http://cancerweb.ncl.ac.uk/cgi-bin/omd?expression+system
| title = Definition: expression system
| date = 1997-11-13
| work = Online Medical Dictionary
| publisher = Centre for Cancer Education, University of Newcastle upon Tyne: Cancerweb
| access-date = 2008-06-10
}}</ref><ref name="urlExpression system">{{cite web
| url = http://www.biology-online.org/dictionary/Expression_system
| title = Expression system - definition
| date = 2005-10-03
| work = Biology Online
| publisher = Biology-Online.org
| access-date = 2008-06-10
}}</ref> الإفراط في التعبير هو مستوى مرتفع بشكل غير طبيعي ومفرط من [[تعبير جيني|التعبير الجيني]] الذي ينتج عنه [[نمط ظاهري]] مرتبط بالجين.<ref name="Overexpression - Oxford">{{cite web
| url = https://en.oxforddictionaries.com/definition/overexpression
| title = overexpression
| date = 2017
| website = Oxford Living Dictionary
| publisher = Oxford University Press
| access-date = 18 May 2017
| quote = The production of abnormally large amounts of a substance which is coded for by a particular gene or group of genes; the appearance in the phenotype to an abnormally high degree of a character or effect attributed to a particular gene.
}}</ref><ref>{{cite journal
| last1 = Jeong
| last18 = Daegelen
| last14 = Kim
| first14 = SC
| last15 = Oh
| first15 = TK
| last16 = Lenski
| first16 = RE
| last17 = Studier
| first17 = FW
| first18 = P
| last13 = Ségurens
| last19 = Kim
| first19 = JF
| title = Genome sequences of Escherichia coli B strains REL606 and BL21(DE3).
| journal = Journal of Molecular Biology
| date = 11 December 2009
| volume = 394
| issue = 4
| pages = 644–52
| doi = 10.1016/j.jmb.2009.09.052
| first13 = B
| first12 = HS
| first1 = H
| first6 = SH
| last2 = Barbe
| first2 = V
| last3 = Lee
| first3 = CH
| last4 = Vallenet
| first4 = D
| last5 = Yu
| first5 = DS
| last6 = Choi
| last7 = Couloux
| last12 = Park
| first7 = A
| last8 = Lee
| first8 = SW
| last9 = Yoon
| first9 = SH
| last10 = Cattolico
| first10 = L
| last11 = Hur
| first11 = CG
| pmid = 19786035
}}</ref>
هناك العديد من الطرق لإدخال [[حمض نووي ريبوزي منقوص الأكسجين|الحمض النووي الريبوزي منقوص الأكسجين]] غريب إلى خلية للتعبير، ويمكن استخدام العديد من الخلايا المضيفة المختلفة للتعبير- لكل نظام تعبير مزايا ومسؤوليات مميزة. عادةً ما يُشار إلى أنظمة التعبير من قبل المضيف ومصدر الحمض النووي أو آلية توصيل المادة الجينية. على سبيل المثال، [[عائل (أحياء)|العوائل]] الشائعة هي [[بكتيريا|البكتيريا]] (مثل [[إشريكية قولونية|البكتيريا الإشريكية القولونية]]، و<nowiki/>[[عصوية رقيقة|العصوية الرقيقة]])، و<nowiki/>[[خميرة|الخميرة]] (مثل السكيراء الجعوية أو فطريات الخميرة <ref name="pmid21943899" />) أو [[حقيقيات النوى|سلالات الخلايا حقيقية النواة]]. مصادر الحمض النووي وآليات التوصيل الشائعة هي [[فيروس|الفيروسات]] (مثل [[فيروس عصوي|الفيروس العصوي]] و<nowiki/>[[فيروس راجع|الفيروسات القهقرية]] و<nowiki/>[[فيروسات غدانية|الفيروسات الغدية]]) و<nowiki/>[[بلازميد|البلازميدات]] و<nowiki/>[[كروموسوم اصطناعي للخميرة|الكروموسومات الاصطناعية]] و<nowiki/>[[عاثية|العاثية]] (مثل لامدا). يعتمد أفضل نظام تعبير على الجين المعني، على سبيل المثال، غالبًا ما يُفضل [[سكيراء جعوية|السكيراء الجعوية]] للبروتينات التي تتطلب [[تعديل ما بعد الترجمة|تعديلًا كبيرًا بعد الترجمة]]. تُستخدم خطوط [[حشرة|الخلايا الحشرية]] أو [[ثدييات|الثديية]] عند الحاجة إلى ربط مرنا يشبه الإنسان. ومع ذلك، فإن التعبير البكتيري يتميز بسهولة إنتاج كميات كبيرة من البروتين ، وهو أمر ضروري [[دراسة البلورات بالأشعة السينية|لتصوير البلورات بالأشعة السينية]] أو تجارب [[رنين مغناطيسي نووي|الرنين المغناطيسي النووي]] لتحديد الهيكل.
نظرًا لأن [[بدائيات النوى|البكتيريا بدائيات النوى]]، فهي غير مجهزة بالآلية الأنزيمية الكاملة لتحقيق التعديلات المطلوبة بعد الترجمة أو الطي الجزيئي. ومن ثم، فإن البروتينات حقيقية النواة متعددة المجالات التي يتم التعبير عنها في البكتيريا غالبًا ما تكون غير وظيفية. أيضًا، تصبح العديد من البروتينات غير قابلة للذوبان كأجسام متضمنة يصعب استردادها دون عوامل تغيير طبيعة قاسية وما تلاه من إعادة تقوية البروتين المرهقة.
لمعالجة هذه المخاوف، تم تطوير أنظمة التعبيرات باستخدام العديد من الخلايا حقيقية النواة للتطبيقات التي تتطلب تطابق البروتينات كما هو الحال في الكائنات حقيقية النواة أو أقرب إليها: يتم نقل خلايا النباتات (مثل التبغ) أو الحشرات أو الثدييات (مثل الأبقار) مع الجينات ومزروعة في المعلق وحتى الأنسجة أو الكائنات الحية الكاملة، لإنتاج البروتينات مطوية بالكامل. ومع ذلك، فإن أنظمة التعبير عن الثدييات [[في الجسم الحي]] لها عائد منخفض وقيود أخرى (تستغرق وقتًا طويلاً، وسمية للخلايا المضيفة، …). للجمع بين الغلة/الإنتاجية العالية وميزات البروتين القابلة للتطوير للبكتيريا والخميرة، والميزات اللاجينية المتقدمة للنباتات والحشرات وأنظمة الثدييات، تم تطوير أنظمة إنتاج البروتين الأخرى باستخدام حقيقيات النوى أحادية الخلية (أي خلايا "[[ليشمانيا]]" غير المسببة للأمراض).
==== الأنظمة البكتيرية ====
===== الإشريكية القولونية =====
[[ملف:EscherichiaColi NIAID.jpg|تصغير|E. coli ، أحد أكثر العوائل شهرة للتعبير الجيني الاصطناعي]]
تعتبر الإشريكية القولونية (E. coli ) واحدة من أكثر مضيفات التعبير استخدامًا، وعادةً ما يتم إدخال الحمض النووي في ناقل التعبير [[بلازميد|البلازميدي]]. تم تطوير تقنيات الإفراط في التعبير في الإشريكية القولونية بشكل جيد وتعمل عن طريق زيادة عدد نسخ الجين أو زيادة قوة الارتباط لمنطقة المحفز، مما يساعد على النسخ.
على سبيل المثال، يمكن [[استنساخ]] تسلسل الحمض النووي الريبوزي منقوص الأكسجين لبروتين ذي أهمية أو [[استنساخ فرعي|استنساخه جزئيًا]] في بلازميد ذي رقم نسخ مرتفع يحتوي على محفز lac (غالبًا LacUV5)، والذي يتم [[تحول (وراثة)|تحويله]] بعد ذلك إلى بكتيريا E. coli. تعمل إضافة تناظرية اللاكتوز على تنشيط محفز اللاكتوز (lac) ويسبب البكتيريا للتعبير عن البروتين الفائدة.
سلالة الإشريكية القولونية BL21 وBL21 (DE3) سلالتان تستخدمان بشكل شائع لإنتاج البروتين. كأعضاء في سلالة B، فإنهم يفتقرون إلى البروتياز lon وOmpT، مما يحمي البروتينات المنتجة من التدهور. يوفر [[طليعة العاثية]] الموجود في BL21 (DE3) بوليميريز [[تي 7 بوليميراز الحمض النووي الرايبوزي]] (مدفوعًا بمحفز LacUV5)، مما يسمح باستخدام نواقل مع محفز T7 بدلاً من ذلك.<ref>{{cite journal
| last1 = Jeong
| last18 = Daegelen
| last14 = Kim
| first14 = SC
| last15 = Oh
| first15 = TK
| last16 = Lenski
| first16 = RE
| last17 = Studier
| first17 = FW
| first18 = P
| last13 = Ségurens
| last19 = Kim
| first19 = JF
| title = Genome sequences of Escherichia coli B strains REL606 and BL21(DE3).
| journal = Journal of Molecular Biology
| date = 11 December 2009
| volume = 394
| issue = 4
| pages = 644–52
| doi = 10.1016/j.jmb.2009.09.052
| first13 = B
| first12 = HS
| first1 = H
| first6 = SH
| last2 = Barbe
| first2 = V
| last3 = Lee
| first3 = CH
| last4 = Vallenet
| first4 = D
| last5 = Yu
| first5 = DS
| last6 = Choi
| last7 = Couloux
| last12 = Park
| first7 = A
| last8 = Lee
| first8 = SW
| last9 = Yoon
| first9 = SH
| last10 = Cattolico
| first10 = L
| last11 = Hur
| first11 = CG
| pmid = 19786035
}}</ref>
===== الوتدية =====
تستخدم الأنواع غير المسببة للأمراض من [[وتدية|الوتديات]] موجبة الجرام للإنتاج التجاري للأحماض الأمينية المختلفة. تُستخدم أنواع الوتدية الجلوتاميك على نطاق واسع لإنتاج [[حمض الجلوتاميك|الغلوتامات]] و<nowiki/>[[لايسين|الليسين]]،<ref>{{cite journal
| vauthors = Brinkrolf K, Schröder J, Pühler A, Tauch A
| title = The transcriptional regulatory repertoire of Corynebacterium glutamicum: reconstruction of the network controlling pathways involved in lysine and glutamate production
| journal = Journal of Biotechnology
| volume = 149
| issue = 3
| pages = 173–82
| date = September 2010
| pmid = 19963020
| doi = 10.1016/j.jbiotec.2009.12.004
}}</ref> ومكونات أغذية الإنسان وعلف الحيوانات والمنتجات الصيدلانية.
تم التعبير عن عامل نمو البشرة البشري النشط وظيفيًا في الوتدية الجلوتاميك،<ref>{{cite journal
| vauthors = Date M, Itaya H, Matsui H, Kikuchi Y
| title = Secretion of human epidermal growth factor by Corynebacterium glutamicum
| journal = Letters in Applied Microbiology
| volume = 42
| issue = 1
| pages = 66–70
| date = January 2006
| pmid = 16411922
| doi = 10.1111/j.1472-765x.2005.01802.x
| doi-access = free
}}</ref> مما يدل على إمكانية الإنتاج على نطاق صناعي للبروتينات البشرية. يمكن استهداف البروتينات المعبر عنها [[إفراز|للإفراز]] إما من خلال المسار الإفرازي العام (Sec) أو مسار الانتقال التوأم أرجينين (Tat).<ref>{{cite journal
| vauthors = Meissner D, Vollstedt A, van Dijl JM, Freudl R
| title = Comparative analysis of twin-arginine (Tat)-dependent protein secretion of a heterologous model protein (GFP) in three different Gram-positive bacteria
| journal = Applied Microbiology and Biotechnology
| volume = 76
| issue = 3
| pages = 633–42
| date = September 2007
| pmid = 17453196
| doi = 10.1007/s00253-007-0934-8
| s2cid = 6238466
}}</ref>
على عكس [[بكتيريا سلبية الغرام|البكتيريا سالبة الجرام]]، تفتقر الوتدية موجبة الجرام إلى [[عديد السكاريد الشحمي|عديدات السكاريد الدهنية]] التي تعمل كسموم داخلية مستضدية في البشر.
===== زائفة متألقة =====
تُستخدم البكتيريا غير الممرضة وسالبة الجرام، [[زائفة متألقة]]، لإنتاج البروتينات المؤتلفة عالية المستوى؛ عادة لتطوير المداواة الحيوية واللقاحات. الزائفة المتألقة هي كائن حي متعدد الاستخدامات من الناحية الأيضية، مما يسمح بفحص الإنتاجية العالية والتطور السريع للبروتينات المعقدة. تشتهر الزائفة المتألقة بقدرتها على إنتاج عيارات عالية من البروتين النشط والقابل للذوبان بشكل سريع وناجح.<ref>{{cite journal
| vauthors = Retallack DM, Jin H, Chew L
| title = Reliable protein production in a Pseudomonas fluorescens expression system
| journal = Protein Expression and Purification
| volume = 81
| issue = 2
| pages = 157–65
| date = February 2012
| pmid = 21968453
| doi = 10.1016/j.pep.2011.09.010
}}</ref>
==== أنظمة حقيقية النواة ====
===== الخميرة =====
تسمح أنظمة التعبير التي تستخدم إما [[سكيراء جعوية]] أو Pichia pastoris بإنتاج مستقر ودائم للبروتينات التي تتم معالجتها بشكل مشابه لخلايا الثدييات، بإنتاجية عالية، في وسائط محددة كيميائيًا من البروتينات.
===== الفطريات الخيطية =====
تم تطوير الفطريات الخيطية، خاصة [[رشاشية|الرشاشيات]] والتريكوديرما، ولكن مؤخرًا تم تطوير Myceliophthora thermophila C1<ref name="Visser 214–223" /> إلى منصات تعبير لفحص وإنتاج [[إنزيمات صناعية|الإنزيمات الصناعية]] المتنوعة. يُظهر نظام التعبير C1 مورفولوجيا منخفضة اللزوجة في الثقافة المغمورة، مما يتيح استخدام وسائط النمو والإنتاج المعقدة.
===== الخلايا المصابة بفيروس باكولوفيروس =====
تسمح الخلايا الحشرية المصابة [[فيروس عصوي|بفيروس باكولوفيروس]]<ref name="ReferenceA">{{cite journal
| vauthors = Altmann F, Staudacher E, Wilson IB, März L
| title = Insect cells as hosts for the expression of recombinant glycoproteins
| journal = Glycoconjugate Journal
| volume = 16
| issue = 2
| pages = 109–23
| date = February 1999
| pmid = 10612411
| doi = 10.1023/A:1026488408951
| s2cid = 34863069
}}</ref> (Sf9 ، Sf21 ، خمسة سلالات عالية) أو خلايا الثدييات<ref>{{cite journal
| vauthors = Kost TA, Condreay JP
| title = Recombinant baculoviruses as expression vectors for insect and mammalian cells
| journal = Current Opinion in Biotechnology
| volume = 10
| issue = 5
| pages = 428–33
| date = October 1999
| pmid = 10508635
| doi = 10.1016/S0958-1669(99)00005-1
}}</ref> ([[خلايا هيلا]]، و خلايا HEK 293) بإنتاج بروتينات غشائية أو غليكوزيلات لا يمكن إنتاجها باستخدام أنظمة فطرية أو بكتيرية.<ref name="ReferenceA" /> يفيد في إنتاج البروتينات بكميات عالية. لا يتم التعبير عن الجينات بشكل مستمر لأن الخلايا المضيفة المصابة تتلاشى في النهاية وتموت خلال كل دورة عدوى.<ref>{{cite journal
| vauthors = Yin J, Li G, Ren X, Herrler G
| title = Select what you need: a comparative evaluation of the advantages and limitations of frequently used expression systems for foreign genes
| journal = Journal of Biotechnology
| volume = 127
| issue = 3
| pages = 335–47
| date = January 2007
| pmid = 16959350
| doi = 10.1016/j.jbiotec.2006.07.012
}}</ref>
===== تعبير خلية حشرية غير ليتي =====
يُعد التعبير عن خلية الحشرات غير اللايتية بديلاً لنظام التعبير عن فيروس باكولوفيروس. في التعبير غير الليلي، يتم [[تعداء|نقل]] النواقل بشكل عابر أو ثابت إلى الحمض النووي الصبغي لخلايا الحشرات من أجل التعبير الجيني اللاحق.<ref name="Dyring">{{cite journal
| last1 = Dyring
| first1 = Charlotte
| year = 2011
| title = Optimising the drosophila S2 expression system for production of therapeutic vaccines
| journal = BioProcessing Journal
| volume = 10
| issue = 2
| pages = 28–35
| doi = 10.12665/j102.dyring
}}</ref><ref name="Olczak">{{cite journal
| vauthors = Olczak M, Olczak T
| title = Comparison of different signal peptides for protein secretion in nonlytic insect cell system
| journal = Analytical Biochemistry
| volume = 359
| issue = 1
| pages = 45–53
| date = December 2006
| pmid = 17046707
| doi = 10.1016/j.ab.2006.09.003
}}</ref> ويتبع ذلك اختيار وفحص الحيوانات المستنسخة المؤتلفة.<ref name="McCarroll">{{cite journal
| vauthors = McCarroll L, King LA
| title = Stable insect cell cultures for recombinant protein production
| journal = Current Opinion in Biotechnology
| volume = 8
| issue = 5
| pages = 590–4
| date = October 1997
| pmid = 9353223
| doi = 10.1016/s0958-1669(97)80034-1
}}</ref> تم استخدام النظام غير اللاحلالي لإعطاء إنتاجية أعلى للبروتين وتعبير أسرع عن الجينات المؤتلفة مقارنة بالتعبير الخلوي المصاب بالفيروس البكتيري.<ref name="Olczak" /> خطوط الخلايا المستخدمة لهذا النظام تشمل: Sf9 ، Sf21 من خلايا [[دودة الحشد الخريفية]]، Hi-5 من خلايا [[وبير الملفوف]]، وخلايا Schneider 2 وخلايا Schneider 3 من خلايا [[ذبابة فاكهة شائعة]].<ref name="Dyring" /><ref name="McCarroll" /> مع هذا النظام، لا تتلاشى الخلايا ويمكن استخدام العديد من طرق الزراعة.<ref name="Dyring" /> بالإضافة إلى ذلك، عمليات إنتاج البروتين قابلة للتكاثر.<ref name="Dyring" /><ref name="Olczak" /> يعطي هذا النظام منتجًا متجانسًا.<ref name="Olczak" /> عيب هذا النظام هو الحاجة إلى خطوة فرز إضافية لاختيار الحيوانات [[استنساخ (علم الأحياء الخلوي)|المستنسخة]] القابلة للحياة.<ref name="McCarroll" />
===== طلائعيات كهفية =====
تسمح أنظمة تعبير [[ليشمانيا]] (لا يمكن أن تصيب الثدييات) بإنتاج مستقر ودائم للبروتينات بإنتاجية عالية، في وسائط محددة كيميائيًا. تُظهر البروتينات المُنتجة تعديلات ما بعد الترجمة حقيقية النواة بالكامل، بما في ذلك الارتباط [[غلكزة|بالجليكوزيل]] وتشكيل رابطة ثنائي كبريتيد.
===== أنظمة الثدييات =====
* أنظمة التعبير الأكثر شيوعًا للثدييات هي خلايا مبيض الهامستر الصيني (CHO) وخلايا الكلى الجنينية البشرية (HEK).<ref name="Zhu 1158–1170">{{cite journal
| vauthors = Zhu J
| title = Mammalian cell protein expression for biopharmaceutical production
| journal = Biotechnology Advances
| volume = 30
| issue = 5
| pages = 1158–70
| date = 2012-09-01
| pmid = 21968146
| doi = 10.1016/j.biotechadv.2011.08.022
}}</ref><ref name=":0">{{cite journal
| vauthors = Almo SC, Love JD
| title = Better and faster: improvements and optimization for mammalian recombinant protein production
| journal = Current Opinion in Structural Biology
| volume = 26
| pages = 39–43
| date = June 2014
| pmid = 24721463
| pmc = 4766836
| doi = 10.1016/j.sbi.2014.03.006
| series = New constructs and expression of proteins / Sequences and topology
}}</ref><ref>{{cite journal
| vauthors = Hacker DL, Balasubramanian S
| title = Recombinant protein production from stable mammalian cell lines and pools
| journal = Current Opinion in Structural Biology
| volume = 38
| pages = 129–36
| date = June 2016
| pmid = 27322762
| doi = 10.1016/j.sbi.2016.06.005
| series = New constructs and expression of proteins • Sequences and topology
}}</ref>
* خلية مبيض الهامستر الصيني<ref name=":0" />
* الورم اللمفاوي النخاعي الفأر (على سبيل المثال خلية NS0)<ref name="Zhu 1158–1170" />
* إنسان كامل
** خلايا الكلى الجنينية البشرية<ref name=":0" />
** خلايا الشبكية الجنينية البشرية<ref name=":0" />
** خلايا السلى البشرية
=== أنظمة خالية من الخلايا ===
يتم إنتاج البروتينات الخالية من الخلايا في المختبر باستخدام بوليميراز الحمض النووي الريبي المنقى، والريبوسومات، و<nowiki/>[[حمض نووي ريبوزي ناقل|الحمض النووي الريبوزي الناقل]]، والنيوكليوتيدات الريبية. يمكن إنتاج هذه الكواشف عن طريق الاستخراج من الخلايا أو من نظام التعبير القائم على الخلية. نظرًا لانخفاض مستويات التعبير والتكلفة العالية للأنظمة الخالية من الخلايا، تُستخدم الأنظمة القائمة على الخلايا على نطاق واسع.<ref>{{cite journal
| vauthors = Rosenblum G, Cooperman BS
| title = Engine out of the chassis: cell-free protein synthesis and its uses
| journal = FEBS Letters
| volume = 588
| issue = 2
| pages = 261–8
| date = January 2014
| pmid = 24161673
| pmc = 4133780
| doi = 10.1016/j.febslet.2013.10.016
}}</ref>
== أنظر أيضاً ==
* [[تعبير جيني]]
* [[بروتين وحيد الخلية]]
* [[تنقية البروتين]]
* [[تخمر (كيمياء حيوية)]]
* [[بروتينات الخلية المضيف]]
== مراجع ==
<references />
{{شريط بوابات|علوم}}
[[تصنيف:تعبير جيني]]
[[تصنيف:تقانة حيوية]]' |
فرق موحد للتغييرات المصنوعة بواسطة التعديل (edit_diff) | '@@ -1,14 +1,12 @@
-{{مقالة غير مراجعة|تاريخ = يناير 2022}}
-{{يتيمة|تاريخ=يناير 2022}}
[[ملف:Genetic code.svg|تصغير|العقيدة المركزية التي تصور النسخ من كود الحمض النووي إلى كود الحمض النووي الريبي إلى البروتينات في الخطوة الثانية التي تغطي إنتاج البروتين.]]
-'''إنتاج البروتين''' هو تقانة حيوية لتوليد بروتين معين. يتم تحقيقه عادةً عن طريق التلاعب [[تعبير جيني|بالتعبير الجيني]] في كائن حي بحيث يعبر عن كميات كبيرة من [[حمض نووي معاد التركيب]]. يتضمن ذلك نسخ الحمض النووي معاد التركيب إلى [[حمض نووي ريبوزي رسول|الحمض النووي الريبوزي الرسول]] (mRNA) ، وترجمة الحمض النووي الريبوزي الرسول إلى سلاسل [[ببتيد|متعددة الببتيد]]، والتي يتم طيها في النهاية إلى [[بروتين|بروتينات]] وظيفية ويمكن [[توجيه البروتين]] لمواقع محددة تحت خلوية أو خارج خلوية.<ref>{{استشهاد بدورية محكمة
-| عدة مؤلفين = Gräslund S, Nordlund P, Weigelt J, Hallberg BM, Bray J, Gileadi O, Knapp S, Oppermann U, Arrowsmith C, Hui R, Ming J, dhe-Paganon S, Park HW, Savchenko A, Yee A, Edwards A, Vincentelli R, Cambillau C, Kim R, Kim SH, Rao Z, Shi Y, Terwilliger TC, Kim CY, Hung LW, Waldo GS, Peleg Y, Albeck S, Unger T, Dym O, Prilusky J, Sussman JL, Stevens RC, Lesley SA, Wilson IA, Joachimiak A, Collart F, Dementieva I, Donnelly MI, Eschenfeldt WH, Kim Y, Stols L, Wu R, Zhou M, Burley SK, Emtage JS, Sauder JM, Thompson D, Bain K, Luz J, Gheyi T, Zhang F, Atwell S, Almo SC, Bonanno JB, Fiser A, Swaminathan S, Studier FW, Chance MR, Sali A, Acton TB, Xiao R, Zhao L, Ma LC, Hunt JF, Tong L, Cunningham K, Inouye M, Anderson S, Janjua H, Shastry R, Ho CK, Wang D, Wang H, Jiang M, Montelione GT, Stuart DI, Owens RJ, Daenke S, Schütz A, Heinemann U, Yokoyama S, Büssow K, Gunsalus KC
-| إظهار المؤلفين = 6
-| عنوان = Protein production and purification
-| صحيفة = Nature Methods
-| المجلد = 5
-| العدد = 2
-| صفحات = 135–46
-| تاريخ = February 2008
+'''إنتاج البروتين''' هي تقانة حيوية لتوليد بروتين معين. يتم تحقيقه عادةً عن طريق التلاعب [[تعبير جيني|بالتعبير الجيني]] في كائن حي بحيث يعبر عن كميات كبيرة من [[حمض نووي معاد التركيب]]. يتضمن ذلك نسخ الحمض النووي معاد التركيب إلى [[حمض نووي ريبوزي رسول|الحمض النووي الريبوزي الرسول]] (mRNA)، وترجمة الحمض النووي الريبوزي الرسول إلى سلاسل [[ببتيد|متعددة الببتيد]]، والتي يتم طيها في النهاية إلى [[بروتين|بروتينات]] وظيفية ويمكن [[توجيه البروتين]] لمواقع محددة تحت خلوية أو خارج خلوية.<ref>{{cite journal
+| vauthors = Gräslund S, Nordlund P, Weigelt J, Hallberg BM, Bray J, Gileadi O, Knapp S, Oppermann U, Arrowsmith C, Hui R, Ming J, dhe-Paganon S, Park HW, Savchenko A, Yee A, Edwards A, Vincentelli R, Cambillau C, Kim R, Kim SH, Rao Z, Shi Y, Terwilliger TC, Kim CY, Hung LW, Waldo GS, Peleg Y, Albeck S, Unger T, Dym O, Prilusky J, Sussman JL, Stevens RC, Lesley SA, Wilson IA, Joachimiak A, Collart F, Dementieva I, Donnelly MI, Eschenfeldt WH, Kim Y, Stols L, Wu R, Zhou M, Burley SK, Emtage JS, Sauder JM, Thompson D, Bain K, Luz J, Gheyi T, Zhang F, Atwell S, Almo SC, Bonanno JB, Fiser A, Swaminathan S, Studier FW, Chance MR, Sali A, Acton TB, Xiao R, Zhao L, Ma LC, Hunt JF, Tong L, Cunningham K, Inouye M, Anderson S, Janjua H, Shastry R, Ho CK, Wang D, Wang H, Jiang M, Montelione GT, Stuart DI, Owens RJ, Daenke S, Schütz A, Heinemann U, Yokoyama S, Büssow K, Gunsalus KC
+| display-authors = 6
+| title = Protein production and purification
+| journal = Nature Methods
+| volume = 5
+| issue = 2
+| pages = 135–46
+| date = February 2008
| pmid = 18235434
| pmc = 3178102
@@ -16,80 +14,80 @@
}}</ref>
-تُستخدم أنظمة إنتاج البروتين (المعروفة أيضًا باسم أنظمة [[تعبير جيني|التعبير]]) في [[قائمة علوم الحياة|علوم الحياة]] و[[تقانة حيوية|التكنولوجيا الحيوية]] و[[طب|الطب]]. تستخدم أبحاث [[علم الأحياء الجزيئي|البيولوجيا الجزيئية]] العديد من [[بروتين|البروتينات]] و[[إنزيم|الإنزيمات]]، وكثير منها من أنظمة التعبير؛ بشكل خاص [[بوليمراز الدنا|بوليميريز DNA]] [[تفاعل البوليمراز المتسلسل|لـتفاعل البوليمراز المتسلسل]] (PCR)، [[منتسخة عكسية|النسخ العكسي]] لتحليل RNA، [[إنزيمات الاقتطاع]] للاستنساخ، ولصنع البروتينات التي يتم فحصها في [[اكتشاف الدواء|اكتشاف الأدوية]] [[مستهدف حيوي|كأهداف بيولوجية]] أو كأدوية محتملة بحد ذاتها. هناك أيضًا تطبيقات مهمة لأنظمة التعبير في [[تخمر صناعي|التخمر الصناعي]]، ولا سيما إنتاج [[مستحضرات دوائية حيوية|الأدوية الحيوية]] مثل [[إنسولين|الأنسولين]] البشري لعلاج [[السكري|مرض السكري]]، وتصنيع [[إنزيم|الإنزيمات]].
+تُستخدم أنظمة إنتاج البروتين (المعروفة أيضًا باسم أنظمة [[تعبير جيني|التعبير]]) في [[قائمة علوم الحياة|علوم الحياة]] و<nowiki/>[[تقانة حيوية|التكنولوجيا الحيوية]] و<nowiki/>[[طب|الطب]]. تستخدم أبحاث [[علم الأحياء الجزيئي|البيولوجيا الجزيئية]] العديد من [[بروتين|البروتينات]] و<nowiki/>[[إنزيم|الإنزيمات]]، وكثير منها من أنظمة التعبير؛ بشكل خاص [[بوليمراز الدنا|بوليميريز الحمض النووي الريبوزي منقوص الأكسجين]] [[تفاعل البوليمراز المتسلسل|لـتفاعل البوليمراز المتسلسل]]، [[منتسخة عكسية|النسخ العكسي]] لتحليل الحمض النووي الريبوزي، [[إنزيمات الاقتطاع]] للاستنساخ، ولصنع البروتينات التي يتم فحصها في [[اكتشاف الدواء|اكتشاف الأدوية]] [[مستهدف حيوي|كأهداف بيولوجية]] أو كأدوية محتملة بحد ذاتها. هناك أيضًا تطبيقات مهمة لأنظمة التعبير في [[تخمر صناعي|التخمر الصناعي]]، ولا سيما إنتاج [[مستحضرات دوائية حيوية|الأدوية الحيوية]] مثل [[إنسولين|الأنسولين]] البشري لعلاج [[السكري|مرض السكري]]، وتصنيع [[إنزيم|الإنزيمات]].
== أنظمة إنتاج البروتين ==
-تشمل أنظمة إنتاج البروتين المستخدمة بشكل شائع تلك المشتقة من [[بكتيريا|البكتيريا]]،<ref name="pmid10508629">{{استشهاد بدورية محكمة
-| عدة مؤلفين = Baneyx F
-| عنوان = Recombinant protein expression in Escherichia coli
-| صحيفة = Current Opinion in Biotechnology
-| المجلد = 10
-| العدد = 5
-| صفحات = 411–21
-| تاريخ = October 1999
+تشمل أنظمة إنتاج البروتين المستخدمة بشكل شائع تلك المشتقة من [[بكتيريا|البكتيريا]]،<ref name="pmid10508629">{{cite journal
+| vauthors = Baneyx F
+| title = Recombinant protein expression in Escherichia coli
+| journal = Current Opinion in Biotechnology
+| volume = 10
+| issue = 5
+| pages = 411–21
+| date = October 1999
| pmid = 10508629
| doi = 10.1016/s0958-1669(99)00003-8
-}}</ref> [[خميرة|الخميرة]]،<ref name="pmid11098467">{{استشهاد بدورية محكمة
-| عدة مؤلفين = Cregg JM, Cereghino JL, Shi J, Higgins DR
-| عنوان = Recombinant protein expression in Pichia pastoris
-| صحيفة = Molecular Biotechnology
-| المجلد = 16
-| العدد = 1
-| صفحات = 23–52
-| تاريخ = September 2000
+}}</ref> [[خميرة|الخميرة]]،<ref name="pmid11098467">{{cite journal
+| vauthors = Cregg JM, Cereghino JL, Shi J, Higgins DR
+| title = Recombinant protein expression in Pichia pastoris
+| journal = Molecular Biotechnology
+| volume = 16
+| issue = 1
+| pages = 23–52
+| date = September 2000
| pmid = 11098467
| doi = 10.1385/MB:16:1:23
| s2cid = 35874864
-}}</ref><ref name="pmid21943899">{{استشهاد بكتاب
-| عدة مؤلفين = Malys N, Wishart JA, Oliver SG, McCarthy JE
-| عنوان = Methods in Systems Biology
-| الفصل = Protein production in Saccharomyces cerevisiae for systems biology studies
-| صحيفة = Methods in Enzymology
-| المجلد = 500
-| صفحات = 197–212
-| سنة = 2011
+}}</ref><ref name="pmid21943899">{{cite book
+| vauthors = Malys N, Wishart JA, Oliver SG, McCarthy JE
+| title = Methods in Systems Biology
+| chapter = Protein production in Saccharomyces cerevisiae for systems biology studies
+| journal = Methods in Enzymology
+| volume = 500
+| pages = 197–212
+| year = 2011
| pmid = 21943899
| doi = 10.1016/B978-0-12-385118-5.00011-6
| isbn = 9780123851185
-}}</ref> [[فيروس عصوي|الفيروس البكتيري]] / [[حشرة|الحشرات]]،<ref name="pmid15877075">{{استشهاد بدورية محكمة
-| عدة مؤلفين = Kost TA, Condreay JP, Jarvis DL
-| عنوان = Baculovirus as versatile vectors for protein expression in insect and mammalian cells
-| صحيفة = Nature Biotechnology
-| المجلد = 23
-| العدد = 5
-| صفحات = 567–75
-| تاريخ = May 2005
+}}</ref> [[فيروس عصوي|الفيروس البكتيري]]/[[حشرة|الحشرات]]،<ref name="pmid15877075">{{cite journal
+| vauthors = Kost TA, Condreay JP, Jarvis DL
+| title = Baculovirus as versatile vectors for protein expression in insect and mammalian cells
+| journal = Nature Biotechnology
+| volume = 23
+| issue = 5
+| pages = 567–75
+| date = May 2005
| pmid = 15877075
| pmc = 3610534
| doi = 10.1038/nbt1095
-}}</ref> خلايا [[ثدييات|الثدييات]]،<ref name="pmid15766864">{{استشهاد بدورية محكمة
-| عدة مؤلفين = Rosser MP, Xia W, Hartsell S, McCaman M, Zhu Y, Wang S, Harvey S, Bringmann P, Cobb RR
-| عنوان = Transient transfection of CHO-K1-S using serum-free medium in suspension: a rapid mammalian protein expression system
-| صحيفة = Protein Expression and Purification
-| المجلد = 40
-| العدد = 2
-| صفحات = 237–43
-| تاريخ = April 2005
+}}</ref> خلايا [[ثدييات|الثدييات]]،<ref name="pmid15766864">{{cite journal
+| vauthors = Rosser MP, Xia W, Hartsell S, McCaman M, Zhu Y, Wang S, Harvey S, Bringmann P, Cobb RR
+| title = Transient transfection of CHO-K1-S using serum-free medium in suspension: a rapid mammalian protein expression system
+| journal = Protein Expression and Purification
+| volume = 40
+| issue = 2
+| pages = 237–43
+| date = April 2005
| pmid = 15766864
| doi = 10.1016/j.pep.2004.07.015
-}}</ref><ref name="pmid18541133">{{استشهاد بدورية محكمة
-| عدة مؤلفين = Lackner A, Genta K, Koppensteiner H, Herbacek I, Holzmann K, Spiegl-Kreinecker S, Berger W, Grusch M
-| عنوان = A bicistronic baculovirus vector for transient and stable protein expression in mammalian cells
-| صحيفة = Analytical Biochemistry
-| المجلد = 380
-| العدد = 1
-| صفحات = 146–8
-| تاريخ = September 2008
+}}</ref><ref name="pmid18541133">{{cite journal
+| vauthors = Lackner A, Genta K, Koppensteiner H, Herbacek I, Holzmann K, Spiegl-Kreinecker S, Berger W, Grusch M
+| title = A bicistronic baculovirus vector for transient and stable protein expression in mammalian cells
+| journal = Analytical Biochemistry
+| volume = 380
+| issue = 1
+| pages = 146–8
+| date = September 2008
| pmid = 18541133
| doi = 10.1016/j.ab.2008.05.020
-}}</ref> ومؤخرًا الفطريات الخيطية مثل Myceliophthora thermophila.<ref name="Visser 214–223">{{استشهاد بدورية محكمة
-| الأخير1 = Visser
+}}</ref> ومؤخرًا الفطريات الخيطية.<ref name="Visser 214–223">{{Cite journal
+| last1 = Visser
| last8 = Visser
-| صفحات = 214–223
-| العدد = 3
-| المجلد = 7
-| صحيفة = Industrial Biotechnology
-| عنوان = Development of a mature fungal technology and production platform for industrial enzymes based on a Myceliophthora thermophila isolate, previously known as Chrysosporium lucknowense C1
-| تاريخ = June 2011
-| إظهار المؤلفين = 6
+| pages = 214–223
+| issue = 3
+| volume = 7
+| journal = Industrial Biotechnology
+| title = Development of a mature fungal technology and production platform for industrial enzymes based on a Myceliophthora thermophila isolate, previously known as Chrysosporium lucknowense C1
+| date = June 2011
+| display-authors = 6
| name-list-style = vanc
| first9 = Arkady P.
@@ -97,63 +95,63 @@
| first8 = Jaap
| first7 = Jeffrey
-| الأول1 = Hans
+| first1 = Hans
| last7 = Bartels
| first6 = Rob
| last6 = Joosten
-| الأول5 = Phil T.
-| الأخير5 = Olson
-| الأول4 = Alexander V.
-| الأخير4 = Gusakov
-| الأول3 = Peter J.
-| الأخير3 = Punt
-| الأول2 = Vivi
-| الأخير2 = Joosten
+| first5 = Phil T.
+| last5 = Olson
+| first4 = Alexander V.
+| last4 = Gusakov
+| first3 = Peter J.
+| last3 = Punt
+| first2 = Vivi
+| last2 = Joosten
| doi = 10.1089/ind.2011.7.214
-}}</ref> عندما يتم إنتاج المستحضرات الصيدلانية الحيوية باستخدام أحد هذه الأنظمة ، فإن الشوائب المرتبطة بالعملية المسماة [[بروتينات الخلية المضيف|بروتينات الخلية المضيفة]] تصل أيضًا إلى المنتج النهائي بكميات ضئيلة.<ref>{{استشهاد بدورية محكمة
-| الأخير1 = Wang
-| المجلد = 103
+}}</ref> عندما يتم إنتاج المستحضرات الصيدلانية الحيوية باستخدام أحد هذه الأنظمة، فإن الشوائب المرتبطة بالعملية المسماة [[بروتينات الخلية المضيف|بروتينات الخلية المضيفة]] تصل أيضًا إلى المنتج النهائي بكميات ضئيلة.<ref>{{Cite journal
+| last1 = Wang
+| volume = 103
| issn = 0006-3592
| s2cid = 22707536
| pmid = 19388135
| doi = 10.1002/bit.22304
-| صفحات = 446–458
-| العدد = 3
-| لغة = en
-| الأول1 = Xing
-| صحيفة = Biotechnology and Bioengineering
-| عنوان = Host cell proteins in biologics development: Identification, quantitation and risk assessment
-| تاريخ = 2009-06-15
-| الأول3 = Ned M.
-| الأخير3 = Mozier
-| الأول2 = Alan K.
-| الأخير2 = Hunter
+| pages = 446–458
+| issue = 3
+| language = en
+| first1 = Xing
+| journal = Biotechnology and Bioengineering
+| title = Host cell proteins in biologics development: Identification, quantitation and risk assessment
+| date = 2009-06-15
+| first3 = Ned M.
+| last3 = Mozier
+| first2 = Alan K.
+| last2 = Hunter
| doi-access = free
}}</ref>
=== الأنظمة المستندة إلى الخلية ===
-تعتمد أنظمة التعبير الأقدم والأكثر استخدامًا على الخلايا ويمكن تعريفها على أنها "مزيج من [[ناقل العبارة]]، وحمضه النووي المستنسخ، والمضيف للناقل الذي يوفر سياقًا للسماح بوظيفة الجين الأجنبي في خلية مضيفة، والذي هو إنتاج بروتينات على مستوى عالٍ ".<ref name="urlDefinition: expression system from Online Medical Dictionary">{{استشهاد ويب
-| مسار = http://cancerweb.ncl.ac.uk/cgi-bin/omd?expression+system
-| عنوان = Definition: expression system
-| تاريخ = 1997-11-13
-| عمل = Online Medical Dictionary
-| ناشر = Centre for Cancer Education, University of Newcastle upon Tyne: Cancerweb
-| تاريخ الوصول = 2008-06-10
-| مسار أرشيف = https://web.archive.org/web/20081221225545/http://cancerweb.ncl.ac.uk/cgi-bin/omd?expression+system | تاريخ أرشيف = 21 ديسمبر 2008 }}</ref><ref name="urlExpression system">{{استشهاد ويب
-| مسار = http://www.biology-online.org/dictionary/Expression_system
-| عنوان = Expression system - definition
-| تاريخ = 2005-10-03
-| عمل = Biology Online
-| ناشر = Biology-Online.org
-| تاريخ الوصول = 2008-06-10
-| مسار الأرشيف = https://web.archive.org/web/20180625050654/https://www.biology-online.org/dictionary/Expression_system | تاريخ الأرشيف = 25 يونيو 2018 }}</ref>الإفراط في التعبير هو مستوى مرتفع بشكل غير طبيعي ومفرط من [[تعبير جيني|التعبير الجيني]] الذي ينتج عنه [[نمط ظاهري]] مرتبط بالجين.<ref name="Overexpression - Oxford">{{استشهاد ويب
-| مسار = https://en.oxforddictionaries.com/definition/overexpression
-| عنوان = overexpression
-| تاريخ = 2017
-| موقع = Oxford Living Dictionary
-| ناشر = Oxford University Press
-| تاريخ الوصول = 18 May 2017
-| اقتباس = The production of abnormally large amounts of a substance which is coded for by a particular gene or group of genes; the appearance in the phenotype to an abnormally high degree of a character or effect attributed to a particular gene.
-| مسار الأرشيف = https://web.archive.org/web/20181020095243/https://en.oxforddictionaries.com/definition/overexpression | تاريخ الأرشيف = 20 أكتوبر 2018 }}</ref><ref name="مولد تلقائيا1">{{استشهاد بدورية محكمة
-| الأخير1 = Jeong
+تعتمد أنظمة التعبير الأقدم والأكثر استخدامًا على الخلايا ويمكن تعريفها على أنها "مزيج من [[ناقل العبارة]]، وحمضه النووي المستنسخ، والمضيف للناقل الذي يوفر سياقًا للسماح بوظيفة الجين الأجنبي في خلية مضيفة، والذي هو إنتاج بروتينات على مستوى عالٍ".<ref name="urlDefinition: expression system from Online Medical Dictionary">{{cite web
+| url = http://cancerweb.ncl.ac.uk/cgi-bin/omd?expression+system
+| title = Definition: expression system
+| date = 1997-11-13
+| work = Online Medical Dictionary
+| publisher = Centre for Cancer Education, University of Newcastle upon Tyne: Cancerweb
+| access-date = 2008-06-10
+}}</ref><ref name="urlExpression system">{{cite web
+| url = http://www.biology-online.org/dictionary/Expression_system
+| title = Expression system - definition
+| date = 2005-10-03
+| work = Biology Online
+| publisher = Biology-Online.org
+| access-date = 2008-06-10
+}}</ref> الإفراط في التعبير هو مستوى مرتفع بشكل غير طبيعي ومفرط من [[تعبير جيني|التعبير الجيني]] الذي ينتج عنه [[نمط ظاهري]] مرتبط بالجين.<ref name="Overexpression - Oxford">{{cite web
+| url = https://en.oxforddictionaries.com/definition/overexpression
+| title = overexpression
+| date = 2017
+| website = Oxford Living Dictionary
+| publisher = Oxford University Press
+| access-date = 18 May 2017
+| quote = The production of abnormally large amounts of a substance which is coded for by a particular gene or group of genes; the appearance in the phenotype to an abnormally high degree of a character or effect attributed to a particular gene.
+}}</ref><ref>{{cite journal
+| last1 = Jeong
| last18 = Daegelen
| last14 = Kim
@@ -169,23 +167,23 @@
| last19 = Kim
| first19 = JF
-| عنوان = Genome sequences of Escherichia coli B strains REL606 and BL21(DE3).
-| صحيفة = Journal of Molecular Biology
-| تاريخ = 11 December 2009
-| المجلد = 394
-| العدد = 4
-| صفحات = 644–52
+| title = Genome sequences of Escherichia coli B strains REL606 and BL21(DE3).
+| journal = Journal of Molecular Biology
+| date = 11 December 2009
+| volume = 394
+| issue = 4
+| pages = 644–52
| doi = 10.1016/j.jmb.2009.09.052
| first13 = B
| first12 = HS
-| الأول1 = H
+| first1 = H
| first6 = SH
-| الأخير2 = Barbe
-| الأول2 = V
-| الأخير3 = Lee
-| الأول3 = CH
-| الأخير4 = Vallenet
-| الأول4 = D
-| الأخير5 = Yu
-| الأول5 = DS
+| last2 = Barbe
+| first2 = V
+| last3 = Lee
+| first3 = CH
+| last4 = Vallenet
+| first4 = D
+| last5 = Yu
+| first5 = DS
| last6 = Choi
| last7 = Couloux
@@ -203,9 +201,9 @@
}}</ref>
-هناك العديد من الطرق لإدخال [[حمض نووي ريبوزي منقوص الأكسجين|DNA]] غريب إلى خلية للتعبير، ويمكن استخدام العديد من الخلايا المضيفة المختلفة للتعبير- لكل نظام تعبير مزايا ومسؤوليات مميزة. عادةً ما يُشار إلى أنظمة التعبير من قبل المضيف ومصدر الحمض النووي أو آلية توصيل المادة الجينية. على سبيل المثال، [[عائل (أحياء)|العوائل]] الشائعة هي [[بكتيريا|البكتيريا]] (مثل [[إشريكية قولونية|البكتيريا الإشريكية القولونية]]، و[[عصوية رقيقة|العصوية الرقيقة]])، و[[خميرة|الخميرة]] (مثل S.cerevisiae <ref name="pmid21943899" />) أو [[حقيقيات النوى|سلالات الخلايا حقيقية النواة]]. مصادر الحمض النووي وآليات التوصيل الشائعة هي [[فيروس|الفيروسات]] (مثل [[فيروس عصوي|الفيروس العصوي]] و[[فيروس راجع|الفيروسات القهقرية]] و[[فيروسات غدانية|الفيروسات الغدية]]) و[[بلازميد|البلازميدات]] و[[كروموسوم اصطناعي للخميرة|الكروموسومات الاصطناعية]] و[[عاثية|العاثية]] (مثل لامدا). يعتمد أفضل نظام تعبير على الجين المعني، على سبيل المثال، غالبًا ما يُفضل [[سكيراء جعوية|السكيراء الجعوية]] للبروتينات التي تتطلب [[تعديل ما بعد الترجمة|تعديلًا كبيرًا بعد الترجمة]]. تُستخدم خطوط [[حشرة|الخلايا الحشرية]] أو [[ثدييات|الثديية]] عند الحاجة إلى ربط مرنا يشبه الإنسان. ومع ذلك، فإن التعبير البكتيري يتميز بسهولة إنتاج كميات كبيرة من البروتين ، وهو أمر ضروري [[دراسة البلورات بالأشعة السينية|لتصوير البلورات بالأشعة السينية]] أو تجارب [[رنين مغناطيسي نووي|الرنين المغناطيسي النووي]] لتحديد الهيكل.
+هناك العديد من الطرق لإدخال [[حمض نووي ريبوزي منقوص الأكسجين|الحمض النووي الريبوزي منقوص الأكسجين]] غريب إلى خلية للتعبير، ويمكن استخدام العديد من الخلايا المضيفة المختلفة للتعبير- لكل نظام تعبير مزايا ومسؤوليات مميزة. عادةً ما يُشار إلى أنظمة التعبير من قبل المضيف ومصدر الحمض النووي أو آلية توصيل المادة الجينية. على سبيل المثال، [[عائل (أحياء)|العوائل]] الشائعة هي [[بكتيريا|البكتيريا]] (مثل [[إشريكية قولونية|البكتيريا الإشريكية القولونية]]، و<nowiki/>[[عصوية رقيقة|العصوية الرقيقة]])، و<nowiki/>[[خميرة|الخميرة]] (مثل السكيراء الجعوية أو فطريات الخميرة <ref name="pmid21943899" />) أو [[حقيقيات النوى|سلالات الخلايا حقيقية النواة]]. مصادر الحمض النووي وآليات التوصيل الشائعة هي [[فيروس|الفيروسات]] (مثل [[فيروس عصوي|الفيروس العصوي]] و<nowiki/>[[فيروس راجع|الفيروسات القهقرية]] و<nowiki/>[[فيروسات غدانية|الفيروسات الغدية]]) و<nowiki/>[[بلازميد|البلازميدات]] و<nowiki/>[[كروموسوم اصطناعي للخميرة|الكروموسومات الاصطناعية]] و<nowiki/>[[عاثية|العاثية]] (مثل لامدا). يعتمد أفضل نظام تعبير على الجين المعني، على سبيل المثال، غالبًا ما يُفضل [[سكيراء جعوية|السكيراء الجعوية]] للبروتينات التي تتطلب [[تعديل ما بعد الترجمة|تعديلًا كبيرًا بعد الترجمة]]. تُستخدم خطوط [[حشرة|الخلايا الحشرية]] أو [[ثدييات|الثديية]] عند الحاجة إلى ربط مرنا يشبه الإنسان. ومع ذلك، فإن التعبير البكتيري يتميز بسهولة إنتاج كميات كبيرة من البروتين ، وهو أمر ضروري [[دراسة البلورات بالأشعة السينية|لتصوير البلورات بالأشعة السينية]] أو تجارب [[رنين مغناطيسي نووي|الرنين المغناطيسي النووي]] لتحديد الهيكل.
نظرًا لأن [[بدائيات النوى|البكتيريا بدائيات النوى]]، فهي غير مجهزة بالآلية الأنزيمية الكاملة لتحقيق التعديلات المطلوبة بعد الترجمة أو الطي الجزيئي. ومن ثم، فإن البروتينات حقيقية النواة متعددة المجالات التي يتم التعبير عنها في البكتيريا غالبًا ما تكون غير وظيفية. أيضًا، تصبح العديد من البروتينات غير قابلة للذوبان كأجسام متضمنة يصعب استردادها دون عوامل تغيير طبيعة قاسية وما تلاه من إعادة تقوية البروتين المرهقة.
-لمعالجة هذه المخاوف، تم تطوير أنظمة التعبيرات باستخدام العديد من الخلايا حقيقية النواة للتطبيقات التي تتطلب تطابق البروتينات كما هو الحال في الكائنات حقيقية النواة أو أقرب إليها: يتم نقل خلايا النباتات (مثل التبغ) أو الحشرات أو الثدييات (مثل الأبقار) مع الجينات و مزروعة في المعلق وحتى الأنسجة أو الكائنات الحية الكاملة ، لإنتاج البروتينات مطوية بالكامل. ومع ذلك ، فإن أنظمة التعبير عن الثدييات [[في الجسم الحي]] لها عائد منخفض وقيود أخرى (تستغرق وقتًا طويلاً ، وسمية للخلايا المضيفة، ..). للجمع بين الغلة / الإنتاجية العالية وميزات البروتين القابلة للتطوير للبكتيريا والخميرة، والميزات اللاجينية المتقدمة للنباتات والحشرات وأنظمة الثدييات، تم تطوير أنظمة إنتاج البروتين الأخرى باستخدام حقيقيات النوى أحادية الخلية (أي خلايا "[[ليشمانيا]]" غير المسببة للأمراض).
+لمعالجة هذه المخاوف، تم تطوير أنظمة التعبيرات باستخدام العديد من الخلايا حقيقية النواة للتطبيقات التي تتطلب تطابق البروتينات كما هو الحال في الكائنات حقيقية النواة أو أقرب إليها: يتم نقل خلايا النباتات (مثل التبغ) أو الحشرات أو الثدييات (مثل الأبقار) مع الجينات ومزروعة في المعلق وحتى الأنسجة أو الكائنات الحية الكاملة، لإنتاج البروتينات مطوية بالكامل. ومع ذلك، فإن أنظمة التعبير عن الثدييات [[في الجسم الحي]] لها عائد منخفض وقيود أخرى (تستغرق وقتًا طويلاً، وسمية للخلايا المضيفة، …). للجمع بين الغلة/الإنتاجية العالية وميزات البروتين القابلة للتطوير للبكتيريا والخميرة، والميزات اللاجينية المتقدمة للنباتات والحشرات وأنظمة الثدييات، تم تطوير أنظمة إنتاج البروتين الأخرى باستخدام حقيقيات النوى أحادية الخلية (أي خلايا "[[ليشمانيا]]" غير المسببة للأمراض).
==== الأنظمة البكتيرية ====
@@ -215,40 +213,87 @@
تعتبر الإشريكية القولونية (E. coli ) واحدة من أكثر مضيفات التعبير استخدامًا، وعادةً ما يتم إدخال الحمض النووي في ناقل التعبير [[بلازميد|البلازميدي]]. تم تطوير تقنيات الإفراط في التعبير في الإشريكية القولونية بشكل جيد وتعمل عن طريق زيادة عدد نسخ الجين أو زيادة قوة الارتباط لمنطقة المحفز، مما يساعد على النسخ.
-على سبيل المثال، يمكن [[استنساخ]] تسلسل DNA لبروتين ذي أهمية أو [[استنساخ فرعي|استنساخه جزئيًا]] في بلازميد ذي رقم نسخ مرتفع يحتوي على محفز lac (غالبًا LacUV5)، والذي يتم [[تحول (وراثة)|تحويله]] بعد ذلك إلى بكتيريا E. coli. تعمل إضافة IPTG (تناظرية اللاكتوز) على تنشيط محفز اللاكتوز (lac) ويسبب البكتيريا للتعبير عن البروتين الفائدة.
+على سبيل المثال، يمكن [[استنساخ]] تسلسل الحمض النووي الريبوزي منقوص الأكسجين لبروتين ذي أهمية أو [[استنساخ فرعي|استنساخه جزئيًا]] في بلازميد ذي رقم نسخ مرتفع يحتوي على محفز lac (غالبًا LacUV5)، والذي يتم [[تحول (وراثة)|تحويله]] بعد ذلك إلى بكتيريا E. coli. تعمل إضافة تناظرية اللاكتوز على تنشيط محفز اللاكتوز (lac) ويسبب البكتيريا للتعبير عن البروتين الفائدة.
-سلالة الإشريكية القولونية BL21 و BL21 (DE3) سلالتان تستخدمان بشكل شائع لإنتاج البروتين. كأعضاء في سلالة B ، فإنهم يفتقرون إلى البروتياز lon و OmpT ، مما يحمي البروتينات المنتجة من التدهور. يوفر Prophage DE3 الموجود في BL21 (DE3) بوليميريز [[تي 7 بوليميراز الحمض النووي الرايبوزي|T7 RNA]] (مدفوعًا بمحفز LacUV5)، مما يسمح باستخدام نواقل مع محفز T7 بدلاً من ذلك.<ref name="مولد تلقائيا1" />
+سلالة الإشريكية القولونية BL21 وBL21 (DE3) سلالتان تستخدمان بشكل شائع لإنتاج البروتين. كأعضاء في سلالة B، فإنهم يفتقرون إلى البروتياز lon وOmpT، مما يحمي البروتينات المنتجة من التدهور. يوفر [[طليعة العاثية]] الموجود في BL21 (DE3) بوليميريز [[تي 7 بوليميراز الحمض النووي الرايبوزي]] (مدفوعًا بمحفز LacUV5)، مما يسمح باستخدام نواقل مع محفز T7 بدلاً من ذلك.<ref>{{cite journal
+| last1 = Jeong
+| last18 = Daegelen
+| last14 = Kim
+| first14 = SC
+| last15 = Oh
+| first15 = TK
+| last16 = Lenski
+| first16 = RE
+| last17 = Studier
+| first17 = FW
+| first18 = P
+| last13 = Ségurens
+| last19 = Kim
+| first19 = JF
+| title = Genome sequences of Escherichia coli B strains REL606 and BL21(DE3).
+| journal = Journal of Molecular Biology
+| date = 11 December 2009
+| volume = 394
+| issue = 4
+| pages = 644–52
+| doi = 10.1016/j.jmb.2009.09.052
+| first13 = B
+| first12 = HS
+| first1 = H
+| first6 = SH
+| last2 = Barbe
+| first2 = V
+| last3 = Lee
+| first3 = CH
+| last4 = Vallenet
+| first4 = D
+| last5 = Yu
+| first5 = DS
+| last6 = Choi
+| last7 = Couloux
+| last12 = Park
+| first7 = A
+| last8 = Lee
+| first8 = SW
+| last9 = Yoon
+| first9 = SH
+| last10 = Cattolico
+| first10 = L
+| last11 = Hur
+| first11 = CG
+| pmid = 19786035
+}}</ref>
===== الوتدية =====
-تستخدم الأنواع غير المسببة للأمراض من [[وتدية|الوتديات]] موجبة الجرام للإنتاج التجاري للأحماض الأمينية المختلفة. تُستخدم أنواع C. glutamicum على نطاق واسع لإنتاج [[حمض الجلوتاميك|الغلوتامات]] و[[لايسين|الليسين]]،<ref>{{استشهاد بدورية محكمة
-| عدة مؤلفين = Brinkrolf K, Schröder J, Pühler A, Tauch A
-| عنوان = The transcriptional regulatory repertoire of Corynebacterium glutamicum: reconstruction of the network controlling pathways involved in lysine and glutamate production
-| صحيفة = Journal of Biotechnology
-| المجلد = 149
-| العدد = 3
-| صفحات = 173–82
-| تاريخ = September 2010
+تستخدم الأنواع غير المسببة للأمراض من [[وتدية|الوتديات]] موجبة الجرام للإنتاج التجاري للأحماض الأمينية المختلفة. تُستخدم أنواع الوتدية الجلوتاميك على نطاق واسع لإنتاج [[حمض الجلوتاميك|الغلوتامات]] و<nowiki/>[[لايسين|الليسين]]،<ref>{{cite journal
+| vauthors = Brinkrolf K, Schröder J, Pühler A, Tauch A
+| title = The transcriptional regulatory repertoire of Corynebacterium glutamicum: reconstruction of the network controlling pathways involved in lysine and glutamate production
+| journal = Journal of Biotechnology
+| volume = 149
+| issue = 3
+| pages = 173–82
+| date = September 2010
| pmid = 19963020
| doi = 10.1016/j.jbiotec.2009.12.004
}}</ref> ومكونات أغذية الإنسان وعلف الحيوانات والمنتجات الصيدلانية.
-تم التعبير عن عامل نمو البشرة البشري النشط وظيفيًا في C. glutamicum،<ref>{{استشهاد بدورية محكمة
-| عدة مؤلفين = Date M, Itaya H, Matsui H, Kikuchi Y
-| عنوان = Secretion of human epidermal growth factor by Corynebacterium glutamicum
-| صحيفة = Letters in Applied Microbiology
-| المجلد = 42
-| العدد = 1
-| صفحات = 66–70
-| تاريخ = January 2006
+تم التعبير عن عامل نمو البشرة البشري النشط وظيفيًا في الوتدية الجلوتاميك،<ref>{{cite journal
+| vauthors = Date M, Itaya H, Matsui H, Kikuchi Y
+| title = Secretion of human epidermal growth factor by Corynebacterium glutamicum
+| journal = Letters in Applied Microbiology
+| volume = 42
+| issue = 1
+| pages = 66–70
+| date = January 2006
| pmid = 16411922
| doi = 10.1111/j.1472-765x.2005.01802.x
| doi-access = free
-}}</ref>مما يدل على إمكانية الإنتاج على نطاق صناعي للبروتينات البشرية. يمكن استهداف البروتينات المعبر عنها [[إفراز|للإفراز]] إما من خلال المسار الإفرازي العام (Sec) أو مسار الانتقال التوأم أرجينين (Tat).<ref>{{استشهاد بدورية محكمة
-| عدة مؤلفين = Meissner D, Vollstedt A, van Dijl JM, Freudl R
-| عنوان = Comparative analysis of twin-arginine (Tat)-dependent protein secretion of a heterologous model protein (GFP) in three different Gram-positive bacteria
-| صحيفة = Applied Microbiology and Biotechnology
-| المجلد = 76
-| العدد = 3
-| صفحات = 633–42
-| تاريخ = September 2007
+}}</ref> مما يدل على إمكانية الإنتاج على نطاق صناعي للبروتينات البشرية. يمكن استهداف البروتينات المعبر عنها [[إفراز|للإفراز]] إما من خلال المسار الإفرازي العام (Sec) أو مسار الانتقال التوأم أرجينين (Tat).<ref>{{cite journal
+| vauthors = Meissner D, Vollstedt A, van Dijl JM, Freudl R
+| title = Comparative analysis of twin-arginine (Tat)-dependent protein secretion of a heterologous model protein (GFP) in three different Gram-positive bacteria
+| journal = Applied Microbiology and Biotechnology
+| volume = 76
+| issue = 3
+| pages = 633–42
+| date = September 2007
| pmid = 17453196
| doi = 10.1007/s00253-007-0934-8
@@ -259,12 +304,12 @@
===== زائفة متألقة =====
-تُستخدم البكتيريا غير الممرضة وسالبة الجرام، [[زائفة متألقة]]، لإنتاج البروتينات المؤتلفة عالية المستوى؛ عادة لتطوير المداواة الحيوية واللقاحات. P. fluorescens هو كائن حي متعدد الاستخدامات من الناحية الأيضية، مما يسمح بفحص الإنتاجية العالية والتطور السريع للبروتينات المعقدة. تشتهر P. fluorescens بقدرتها على إنتاج عيارات عالية من البروتين النشط والقابل للذوبان بشكل سريع وناجح.<ref>{{استشهاد بدورية محكمة
-| عدة مؤلفين = Retallack DM, Jin H, Chew L
-| عنوان = Reliable protein production in a Pseudomonas fluorescens expression system
-| صحيفة = Protein Expression and Purification
-| المجلد = 81
-| العدد = 2
-| صفحات = 157–65
-| تاريخ = February 2012
+تُستخدم البكتيريا غير الممرضة وسالبة الجرام، [[زائفة متألقة]]، لإنتاج البروتينات المؤتلفة عالية المستوى؛ عادة لتطوير المداواة الحيوية واللقاحات. الزائفة المتألقة هي كائن حي متعدد الاستخدامات من الناحية الأيضية، مما يسمح بفحص الإنتاجية العالية والتطور السريع للبروتينات المعقدة. تشتهر الزائفة المتألقة بقدرتها على إنتاج عيارات عالية من البروتين النشط والقابل للذوبان بشكل سريع وناجح.<ref>{{cite journal
+| vauthors = Retallack DM, Jin H, Chew L
+| title = Reliable protein production in a Pseudomonas fluorescens expression system
+| journal = Protein Expression and Purification
+| volume = 81
+| issue = 2
+| pages = 157–65
+| date = February 2012
| pmid = 21968453
| doi = 10.1016/j.pep.2011.09.010
@@ -277,36 +322,36 @@
===== الفطريات الخيطية =====
-تم تطوير الفطريات الخيطية، خاصة [[رشاشية|الرشاشيات]] والتريكوديرما، ولكن مؤخرًا تم تطوير Myceliophthora thermophila C1<ref name="Visser 214–223" /> إلى منصات تعبير لفحص وإنتاج [[إنزيمات صناعية|الإنزيمات الصناعية]] المتنوعة. يُظهر نظام التعبير C1 مورفولوجيا منخفضة اللزوجة في الثقافة المغمورة ، مما يتيح استخدام وسائط النمو والإنتاج المعقدة.
+تم تطوير الفطريات الخيطية، خاصة [[رشاشية|الرشاشيات]] والتريكوديرما، ولكن مؤخرًا تم تطوير Myceliophthora thermophila C1<ref name="Visser 214–223" /> إلى منصات تعبير لفحص وإنتاج [[إنزيمات صناعية|الإنزيمات الصناعية]] المتنوعة. يُظهر نظام التعبير C1 مورفولوجيا منخفضة اللزوجة في الثقافة المغمورة، مما يتيح استخدام وسائط النمو والإنتاج المعقدة.
===== الخلايا المصابة بفيروس باكولوفيروس =====
-تسمح الخلايا الحشرية المصابة [[فيروس عصوي|بفيروس باكولوفيروس]]<ref name="ReferenceA">{{استشهاد بدورية محكمة
-| عدة مؤلفين = Altmann F, Staudacher E, Wilson IB, März L
-| عنوان = Insect cells as hosts for the expression of recombinant glycoproteins
-| صحيفة = Glycoconjugate Journal
-| المجلد = 16
-| العدد = 2
-| صفحات = 109–23
-| تاريخ = February 1999
+تسمح الخلايا الحشرية المصابة [[فيروس عصوي|بفيروس باكولوفيروس]]<ref name="ReferenceA">{{cite journal
+| vauthors = Altmann F, Staudacher E, Wilson IB, März L
+| title = Insect cells as hosts for the expression of recombinant glycoproteins
+| journal = Glycoconjugate Journal
+| volume = 16
+| issue = 2
+| pages = 109–23
+| date = February 1999
| pmid = 10612411
| doi = 10.1023/A:1026488408951
| s2cid = 34863069
-}}</ref> (Sf9 ، Sf21 ، خمسة سلالات عالية) أو خلايا الثدييات<ref>{{استشهاد بدورية محكمة
-| عدة مؤلفين = Kost TA, Condreay JP
-| عنوان = Recombinant baculoviruses as expression vectors for insect and mammalian cells
-| صحيفة = Current Opinion in Biotechnology
-| المجلد = 10
-| العدد = 5
-| صفحات = 428–33
-| تاريخ = October 1999
+}}</ref> (Sf9 ، Sf21 ، خمسة سلالات عالية) أو خلايا الثدييات<ref>{{cite journal
+| vauthors = Kost TA, Condreay JP
+| title = Recombinant baculoviruses as expression vectors for insect and mammalian cells
+| journal = Current Opinion in Biotechnology
+| volume = 10
+| issue = 5
+| pages = 428–33
+| date = October 1999
| pmid = 10508635
| doi = 10.1016/S0958-1669(99)00005-1
-}}</ref> ([[خلايا هيلا]]، و خلايا HEK 293) بإنتاج بروتينات غشائية أو غليكوزيلات لا يمكن إنتاجها باستخدام أنظمة فطرية أو بكتيرية.<ref name="ReferenceA" /> يفيد في إنتاج البروتينات بكميات عالية. لا يتم التعبير عن الجينات بشكل مستمر لأن الخلايا المضيفة المصابة تتلاشى في النهاية وتموت خلال كل دورة عدوى.<ref>{{استشهاد بدورية محكمة
-| عدة مؤلفين = Yin J, Li G, Ren X, Herrler G
-| عنوان = Select what you need: a comparative evaluation of the advantages and limitations of frequently used expression systems for foreign genes
-| صحيفة = Journal of Biotechnology
-| المجلد = 127
-| العدد = 3
-| صفحات = 335–47
-| تاريخ = January 2007
+}}</ref> ([[خلايا هيلا]]، و خلايا HEK 293) بإنتاج بروتينات غشائية أو غليكوزيلات لا يمكن إنتاجها باستخدام أنظمة فطرية أو بكتيرية.<ref name="ReferenceA" /> يفيد في إنتاج البروتينات بكميات عالية. لا يتم التعبير عن الجينات بشكل مستمر لأن الخلايا المضيفة المصابة تتلاشى في النهاية وتموت خلال كل دورة عدوى.<ref>{{cite journal
+| vauthors = Yin J, Li G, Ren X, Herrler G
+| title = Select what you need: a comparative evaluation of the advantages and limitations of frequently used expression systems for foreign genes
+| journal = Journal of Biotechnology
+| volume = 127
+| issue = 3
+| pages = 335–47
+| date = January 2007
| pmid = 16959350
| doi = 10.1016/j.jbiotec.2006.07.012
@@ -314,89 +359,89 @@
===== تعبير خلية حشرية غير ليتي =====
-يُعد التعبير عن خلية الحشرات غير اللايتية بديلاً لنظام التعبير عن فيروس باكولوفيروس. في التعبير غير الليلي، يتم [[تعداء|نقل]] النواقل بشكل عابر أو ثابت إلى الحمض النووي الصبغي لخلايا الحشرات من أجل التعبير الجيني اللاحق.<ref name="Dyring">{{استشهاد بدورية محكمة
-| الأخير1 = Dyring
-| الأول1 = Charlotte
-| سنة = 2011
-| عنوان = Optimising the drosophila S2 expression system for production of therapeutic vaccines
-| صحيفة = BioProcessing Journal
-| المجلد = 10
-| العدد = 2
-| صفحات = 28–35
+يُعد التعبير عن خلية الحشرات غير اللايتية بديلاً لنظام التعبير عن فيروس باكولوفيروس. في التعبير غير الليلي، يتم [[تعداء|نقل]] النواقل بشكل عابر أو ثابت إلى الحمض النووي الصبغي لخلايا الحشرات من أجل التعبير الجيني اللاحق.<ref name="Dyring">{{cite journal
+| last1 = Dyring
+| first1 = Charlotte
+| year = 2011
+| title = Optimising the drosophila S2 expression system for production of therapeutic vaccines
+| journal = BioProcessing Journal
+| volume = 10
+| issue = 2
+| pages = 28–35
| doi = 10.12665/j102.dyring
-}}</ref><ref name="Olczak">{{استشهاد بدورية محكمة
-| عدة مؤلفين = Olczak M, Olczak T
-| عنوان = Comparison of different signal peptides for protein secretion in nonlytic insect cell system
-| صحيفة = Analytical Biochemistry
-| المجلد = 359
-| العدد = 1
-| صفحات = 45–53
-| تاريخ = December 2006
+}}</ref><ref name="Olczak">{{cite journal
+| vauthors = Olczak M, Olczak T
+| title = Comparison of different signal peptides for protein secretion in nonlytic insect cell system
+| journal = Analytical Biochemistry
+| volume = 359
+| issue = 1
+| pages = 45–53
+| date = December 2006
| pmid = 17046707
| doi = 10.1016/j.ab.2006.09.003
-}}</ref> ويتبع ذلك اختيار وفحص الحيوانات المستنسخة المؤتلفة.<ref name="McCarroll">{{استشهاد بدورية محكمة
-| عدة مؤلفين = McCarroll L, King LA
-| عنوان = Stable insect cell cultures for recombinant protein production
-| صحيفة = Current Opinion in Biotechnology
-| المجلد = 8
-| العدد = 5
-| صفحات = 590–4
-| تاريخ = October 1997
+}}</ref> ويتبع ذلك اختيار وفحص الحيوانات المستنسخة المؤتلفة.<ref name="McCarroll">{{cite journal
+| vauthors = McCarroll L, King LA
+| title = Stable insect cell cultures for recombinant protein production
+| journal = Current Opinion in Biotechnology
+| volume = 8
+| issue = 5
+| pages = 590–4
+| date = October 1997
| pmid = 9353223
| doi = 10.1016/s0958-1669(97)80034-1
-}}</ref> تم استخدام النظام غير اللاحلالي لإعطاء إنتاجية أعلى للبروتين وتعبير أسرع عن الجينات المؤتلفة مقارنة بالتعبير الخلوي المصاب بالفيروس البكتيري.<ref name="Olczak" /> خطوط الخلايا المستخدمة لهذا النظام تشمل: Sf9 ، Sf21 من خلايا [[دودة الحشد الخريفية]]، Hi-5 من خلايا [[وبير الملفوف]]، وخلايا Schneider 2 وخلايا Schneider 3 من خلايا [[ذبابة فاكهة شائعة]].<ref name="Dyring" /><ref name="McCarroll" /> مع هذا النظام، لا تتلاشى الخلايا ويمكن استخدام العديد من طرق الزراعة.<ref name="Dyring" /> بالإضافة إلى ذلك، عمليات إنتاج البروتين قابلة للتكاثر.<ref name="Dyring" /><ref name="Olczak" /> يعطي هذا النظام منتجًا متجانسًا.<ref name="Olczak" /> عيب هذا النظام هو الحاجة إلى خطوة فرز إضافية لاختيار الحيوانات [[استنساخ (علم الأحياء الخلوي)|المستنسخة]] القابلة للحياة.<ref name="McCarroll" />
+}}</ref> تم استخدام النظام غير اللاحلالي لإعطاء إنتاجية أعلى للبروتين وتعبير أسرع عن الجينات المؤتلفة مقارنة بالتعبير الخلوي المصاب بالفيروس البكتيري.<ref name="Olczak" /> خطوط الخلايا المستخدمة لهذا النظام تشمل: Sf9 ، Sf21 من خلايا [[دودة الحشد الخريفية]]، Hi-5 من خلايا [[وبير الملفوف]]، وخلايا Schneider 2 وخلايا Schneider 3 من خلايا [[ذبابة فاكهة شائعة]].<ref name="Dyring" /><ref name="McCarroll" /> مع هذا النظام، لا تتلاشى الخلايا ويمكن استخدام العديد من طرق الزراعة.<ref name="Dyring" /> بالإضافة إلى ذلك، عمليات إنتاج البروتين قابلة للتكاثر.<ref name="Dyring" /><ref name="Olczak" /> يعطي هذا النظام منتجًا متجانسًا.<ref name="Olczak" /> عيب هذا النظام هو الحاجة إلى خطوة فرز إضافية لاختيار الحيوانات [[استنساخ (علم الأحياء الخلوي)|المستنسخة]] القابلة للحياة.<ref name="McCarroll" />
===== طلائعيات كهفية =====
-تسمح أنظمة تعبير [[ليشمانيا]] (لا يمكن أن تصيب الثدييات) بإنتاج مستقر ودائم للبروتينات بإنتاجية عالية، في وسائط محددة كيميائيًا. تُظهر البروتينات المُنتجة تعديلات ما بعد الترجمة حقيقية النواة بالكامل، بما في ذلك الارتباط [[غلكزة|بالجليكوزيل]] وتشكيل رابطة ثنائي كبريتيد.
+تسمح أنظمة تعبير [[ليشمانيا]] (لا يمكن أن تصيب الثدييات) بإنتاج مستقر ودائم للبروتينات بإنتاجية عالية، في وسائط محددة كيميائيًا. تُظهر البروتينات المُنتجة تعديلات ما بعد الترجمة حقيقية النواة بالكامل، بما في ذلك الارتباط [[غلكزة|بالجليكوزيل]] وتشكيل رابطة ثنائي كبريتيد.
===== أنظمة الثدييات =====
-* أنظمة التعبير الأكثر شيوعًا للثدييات هي خلايا مبيض الهامستر الصيني (CHO) وخلايا الكلى الجنينية البشرية (HEK).<ref name="Zhu 1158–1170">{{استشهاد بدورية محكمة
-| عدة مؤلفين = Zhu J
-| عنوان = Mammalian cell protein expression for biopharmaceutical production
-| صحيفة = Biotechnology Advances
-| المجلد = 30
-| العدد = 5
-| صفحات = 1158–70
-| تاريخ = 2012-09-01
+* أنظمة التعبير الأكثر شيوعًا للثدييات هي خلايا مبيض الهامستر الصيني (CHO) وخلايا الكلى الجنينية البشرية (HEK).<ref name="Zhu 1158–1170">{{cite journal
+| vauthors = Zhu J
+| title = Mammalian cell protein expression for biopharmaceutical production
+| journal = Biotechnology Advances
+| volume = 30
+| issue = 5
+| pages = 1158–70
+| date = 2012-09-01
| pmid = 21968146
| doi = 10.1016/j.biotechadv.2011.08.022
-}}</ref><ref name=":0">{{استشهاد بدورية محكمة
-| عدة مؤلفين = Almo SC, Love JD
-| عنوان = Better and faster: improvements and optimization for mammalian recombinant protein production
-| صحيفة = Current Opinion in Structural Biology
-| المجلد = 26
-| صفحات = 39–43
-| تاريخ = June 2014
+}}</ref><ref name=":0">{{cite journal
+| vauthors = Almo SC, Love JD
+| title = Better and faster: improvements and optimization for mammalian recombinant protein production
+| journal = Current Opinion in Structural Biology
+| volume = 26
+| pages = 39–43
+| date = June 2014
| pmid = 24721463
| pmc = 4766836
| doi = 10.1016/j.sbi.2014.03.006
-| سلسلة = New constructs and expression of proteins / Sequences and topology
-}}</ref><ref>{{استشهاد بدورية محكمة
-| عدة مؤلفين = Hacker DL, Balasubramanian S
-| عنوان = Recombinant protein production from stable mammalian cell lines and pools
-| صحيفة = Current Opinion in Structural Biology
-| المجلد = 38
-| صفحات = 129–36
-| تاريخ = June 2016
+| series = New constructs and expression of proteins / Sequences and topology
+}}</ref><ref>{{cite journal
+| vauthors = Hacker DL, Balasubramanian S
+| title = Recombinant protein production from stable mammalian cell lines and pools
+| journal = Current Opinion in Structural Biology
+| volume = 38
+| pages = 129–36
+| date = June 2016
| pmid = 27322762
| doi = 10.1016/j.sbi.2016.06.005
-| سلسلة = New constructs and expression of proteins • Sequences and topology
+| series = New constructs and expression of proteins • Sequences and topology
}}</ref>
* خلية مبيض الهامستر الصيني<ref name=":0" />
* الورم اللمفاوي النخاعي الفأر (على سبيل المثال خلية NS0)<ref name="Zhu 1158–1170" />
* إنسان كامل
-** خلايا الكلى الجنينية البشرية (HEK-293)<ref name=":0" />
-** خلايا الشبكية الجنينية البشرية (Cru cell's Per.C6)<ref name=":0" />
-** خلايا السلى البشرية (Glycotope و CEVEC)
+** خلايا الكلى الجنينية البشرية<ref name=":0" />
+** خلايا الشبكية الجنينية البشرية<ref name=":0" />
+** خلايا السلى البشرية
=== أنظمة خالية من الخلايا ===
-يتم إنتاج البروتينات الخالية من الخلايا في المختبر باستخدام بوليميراز الحمض النووي الريبي المنقى، والريبوسومات، و tRNA، والنيوكليوتيدات الريبية. يمكن إنتاج هذه الكواشف عن طريق الاستخراج من الخلايا أو من نظام التعبير القائم على الخلية. نظرًا لانخفاض مستويات التعبير والتكلفة العالية للأنظمة الخالية من الخلايا، تُستخدم الأنظمة القائمة على الخلايا على نطاق واسع.<ref>{{استشهاد بدورية محكمة
-| عدة مؤلفين = Rosenblum G, Cooperman BS
-| عنوان = Engine out of the chassis: cell-free protein synthesis and its uses
-| صحيفة = FEBS Letters
-| المجلد = 588
-| العدد = 2
-| صفحات = 261–8
-| تاريخ = January 2014
+يتم إنتاج البروتينات الخالية من الخلايا في المختبر باستخدام بوليميراز الحمض النووي الريبي المنقى، والريبوسومات، و<nowiki/>[[حمض نووي ريبوزي ناقل|الحمض النووي الريبوزي الناقل]]، والنيوكليوتيدات الريبية. يمكن إنتاج هذه الكواشف عن طريق الاستخراج من الخلايا أو من نظام التعبير القائم على الخلية. نظرًا لانخفاض مستويات التعبير والتكلفة العالية للأنظمة الخالية من الخلايا، تُستخدم الأنظمة القائمة على الخلايا على نطاق واسع.<ref>{{cite journal
+| vauthors = Rosenblum G, Cooperman BS
+| title = Engine out of the chassis: cell-free protein synthesis and its uses
+| journal = FEBS Letters
+| volume = 588
+| issue = 2
+| pages = 261–8
+| date = January 2014
| pmid = 24161673
| pmc = 4133780
@@ -404,5 +449,5 @@
}}</ref>
-== انظر أيضًا ==
+== أنظر أيضاً ==
* [[تعبير جيني]]
@@ -413,7 +458,7 @@
== مراجع ==
-{{مراجع}}
+<references />
{{شريط بوابات|علوم}}
[[تصنيف:تعبير جيني]]
[[تصنيف:تقانة حيوية]]
' |
حجم الصفحة الجديد (new_size) | 31461 |
حجم الصفحة القديم (old_size) | 32733 |
الحجم المتغير في التعديل (edit_delta) | -1272 |
السطور المضافة في التعديل (added_lines) | [
0 => ''''إنتاج البروتين''' هي تقانة حيوية لتوليد بروتين معين. يتم تحقيقه عادةً عن طريق التلاعب [[تعبير جيني|بالتعبير الجيني]] في كائن حي بحيث يعبر عن كميات كبيرة من [[حمض نووي معاد التركيب]]. يتضمن ذلك نسخ الحمض النووي معاد التركيب إلى [[حمض نووي ريبوزي رسول|الحمض النووي الريبوزي الرسول]] (mRNA)، وترجمة الحمض النووي الريبوزي الرسول إلى سلاسل [[ببتيد|متعددة الببتيد]]، والتي يتم طيها في النهاية إلى [[بروتين|بروتينات]] وظيفية ويمكن [[توجيه البروتين]] لمواقع محددة تحت خلوية أو خارج خلوية.<ref>{{cite journal',
1 => '| vauthors = Gräslund S, Nordlund P, Weigelt J, Hallberg BM, Bray J, Gileadi O, Knapp S, Oppermann U, Arrowsmith C, Hui R, Ming J, dhe-Paganon S, Park HW, Savchenko A, Yee A, Edwards A, Vincentelli R, Cambillau C, Kim R, Kim SH, Rao Z, Shi Y, Terwilliger TC, Kim CY, Hung LW, Waldo GS, Peleg Y, Albeck S, Unger T, Dym O, Prilusky J, Sussman JL, Stevens RC, Lesley SA, Wilson IA, Joachimiak A, Collart F, Dementieva I, Donnelly MI, Eschenfeldt WH, Kim Y, Stols L, Wu R, Zhou M, Burley SK, Emtage JS, Sauder JM, Thompson D, Bain K, Luz J, Gheyi T, Zhang F, Atwell S, Almo SC, Bonanno JB, Fiser A, Swaminathan S, Studier FW, Chance MR, Sali A, Acton TB, Xiao R, Zhao L, Ma LC, Hunt JF, Tong L, Cunningham K, Inouye M, Anderson S, Janjua H, Shastry R, Ho CK, Wang D, Wang H, Jiang M, Montelione GT, Stuart DI, Owens RJ, Daenke S, Schütz A, Heinemann U, Yokoyama S, Büssow K, Gunsalus KC',
2 => '| display-authors = 6',
3 => '| title = Protein production and purification',
4 => '| journal = Nature Methods',
5 => '| volume = 5',
6 => '| issue = 2',
7 => '| pages = 135–46',
8 => '| date = February 2008',
9 => 'تُستخدم أنظمة إنتاج البروتين (المعروفة أيضًا باسم أنظمة [[تعبير جيني|التعبير]]) في [[قائمة علوم الحياة|علوم الحياة]] و<nowiki/>[[تقانة حيوية|التكنولوجيا الحيوية]] و<nowiki/>[[طب|الطب]]. تستخدم أبحاث [[علم الأحياء الجزيئي|البيولوجيا الجزيئية]] العديد من [[بروتين|البروتينات]] و<nowiki/>[[إنزيم|الإنزيمات]]، وكثير منها من أنظمة التعبير؛ بشكل خاص [[بوليمراز الدنا|بوليميريز الحمض النووي الريبوزي منقوص الأكسجين]] [[تفاعل البوليمراز المتسلسل|لـتفاعل البوليمراز المتسلسل]]، [[منتسخة عكسية|النسخ العكسي]] لتحليل الحمض النووي الريبوزي، [[إنزيمات الاقتطاع]] للاستنساخ، ولصنع البروتينات التي يتم فحصها في [[اكتشاف الدواء|اكتشاف الأدوية]] [[مستهدف حيوي|كأهداف بيولوجية]] أو كأدوية محتملة بحد ذاتها. هناك أيضًا تطبيقات مهمة لأنظمة التعبير في [[تخمر صناعي|التخمر الصناعي]]، ولا سيما إنتاج [[مستحضرات دوائية حيوية|الأدوية الحيوية]] مثل [[إنسولين|الأنسولين]] البشري لعلاج [[السكري|مرض السكري]]، وتصنيع [[إنزيم|الإنزيمات]].',
10 => 'تشمل أنظمة إنتاج البروتين المستخدمة بشكل شائع تلك المشتقة من [[بكتيريا|البكتيريا]]،<ref name="pmid10508629">{{cite journal',
11 => '| vauthors = Baneyx F',
12 => '| title = Recombinant protein expression in Escherichia coli',
13 => '| journal = Current Opinion in Biotechnology',
14 => '| volume = 10',
15 => '| issue = 5',
16 => '| pages = 411–21',
17 => '| date = October 1999',
18 => '}}</ref> [[خميرة|الخميرة]]،<ref name="pmid11098467">{{cite journal',
19 => '| vauthors = Cregg JM, Cereghino JL, Shi J, Higgins DR',
20 => '| title = Recombinant protein expression in Pichia pastoris',
21 => '| journal = Molecular Biotechnology',
22 => '| volume = 16',
23 => '| issue = 1',
24 => '| pages = 23–52',
25 => '| date = September 2000',
26 => '}}</ref><ref name="pmid21943899">{{cite book',
27 => '| vauthors = Malys N, Wishart JA, Oliver SG, McCarthy JE',
28 => '| title = Methods in Systems Biology',
29 => '| chapter = Protein production in Saccharomyces cerevisiae for systems biology studies',
30 => '| journal = Methods in Enzymology',
31 => '| volume = 500',
32 => '| pages = 197–212',
33 => '| year = 2011',
34 => '}}</ref> [[فيروس عصوي|الفيروس البكتيري]]/[[حشرة|الحشرات]]،<ref name="pmid15877075">{{cite journal',
35 => '| vauthors = Kost TA, Condreay JP, Jarvis DL',
36 => '| title = Baculovirus as versatile vectors for protein expression in insect and mammalian cells',
37 => '| journal = Nature Biotechnology',
38 => '| volume = 23',
39 => '| issue = 5',
40 => '| pages = 567–75',
41 => '| date = May 2005',
42 => '}}</ref> خلايا [[ثدييات|الثدييات]]،<ref name="pmid15766864">{{cite journal',
43 => '| vauthors = Rosser MP, Xia W, Hartsell S, McCaman M, Zhu Y, Wang S, Harvey S, Bringmann P, Cobb RR',
44 => '| title = Transient transfection of CHO-K1-S using serum-free medium in suspension: a rapid mammalian protein expression system',
45 => '| journal = Protein Expression and Purification',
46 => '| volume = 40',
47 => '| issue = 2',
48 => '| pages = 237–43',
49 => '| date = April 2005',
50 => '}}</ref><ref name="pmid18541133">{{cite journal',
51 => '| vauthors = Lackner A, Genta K, Koppensteiner H, Herbacek I, Holzmann K, Spiegl-Kreinecker S, Berger W, Grusch M',
52 => '| title = A bicistronic baculovirus vector for transient and stable protein expression in mammalian cells',
53 => '| journal = Analytical Biochemistry',
54 => '| volume = 380',
55 => '| issue = 1',
56 => '| pages = 146–8',
57 => '| date = September 2008',
58 => '}}</ref> ومؤخرًا الفطريات الخيطية.<ref name="Visser 214–223">{{Cite journal',
59 => '| last1 = Visser',
60 => '| pages = 214–223',
61 => '| issue = 3',
62 => '| volume = 7',
63 => '| journal = Industrial Biotechnology',
64 => '| title = Development of a mature fungal technology and production platform for industrial enzymes based on a Myceliophthora thermophila isolate, previously known as Chrysosporium lucknowense C1',
65 => '| date = June 2011',
66 => '| display-authors = 6',
67 => '| first1 = Hans',
68 => '| first5 = Phil T.',
69 => '| last5 = Olson',
70 => '| first4 = Alexander V.',
71 => '| last4 = Gusakov',
72 => '| first3 = Peter J.',
73 => '| last3 = Punt',
74 => '| first2 = Vivi',
75 => '| last2 = Joosten',
76 => '}}</ref> عندما يتم إنتاج المستحضرات الصيدلانية الحيوية باستخدام أحد هذه الأنظمة، فإن الشوائب المرتبطة بالعملية المسماة [[بروتينات الخلية المضيف|بروتينات الخلية المضيفة]] تصل أيضًا إلى المنتج النهائي بكميات ضئيلة.<ref>{{Cite journal',
77 => '| last1 = Wang',
78 => '| volume = 103',
79 => '| pages = 446–458',
80 => '| issue = 3',
81 => '| language = en',
82 => '| first1 = Xing',
83 => '| journal = Biotechnology and Bioengineering',
84 => '| title = Host cell proteins in biologics development: Identification, quantitation and risk assessment',
85 => '| date = 2009-06-15',
86 => '| first3 = Ned M.',
87 => '| last3 = Mozier',
88 => '| first2 = Alan K.',
89 => '| last2 = Hunter',
90 => 'تعتمد أنظمة التعبير الأقدم والأكثر استخدامًا على الخلايا ويمكن تعريفها على أنها "مزيج من [[ناقل العبارة]]، وحمضه النووي المستنسخ، والمضيف للناقل الذي يوفر سياقًا للسماح بوظيفة الجين الأجنبي في خلية مضيفة، والذي هو إنتاج بروتينات على مستوى عالٍ".<ref name="urlDefinition: expression system from Online Medical Dictionary">{{cite web',
91 => '| url = http://cancerweb.ncl.ac.uk/cgi-bin/omd?expression+system',
92 => '| title = Definition: expression system',
93 => '| date = 1997-11-13',
94 => '| work = Online Medical Dictionary',
95 => '| publisher = Centre for Cancer Education, University of Newcastle upon Tyne: Cancerweb',
96 => '| access-date = 2008-06-10',
97 => '}}</ref><ref name="urlExpression system">{{cite web',
98 => '| url = http://www.biology-online.org/dictionary/Expression_system',
99 => '| title = Expression system - definition',
100 => '| date = 2005-10-03',
101 => '| work = Biology Online',
102 => '| publisher = Biology-Online.org',
103 => '| access-date = 2008-06-10',
104 => '}}</ref> الإفراط في التعبير هو مستوى مرتفع بشكل غير طبيعي ومفرط من [[تعبير جيني|التعبير الجيني]] الذي ينتج عنه [[نمط ظاهري]] مرتبط بالجين.<ref name="Overexpression - Oxford">{{cite web',
105 => '| url = https://en.oxforddictionaries.com/definition/overexpression',
106 => '| title = overexpression',
107 => '| date = 2017',
108 => '| website = Oxford Living Dictionary',
109 => '| publisher = Oxford University Press',
110 => '| access-date = 18 May 2017',
111 => '| quote = The production of abnormally large amounts of a substance which is coded for by a particular gene or group of genes; the appearance in the phenotype to an abnormally high degree of a character or effect attributed to a particular gene.',
112 => '}}</ref><ref>{{cite journal',
113 => '| last1 = Jeong',
114 => '| title = Genome sequences of Escherichia coli B strains REL606 and BL21(DE3).',
115 => '| journal = Journal of Molecular Biology',
116 => '| date = 11 December 2009',
117 => '| volume = 394',
118 => '| issue = 4',
119 => '| pages = 644–52',
120 => '| first1 = H',
121 => '| last2 = Barbe',
122 => '| first2 = V',
123 => '| last3 = Lee',
124 => '| first3 = CH',
125 => '| last4 = Vallenet',
126 => '| first4 = D',
127 => '| last5 = Yu',
128 => '| first5 = DS',
129 => 'هناك العديد من الطرق لإدخال [[حمض نووي ريبوزي منقوص الأكسجين|الحمض النووي الريبوزي منقوص الأكسجين]] غريب إلى خلية للتعبير، ويمكن استخدام العديد من الخلايا المضيفة المختلفة للتعبير- لكل نظام تعبير مزايا ومسؤوليات مميزة. عادةً ما يُشار إلى أنظمة التعبير من قبل المضيف ومصدر الحمض النووي أو آلية توصيل المادة الجينية. على سبيل المثال، [[عائل (أحياء)|العوائل]] الشائعة هي [[بكتيريا|البكتيريا]] (مثل [[إشريكية قولونية|البكتيريا الإشريكية القولونية]]، و<nowiki/>[[عصوية رقيقة|العصوية الرقيقة]])، و<nowiki/>[[خميرة|الخميرة]] (مثل السكيراء الجعوية أو فطريات الخميرة <ref name="pmid21943899" />) أو [[حقيقيات النوى|سلالات الخلايا حقيقية النواة]]. مصادر الحمض النووي وآليات التوصيل الشائعة هي [[فيروس|الفيروسات]] (مثل [[فيروس عصوي|الفيروس العصوي]] و<nowiki/>[[فيروس راجع|الفيروسات القهقرية]] و<nowiki/>[[فيروسات غدانية|الفيروسات الغدية]]) و<nowiki/>[[بلازميد|البلازميدات]] و<nowiki/>[[كروموسوم اصطناعي للخميرة|الكروموسومات الاصطناعية]] و<nowiki/>[[عاثية|العاثية]] (مثل لامدا). يعتمد أفضل نظام تعبير على الجين المعني، على سبيل المثال، غالبًا ما يُفضل [[سكيراء جعوية|السكيراء الجعوية]] للبروتينات التي تتطلب [[تعديل ما بعد الترجمة|تعديلًا كبيرًا بعد الترجمة]]. تُستخدم خطوط [[حشرة|الخلايا الحشرية]] أو [[ثدييات|الثديية]] عند الحاجة إلى ربط مرنا يشبه الإنسان. ومع ذلك، فإن التعبير البكتيري يتميز بسهولة إنتاج كميات كبيرة من البروتين ، وهو أمر ضروري [[دراسة البلورات بالأشعة السينية|لتصوير البلورات بالأشعة السينية]] أو تجارب [[رنين مغناطيسي نووي|الرنين المغناطيسي النووي]] لتحديد الهيكل.',
130 => 'لمعالجة هذه المخاوف، تم تطوير أنظمة التعبيرات باستخدام العديد من الخلايا حقيقية النواة للتطبيقات التي تتطلب تطابق البروتينات كما هو الحال في الكائنات حقيقية النواة أو أقرب إليها: يتم نقل خلايا النباتات (مثل التبغ) أو الحشرات أو الثدييات (مثل الأبقار) مع الجينات ومزروعة في المعلق وحتى الأنسجة أو الكائنات الحية الكاملة، لإنتاج البروتينات مطوية بالكامل. ومع ذلك، فإن أنظمة التعبير عن الثدييات [[في الجسم الحي]] لها عائد منخفض وقيود أخرى (تستغرق وقتًا طويلاً، وسمية للخلايا المضيفة، …). للجمع بين الغلة/الإنتاجية العالية وميزات البروتين القابلة للتطوير للبكتيريا والخميرة، والميزات اللاجينية المتقدمة للنباتات والحشرات وأنظمة الثدييات، تم تطوير أنظمة إنتاج البروتين الأخرى باستخدام حقيقيات النوى أحادية الخلية (أي خلايا "[[ليشمانيا]]" غير المسببة للأمراض).',
131 => 'على سبيل المثال، يمكن [[استنساخ]] تسلسل الحمض النووي الريبوزي منقوص الأكسجين لبروتين ذي أهمية أو [[استنساخ فرعي|استنساخه جزئيًا]] في بلازميد ذي رقم نسخ مرتفع يحتوي على محفز lac (غالبًا LacUV5)، والذي يتم [[تحول (وراثة)|تحويله]] بعد ذلك إلى بكتيريا E. coli. تعمل إضافة تناظرية اللاكتوز على تنشيط محفز اللاكتوز (lac) ويسبب البكتيريا للتعبير عن البروتين الفائدة.',
132 => 'سلالة الإشريكية القولونية BL21 وBL21 (DE3) سلالتان تستخدمان بشكل شائع لإنتاج البروتين. كأعضاء في سلالة B، فإنهم يفتقرون إلى البروتياز lon وOmpT، مما يحمي البروتينات المنتجة من التدهور. يوفر [[طليعة العاثية]] الموجود في BL21 (DE3) بوليميريز [[تي 7 بوليميراز الحمض النووي الرايبوزي]] (مدفوعًا بمحفز LacUV5)، مما يسمح باستخدام نواقل مع محفز T7 بدلاً من ذلك.<ref>{{cite journal',
133 => '| last1 = Jeong',
134 => '| last18 = Daegelen',
135 => '| last14 = Kim',
136 => '| first14 = SC',
137 => '| last15 = Oh',
138 => '| first15 = TK',
139 => '| last16 = Lenski',
140 => '| first16 = RE',
141 => '| last17 = Studier',
142 => '| first17 = FW',
143 => '| first18 = P',
144 => '| last13 = Ségurens',
145 => '| last19 = Kim',
146 => '| first19 = JF',
147 => '| title = Genome sequences of Escherichia coli B strains REL606 and BL21(DE3).',
148 => '| journal = Journal of Molecular Biology',
149 => '| date = 11 December 2009',
150 => '| volume = 394',
151 => '| issue = 4',
152 => '| pages = 644–52',
153 => '| doi = 10.1016/j.jmb.2009.09.052',
154 => '| first13 = B',
155 => '| first12 = HS',
156 => '| first1 = H',
157 => '| first6 = SH',
158 => '| last2 = Barbe',
159 => '| first2 = V',
160 => '| last3 = Lee',
161 => '| first3 = CH',
162 => '| last4 = Vallenet',
163 => '| first4 = D',
164 => '| last5 = Yu',
165 => '| first5 = DS',
166 => '| last6 = Choi',
167 => '| last7 = Couloux',
168 => '| last12 = Park',
169 => '| first7 = A',
170 => '| last8 = Lee',
171 => '| first8 = SW',
172 => '| last9 = Yoon',
173 => '| first9 = SH',
174 => '| last10 = Cattolico',
175 => '| first10 = L',
176 => '| last11 = Hur',
177 => '| first11 = CG',
178 => '| pmid = 19786035',
179 => '}}</ref>',
180 => 'تستخدم الأنواع غير المسببة للأمراض من [[وتدية|الوتديات]] موجبة الجرام للإنتاج التجاري للأحماض الأمينية المختلفة. تُستخدم أنواع الوتدية الجلوتاميك على نطاق واسع لإنتاج [[حمض الجلوتاميك|الغلوتامات]] و<nowiki/>[[لايسين|الليسين]]،<ref>{{cite journal',
181 => '| vauthors = Brinkrolf K, Schröder J, Pühler A, Tauch A',
182 => '| title = The transcriptional regulatory repertoire of Corynebacterium glutamicum: reconstruction of the network controlling pathways involved in lysine and glutamate production',
183 => '| journal = Journal of Biotechnology',
184 => '| volume = 149',
185 => '| issue = 3',
186 => '| pages = 173–82',
187 => '| date = September 2010',
188 => 'تم التعبير عن عامل نمو البشرة البشري النشط وظيفيًا في الوتدية الجلوتاميك،<ref>{{cite journal',
189 => '| vauthors = Date M, Itaya H, Matsui H, Kikuchi Y',
190 => '| title = Secretion of human epidermal growth factor by Corynebacterium glutamicum',
191 => '| journal = Letters in Applied Microbiology',
192 => '| volume = 42',
193 => '| issue = 1',
194 => '| pages = 66–70',
195 => '| date = January 2006',
196 => '}}</ref> مما يدل على إمكانية الإنتاج على نطاق صناعي للبروتينات البشرية. يمكن استهداف البروتينات المعبر عنها [[إفراز|للإفراز]] إما من خلال المسار الإفرازي العام (Sec) أو مسار الانتقال التوأم أرجينين (Tat).<ref>{{cite journal',
197 => '| vauthors = Meissner D, Vollstedt A, van Dijl JM, Freudl R',
198 => '| title = Comparative analysis of twin-arginine (Tat)-dependent protein secretion of a heterologous model protein (GFP) in three different Gram-positive bacteria',
199 => '| journal = Applied Microbiology and Biotechnology',
200 => '| volume = 76',
201 => '| issue = 3',
202 => '| pages = 633–42',
203 => '| date = September 2007',
204 => 'تُستخدم البكتيريا غير الممرضة وسالبة الجرام، [[زائفة متألقة]]، لإنتاج البروتينات المؤتلفة عالية المستوى؛ عادة لتطوير المداواة الحيوية واللقاحات. الزائفة المتألقة هي كائن حي متعدد الاستخدامات من الناحية الأيضية، مما يسمح بفحص الإنتاجية العالية والتطور السريع للبروتينات المعقدة. تشتهر الزائفة المتألقة بقدرتها على إنتاج عيارات عالية من البروتين النشط والقابل للذوبان بشكل سريع وناجح.<ref>{{cite journal',
205 => '| vauthors = Retallack DM, Jin H, Chew L',
206 => '| title = Reliable protein production in a Pseudomonas fluorescens expression system',
207 => '| journal = Protein Expression and Purification',
208 => '| volume = 81',
209 => '| issue = 2',
210 => '| pages = 157–65',
211 => '| date = February 2012',
212 => 'تم تطوير الفطريات الخيطية، خاصة [[رشاشية|الرشاشيات]] والتريكوديرما، ولكن مؤخرًا تم تطوير Myceliophthora thermophila C1<ref name="Visser 214–223" /> إلى منصات تعبير لفحص وإنتاج [[إنزيمات صناعية|الإنزيمات الصناعية]] المتنوعة. يُظهر نظام التعبير C1 مورفولوجيا منخفضة اللزوجة في الثقافة المغمورة، مما يتيح استخدام وسائط النمو والإنتاج المعقدة.',
213 => 'تسمح الخلايا الحشرية المصابة [[فيروس عصوي|بفيروس باكولوفيروس]]<ref name="ReferenceA">{{cite journal',
214 => '| vauthors = Altmann F, Staudacher E, Wilson IB, März L',
215 => '| title = Insect cells as hosts for the expression of recombinant glycoproteins',
216 => '| journal = Glycoconjugate Journal',
217 => '| volume = 16',
218 => '| issue = 2',
219 => '| pages = 109–23',
220 => '| date = February 1999',
221 => '}}</ref> (Sf9 ، Sf21 ، خمسة سلالات عالية) أو خلايا الثدييات<ref>{{cite journal',
222 => '| vauthors = Kost TA, Condreay JP',
223 => '| title = Recombinant baculoviruses as expression vectors for insect and mammalian cells',
224 => '| journal = Current Opinion in Biotechnology',
225 => '| volume = 10',
226 => '| issue = 5',
227 => '| pages = 428–33',
228 => '| date = October 1999',
229 => '}}</ref> ([[خلايا هيلا]]، و خلايا HEK 293) بإنتاج بروتينات غشائية أو غليكوزيلات لا يمكن إنتاجها باستخدام أنظمة فطرية أو بكتيرية.<ref name="ReferenceA" /> يفيد في إنتاج البروتينات بكميات عالية. لا يتم التعبير عن الجينات بشكل مستمر لأن الخلايا المضيفة المصابة تتلاشى في النهاية وتموت خلال كل دورة عدوى.<ref>{{cite journal',
230 => '| vauthors = Yin J, Li G, Ren X, Herrler G',
231 => '| title = Select what you need: a comparative evaluation of the advantages and limitations of frequently used expression systems for foreign genes',
232 => '| journal = Journal of Biotechnology',
233 => '| volume = 127',
234 => '| issue = 3',
235 => '| pages = 335–47',
236 => '| date = January 2007',
237 => 'يُعد التعبير عن خلية الحشرات غير اللايتية بديلاً لنظام التعبير عن فيروس باكولوفيروس. في التعبير غير الليلي، يتم [[تعداء|نقل]] النواقل بشكل عابر أو ثابت إلى الحمض النووي الصبغي لخلايا الحشرات من أجل التعبير الجيني اللاحق.<ref name="Dyring">{{cite journal',
238 => '| last1 = Dyring',
239 => '| first1 = Charlotte',
240 => '| year = 2011',
241 => '| title = Optimising the drosophila S2 expression system for production of therapeutic vaccines',
242 => '| journal = BioProcessing Journal',
243 => '| volume = 10',
244 => '| issue = 2',
245 => '| pages = 28–35',
246 => '}}</ref><ref name="Olczak">{{cite journal',
247 => '| vauthors = Olczak M, Olczak T',
248 => '| title = Comparison of different signal peptides for protein secretion in nonlytic insect cell system',
249 => '| journal = Analytical Biochemistry',
250 => '| volume = 359',
251 => '| issue = 1',
252 => '| pages = 45–53',
253 => '| date = December 2006',
254 => '}}</ref> ويتبع ذلك اختيار وفحص الحيوانات المستنسخة المؤتلفة.<ref name="McCarroll">{{cite journal',
255 => '| vauthors = McCarroll L, King LA',
256 => '| title = Stable insect cell cultures for recombinant protein production',
257 => '| journal = Current Opinion in Biotechnology',
258 => '| volume = 8',
259 => '| issue = 5',
260 => '| pages = 590–4',
261 => '| date = October 1997',
262 => '}}</ref> تم استخدام النظام غير اللاحلالي لإعطاء إنتاجية أعلى للبروتين وتعبير أسرع عن الجينات المؤتلفة مقارنة بالتعبير الخلوي المصاب بالفيروس البكتيري.<ref name="Olczak" /> خطوط الخلايا المستخدمة لهذا النظام تشمل: Sf9 ، Sf21 من خلايا [[دودة الحشد الخريفية]]، Hi-5 من خلايا [[وبير الملفوف]]، وخلايا Schneider 2 وخلايا Schneider 3 من خلايا [[ذبابة فاكهة شائعة]].<ref name="Dyring" /><ref name="McCarroll" /> مع هذا النظام، لا تتلاشى الخلايا ويمكن استخدام العديد من طرق الزراعة.<ref name="Dyring" /> بالإضافة إلى ذلك، عمليات إنتاج البروتين قابلة للتكاثر.<ref name="Dyring" /><ref name="Olczak" /> يعطي هذا النظام منتجًا متجانسًا.<ref name="Olczak" /> عيب هذا النظام هو الحاجة إلى خطوة فرز إضافية لاختيار الحيوانات [[استنساخ (علم الأحياء الخلوي)|المستنسخة]] القابلة للحياة.<ref name="McCarroll" />',
263 => 'تسمح أنظمة تعبير [[ليشمانيا]] (لا يمكن أن تصيب الثدييات) بإنتاج مستقر ودائم للبروتينات بإنتاجية عالية، في وسائط محددة كيميائيًا. تُظهر البروتينات المُنتجة تعديلات ما بعد الترجمة حقيقية النواة بالكامل، بما في ذلك الارتباط [[غلكزة|بالجليكوزيل]] وتشكيل رابطة ثنائي كبريتيد. ',
264 => '* أنظمة التعبير الأكثر شيوعًا للثدييات هي خلايا مبيض الهامستر الصيني (CHO) وخلايا الكلى الجنينية البشرية (HEK).<ref name="Zhu 1158–1170">{{cite journal',
265 => '| vauthors = Zhu J',
266 => '| title = Mammalian cell protein expression for biopharmaceutical production',
267 => '| journal = Biotechnology Advances',
268 => '| volume = 30',
269 => '| issue = 5',
270 => '| pages = 1158–70',
271 => '| date = 2012-09-01',
272 => '}}</ref><ref name=":0">{{cite journal',
273 => '| vauthors = Almo SC, Love JD',
274 => '| title = Better and faster: improvements and optimization for mammalian recombinant protein production',
275 => '| journal = Current Opinion in Structural Biology',
276 => '| volume = 26',
277 => '| pages = 39–43',
278 => '| date = June 2014',
279 => '| series = New constructs and expression of proteins / Sequences and topology',
280 => '}}</ref><ref>{{cite journal',
281 => '| vauthors = Hacker DL, Balasubramanian S',
282 => '| title = Recombinant protein production from stable mammalian cell lines and pools',
283 => '| journal = Current Opinion in Structural Biology',
284 => '| volume = 38',
285 => '| pages = 129–36',
286 => '| date = June 2016',
287 => '| series = New constructs and expression of proteins • Sequences and topology',
288 => '** خلايا الكلى الجنينية البشرية<ref name=":0" />',
289 => '** خلايا الشبكية الجنينية البشرية<ref name=":0" />',
290 => '** خلايا السلى البشرية',
291 => 'يتم إنتاج البروتينات الخالية من الخلايا في المختبر باستخدام بوليميراز الحمض النووي الريبي المنقى، والريبوسومات، و<nowiki/>[[حمض نووي ريبوزي ناقل|الحمض النووي الريبوزي الناقل]]، والنيوكليوتيدات الريبية. يمكن إنتاج هذه الكواشف عن طريق الاستخراج من الخلايا أو من نظام التعبير القائم على الخلية. نظرًا لانخفاض مستويات التعبير والتكلفة العالية للأنظمة الخالية من الخلايا، تُستخدم الأنظمة القائمة على الخلايا على نطاق واسع.<ref>{{cite journal',
292 => '| vauthors = Rosenblum G, Cooperman BS',
293 => '| title = Engine out of the chassis: cell-free protein synthesis and its uses',
294 => '| journal = FEBS Letters',
295 => '| volume = 588',
296 => '| issue = 2',
297 => '| pages = 261–8',
298 => '| date = January 2014',
299 => '== أنظر أيضاً ==',
300 => '<references />'
] |
السطور المزالة في التعديل (removed_lines) | [
0 => '{{مقالة غير مراجعة|تاريخ = يناير 2022}}',
1 => '{{يتيمة|تاريخ=يناير 2022}}',
2 => ''''إنتاج البروتين''' هو تقانة حيوية لتوليد بروتين معين. يتم تحقيقه عادةً عن طريق التلاعب [[تعبير جيني|بالتعبير الجيني]] في كائن حي بحيث يعبر عن كميات كبيرة من [[حمض نووي معاد التركيب]]. يتضمن ذلك نسخ الحمض النووي معاد التركيب إلى [[حمض نووي ريبوزي رسول|الحمض النووي الريبوزي الرسول]] (mRNA) ، وترجمة الحمض النووي الريبوزي الرسول إلى سلاسل [[ببتيد|متعددة الببتيد]]، والتي يتم طيها في النهاية إلى [[بروتين|بروتينات]] وظيفية ويمكن [[توجيه البروتين]] لمواقع محددة تحت خلوية أو خارج خلوية.<ref>{{استشهاد بدورية محكمة',
3 => '| عدة مؤلفين = Gräslund S, Nordlund P, Weigelt J, Hallberg BM, Bray J, Gileadi O, Knapp S, Oppermann U, Arrowsmith C, Hui R, Ming J, dhe-Paganon S, Park HW, Savchenko A, Yee A, Edwards A, Vincentelli R, Cambillau C, Kim R, Kim SH, Rao Z, Shi Y, Terwilliger TC, Kim CY, Hung LW, Waldo GS, Peleg Y, Albeck S, Unger T, Dym O, Prilusky J, Sussman JL, Stevens RC, Lesley SA, Wilson IA, Joachimiak A, Collart F, Dementieva I, Donnelly MI, Eschenfeldt WH, Kim Y, Stols L, Wu R, Zhou M, Burley SK, Emtage JS, Sauder JM, Thompson D, Bain K, Luz J, Gheyi T, Zhang F, Atwell S, Almo SC, Bonanno JB, Fiser A, Swaminathan S, Studier FW, Chance MR, Sali A, Acton TB, Xiao R, Zhao L, Ma LC, Hunt JF, Tong L, Cunningham K, Inouye M, Anderson S, Janjua H, Shastry R, Ho CK, Wang D, Wang H, Jiang M, Montelione GT, Stuart DI, Owens RJ, Daenke S, Schütz A, Heinemann U, Yokoyama S, Büssow K, Gunsalus KC',
4 => '| إظهار المؤلفين = 6',
5 => '| عنوان = Protein production and purification',
6 => '| صحيفة = Nature Methods',
7 => '| المجلد = 5',
8 => '| العدد = 2',
9 => '| صفحات = 135–46',
10 => '| تاريخ = February 2008',
11 => 'تُستخدم أنظمة إنتاج البروتين (المعروفة أيضًا باسم أنظمة [[تعبير جيني|التعبير]]) في [[قائمة علوم الحياة|علوم الحياة]] و[[تقانة حيوية|التكنولوجيا الحيوية]] و[[طب|الطب]]. تستخدم أبحاث [[علم الأحياء الجزيئي|البيولوجيا الجزيئية]] العديد من [[بروتين|البروتينات]] و[[إنزيم|الإنزيمات]]، وكثير منها من أنظمة التعبير؛ بشكل خاص [[بوليمراز الدنا|بوليميريز DNA]] [[تفاعل البوليمراز المتسلسل|لـتفاعل البوليمراز المتسلسل]] (PCR)، [[منتسخة عكسية|النسخ العكسي]] لتحليل RNA، [[إنزيمات الاقتطاع]] للاستنساخ، ولصنع البروتينات التي يتم فحصها في [[اكتشاف الدواء|اكتشاف الأدوية]] [[مستهدف حيوي|كأهداف بيولوجية]] أو كأدوية محتملة بحد ذاتها. هناك أيضًا تطبيقات مهمة لأنظمة التعبير في [[تخمر صناعي|التخمر الصناعي]]، ولا سيما إنتاج [[مستحضرات دوائية حيوية|الأدوية الحيوية]] مثل [[إنسولين|الأنسولين]] البشري لعلاج [[السكري|مرض السكري]]، وتصنيع [[إنزيم|الإنزيمات]].',
12 => 'تشمل أنظمة إنتاج البروتين المستخدمة بشكل شائع تلك المشتقة من [[بكتيريا|البكتيريا]]،<ref name="pmid10508629">{{استشهاد بدورية محكمة',
13 => '| عدة مؤلفين = Baneyx F',
14 => '| عنوان = Recombinant protein expression in Escherichia coli',
15 => '| صحيفة = Current Opinion in Biotechnology',
16 => '| المجلد = 10',
17 => '| العدد = 5',
18 => '| صفحات = 411–21',
19 => '| تاريخ = October 1999',
20 => '}}</ref> [[خميرة|الخميرة]]،<ref name="pmid11098467">{{استشهاد بدورية محكمة',
21 => '| عدة مؤلفين = Cregg JM, Cereghino JL, Shi J, Higgins DR',
22 => '| عنوان = Recombinant protein expression in Pichia pastoris',
23 => '| صحيفة = Molecular Biotechnology',
24 => '| المجلد = 16',
25 => '| العدد = 1',
26 => '| صفحات = 23–52',
27 => '| تاريخ = September 2000',
28 => '}}</ref><ref name="pmid21943899">{{استشهاد بكتاب',
29 => '| عدة مؤلفين = Malys N, Wishart JA, Oliver SG, McCarthy JE',
30 => '| عنوان = Methods in Systems Biology',
31 => '| الفصل = Protein production in Saccharomyces cerevisiae for systems biology studies',
32 => '| صحيفة = Methods in Enzymology',
33 => '| المجلد = 500',
34 => '| صفحات = 197–212',
35 => '| سنة = 2011',
36 => '}}</ref> [[فيروس عصوي|الفيروس البكتيري]] / [[حشرة|الحشرات]]،<ref name="pmid15877075">{{استشهاد بدورية محكمة',
37 => '| عدة مؤلفين = Kost TA, Condreay JP, Jarvis DL',
38 => '| عنوان = Baculovirus as versatile vectors for protein expression in insect and mammalian cells',
39 => '| صحيفة = Nature Biotechnology',
40 => '| المجلد = 23',
41 => '| العدد = 5',
42 => '| صفحات = 567–75',
43 => '| تاريخ = May 2005',
44 => '}}</ref> خلايا [[ثدييات|الثدييات]]،<ref name="pmid15766864">{{استشهاد بدورية محكمة',
45 => '| عدة مؤلفين = Rosser MP, Xia W, Hartsell S, McCaman M, Zhu Y, Wang S, Harvey S, Bringmann P, Cobb RR',
46 => '| عنوان = Transient transfection of CHO-K1-S using serum-free medium in suspension: a rapid mammalian protein expression system',
47 => '| صحيفة = Protein Expression and Purification',
48 => '| المجلد = 40',
49 => '| العدد = 2',
50 => '| صفحات = 237–43',
51 => '| تاريخ = April 2005',
52 => '}}</ref><ref name="pmid18541133">{{استشهاد بدورية محكمة',
53 => '| عدة مؤلفين = Lackner A, Genta K, Koppensteiner H, Herbacek I, Holzmann K, Spiegl-Kreinecker S, Berger W, Grusch M',
54 => '| عنوان = A bicistronic baculovirus vector for transient and stable protein expression in mammalian cells',
55 => '| صحيفة = Analytical Biochemistry',
56 => '| المجلد = 380',
57 => '| العدد = 1',
58 => '| صفحات = 146–8',
59 => '| تاريخ = September 2008',
60 => '}}</ref> ومؤخرًا الفطريات الخيطية مثل Myceliophthora thermophila.<ref name="Visser 214–223">{{استشهاد بدورية محكمة',
61 => '| الأخير1 = Visser',
62 => '| صفحات = 214–223',
63 => '| العدد = 3',
64 => '| المجلد = 7',
65 => '| صحيفة = Industrial Biotechnology',
66 => '| عنوان = Development of a mature fungal technology and production platform for industrial enzymes based on a Myceliophthora thermophila isolate, previously known as Chrysosporium lucknowense C1',
67 => '| تاريخ = June 2011',
68 => '| إظهار المؤلفين = 6',
69 => '| الأول1 = Hans',
70 => '| الأول5 = Phil T.',
71 => '| الأخير5 = Olson',
72 => '| الأول4 = Alexander V.',
73 => '| الأخير4 = Gusakov',
74 => '| الأول3 = Peter J.',
75 => '| الأخير3 = Punt',
76 => '| الأول2 = Vivi',
77 => '| الأخير2 = Joosten',
78 => '}}</ref> عندما يتم إنتاج المستحضرات الصيدلانية الحيوية باستخدام أحد هذه الأنظمة ، فإن الشوائب المرتبطة بالعملية المسماة [[بروتينات الخلية المضيف|بروتينات الخلية المضيفة]] تصل أيضًا إلى المنتج النهائي بكميات ضئيلة.<ref>{{استشهاد بدورية محكمة',
79 => '| الأخير1 = Wang',
80 => '| المجلد = 103',
81 => '| صفحات = 446–458',
82 => '| العدد = 3',
83 => '| لغة = en',
84 => '| الأول1 = Xing',
85 => '| صحيفة = Biotechnology and Bioengineering',
86 => '| عنوان = Host cell proteins in biologics development: Identification, quantitation and risk assessment',
87 => '| تاريخ = 2009-06-15',
88 => '| الأول3 = Ned M.',
89 => '| الأخير3 = Mozier',
90 => '| الأول2 = Alan K.',
91 => '| الأخير2 = Hunter',
92 => 'تعتمد أنظمة التعبير الأقدم والأكثر استخدامًا على الخلايا ويمكن تعريفها على أنها "مزيج من [[ناقل العبارة]]، وحمضه النووي المستنسخ، والمضيف للناقل الذي يوفر سياقًا للسماح بوظيفة الجين الأجنبي في خلية مضيفة، والذي هو إنتاج بروتينات على مستوى عالٍ ".<ref name="urlDefinition: expression system from Online Medical Dictionary">{{استشهاد ويب',
93 => '| مسار = http://cancerweb.ncl.ac.uk/cgi-bin/omd?expression+system',
94 => '| عنوان = Definition: expression system',
95 => '| تاريخ = 1997-11-13',
96 => '| عمل = Online Medical Dictionary',
97 => '| ناشر = Centre for Cancer Education, University of Newcastle upon Tyne: Cancerweb',
98 => '| تاريخ الوصول = 2008-06-10',
99 => '| مسار أرشيف = https://web.archive.org/web/20081221225545/http://cancerweb.ncl.ac.uk/cgi-bin/omd?expression+system | تاريخ أرشيف = 21 ديسمبر 2008 }}</ref><ref name="urlExpression system">{{استشهاد ويب',
100 => '| مسار = http://www.biology-online.org/dictionary/Expression_system',
101 => '| عنوان = Expression system - definition',
102 => '| تاريخ = 2005-10-03',
103 => '| عمل = Biology Online',
104 => '| ناشر = Biology-Online.org',
105 => '| تاريخ الوصول = 2008-06-10',
106 => '| مسار الأرشيف = https://web.archive.org/web/20180625050654/https://www.biology-online.org/dictionary/Expression_system | تاريخ الأرشيف = 25 يونيو 2018 }}</ref>الإفراط في التعبير هو مستوى مرتفع بشكل غير طبيعي ومفرط من [[تعبير جيني|التعبير الجيني]] الذي ينتج عنه [[نمط ظاهري]] مرتبط بالجين.<ref name="Overexpression - Oxford">{{استشهاد ويب',
107 => '| مسار = https://en.oxforddictionaries.com/definition/overexpression',
108 => '| عنوان = overexpression',
109 => '| تاريخ = 2017',
110 => '| موقع = Oxford Living Dictionary',
111 => '| ناشر = Oxford University Press',
112 => '| تاريخ الوصول = 18 May 2017',
113 => '| اقتباس = The production of abnormally large amounts of a substance which is coded for by a particular gene or group of genes; the appearance in the phenotype to an abnormally high degree of a character or effect attributed to a particular gene.',
114 => '| مسار الأرشيف = https://web.archive.org/web/20181020095243/https://en.oxforddictionaries.com/definition/overexpression | تاريخ الأرشيف = 20 أكتوبر 2018 }}</ref><ref name="مولد تلقائيا1">{{استشهاد بدورية محكمة',
115 => '| الأخير1 = Jeong',
116 => '| عنوان = Genome sequences of Escherichia coli B strains REL606 and BL21(DE3).',
117 => '| صحيفة = Journal of Molecular Biology',
118 => '| تاريخ = 11 December 2009',
119 => '| المجلد = 394',
120 => '| العدد = 4',
121 => '| صفحات = 644–52',
122 => '| الأول1 = H',
123 => '| الأخير2 = Barbe',
124 => '| الأول2 = V',
125 => '| الأخير3 = Lee',
126 => '| الأول3 = CH',
127 => '| الأخير4 = Vallenet',
128 => '| الأول4 = D',
129 => '| الأخير5 = Yu',
130 => '| الأول5 = DS',
131 => 'هناك العديد من الطرق لإدخال [[حمض نووي ريبوزي منقوص الأكسجين|DNA]] غريب إلى خلية للتعبير، ويمكن استخدام العديد من الخلايا المضيفة المختلفة للتعبير- لكل نظام تعبير مزايا ومسؤوليات مميزة. عادةً ما يُشار إلى أنظمة التعبير من قبل المضيف ومصدر الحمض النووي أو آلية توصيل المادة الجينية. على سبيل المثال، [[عائل (أحياء)|العوائل]] الشائعة هي [[بكتيريا|البكتيريا]] (مثل [[إشريكية قولونية|البكتيريا الإشريكية القولونية]]، و[[عصوية رقيقة|العصوية الرقيقة]])، و[[خميرة|الخميرة]] (مثل S.cerevisiae <ref name="pmid21943899" />) أو [[حقيقيات النوى|سلالات الخلايا حقيقية النواة]]. مصادر الحمض النووي وآليات التوصيل الشائعة هي [[فيروس|الفيروسات]] (مثل [[فيروس عصوي|الفيروس العصوي]] و[[فيروس راجع|الفيروسات القهقرية]] و[[فيروسات غدانية|الفيروسات الغدية]]) و[[بلازميد|البلازميدات]] و[[كروموسوم اصطناعي للخميرة|الكروموسومات الاصطناعية]] و[[عاثية|العاثية]] (مثل لامدا). يعتمد أفضل نظام تعبير على الجين المعني، على سبيل المثال، غالبًا ما يُفضل [[سكيراء جعوية|السكيراء الجعوية]] للبروتينات التي تتطلب [[تعديل ما بعد الترجمة|تعديلًا كبيرًا بعد الترجمة]]. تُستخدم خطوط [[حشرة|الخلايا الحشرية]] أو [[ثدييات|الثديية]] عند الحاجة إلى ربط مرنا يشبه الإنسان. ومع ذلك، فإن التعبير البكتيري يتميز بسهولة إنتاج كميات كبيرة من البروتين ، وهو أمر ضروري [[دراسة البلورات بالأشعة السينية|لتصوير البلورات بالأشعة السينية]] أو تجارب [[رنين مغناطيسي نووي|الرنين المغناطيسي النووي]] لتحديد الهيكل.',
132 => 'لمعالجة هذه المخاوف، تم تطوير أنظمة التعبيرات باستخدام العديد من الخلايا حقيقية النواة للتطبيقات التي تتطلب تطابق البروتينات كما هو الحال في الكائنات حقيقية النواة أو أقرب إليها: يتم نقل خلايا النباتات (مثل التبغ) أو الحشرات أو الثدييات (مثل الأبقار) مع الجينات و مزروعة في المعلق وحتى الأنسجة أو الكائنات الحية الكاملة ، لإنتاج البروتينات مطوية بالكامل. ومع ذلك ، فإن أنظمة التعبير عن الثدييات [[في الجسم الحي]] لها عائد منخفض وقيود أخرى (تستغرق وقتًا طويلاً ، وسمية للخلايا المضيفة، ..). للجمع بين الغلة / الإنتاجية العالية وميزات البروتين القابلة للتطوير للبكتيريا والخميرة، والميزات اللاجينية المتقدمة للنباتات والحشرات وأنظمة الثدييات، تم تطوير أنظمة إنتاج البروتين الأخرى باستخدام حقيقيات النوى أحادية الخلية (أي خلايا "[[ليشمانيا]]" غير المسببة للأمراض).',
133 => 'على سبيل المثال، يمكن [[استنساخ]] تسلسل DNA لبروتين ذي أهمية أو [[استنساخ فرعي|استنساخه جزئيًا]] في بلازميد ذي رقم نسخ مرتفع يحتوي على محفز lac (غالبًا LacUV5)، والذي يتم [[تحول (وراثة)|تحويله]] بعد ذلك إلى بكتيريا E. coli. تعمل إضافة IPTG (تناظرية اللاكتوز) على تنشيط محفز اللاكتوز (lac) ويسبب البكتيريا للتعبير عن البروتين الفائدة.',
134 => 'سلالة الإشريكية القولونية BL21 و BL21 (DE3) سلالتان تستخدمان بشكل شائع لإنتاج البروتين. كأعضاء في سلالة B ، فإنهم يفتقرون إلى البروتياز lon و OmpT ، مما يحمي البروتينات المنتجة من التدهور. يوفر Prophage DE3 الموجود في BL21 (DE3) بوليميريز [[تي 7 بوليميراز الحمض النووي الرايبوزي|T7 RNA]] (مدفوعًا بمحفز LacUV5)، مما يسمح باستخدام نواقل مع محفز T7 بدلاً من ذلك.<ref name="مولد تلقائيا1" />',
135 => 'تستخدم الأنواع غير المسببة للأمراض من [[وتدية|الوتديات]] موجبة الجرام للإنتاج التجاري للأحماض الأمينية المختلفة. تُستخدم أنواع C. glutamicum على نطاق واسع لإنتاج [[حمض الجلوتاميك|الغلوتامات]] و[[لايسين|الليسين]]،<ref>{{استشهاد بدورية محكمة',
136 => '| عدة مؤلفين = Brinkrolf K, Schröder J, Pühler A, Tauch A',
137 => '| عنوان = The transcriptional regulatory repertoire of Corynebacterium glutamicum: reconstruction of the network controlling pathways involved in lysine and glutamate production',
138 => '| صحيفة = Journal of Biotechnology',
139 => '| المجلد = 149',
140 => '| العدد = 3',
141 => '| صفحات = 173–82',
142 => '| تاريخ = September 2010',
143 => 'تم التعبير عن عامل نمو البشرة البشري النشط وظيفيًا في C. glutamicum،<ref>{{استشهاد بدورية محكمة',
144 => '| عدة مؤلفين = Date M, Itaya H, Matsui H, Kikuchi Y',
145 => '| عنوان = Secretion of human epidermal growth factor by Corynebacterium glutamicum',
146 => '| صحيفة = Letters in Applied Microbiology',
147 => '| المجلد = 42',
148 => '| العدد = 1',
149 => '| صفحات = 66–70',
150 => '| تاريخ = January 2006',
151 => '}}</ref>مما يدل على إمكانية الإنتاج على نطاق صناعي للبروتينات البشرية. يمكن استهداف البروتينات المعبر عنها [[إفراز|للإفراز]] إما من خلال المسار الإفرازي العام (Sec) أو مسار الانتقال التوأم أرجينين (Tat).<ref>{{استشهاد بدورية محكمة',
152 => '| عدة مؤلفين = Meissner D, Vollstedt A, van Dijl JM, Freudl R',
153 => '| عنوان = Comparative analysis of twin-arginine (Tat)-dependent protein secretion of a heterologous model protein (GFP) in three different Gram-positive bacteria',
154 => '| صحيفة = Applied Microbiology and Biotechnology',
155 => '| المجلد = 76',
156 => '| العدد = 3',
157 => '| صفحات = 633–42',
158 => '| تاريخ = September 2007',
159 => 'تُستخدم البكتيريا غير الممرضة وسالبة الجرام، [[زائفة متألقة]]، لإنتاج البروتينات المؤتلفة عالية المستوى؛ عادة لتطوير المداواة الحيوية واللقاحات. P. fluorescens هو كائن حي متعدد الاستخدامات من الناحية الأيضية، مما يسمح بفحص الإنتاجية العالية والتطور السريع للبروتينات المعقدة. تشتهر P. fluorescens بقدرتها على إنتاج عيارات عالية من البروتين النشط والقابل للذوبان بشكل سريع وناجح.<ref>{{استشهاد بدورية محكمة',
160 => '| عدة مؤلفين = Retallack DM, Jin H, Chew L',
161 => '| عنوان = Reliable protein production in a Pseudomonas fluorescens expression system',
162 => '| صحيفة = Protein Expression and Purification',
163 => '| المجلد = 81',
164 => '| العدد = 2',
165 => '| صفحات = 157–65',
166 => '| تاريخ = February 2012',
167 => 'تم تطوير الفطريات الخيطية، خاصة [[رشاشية|الرشاشيات]] والتريكوديرما، ولكن مؤخرًا تم تطوير Myceliophthora thermophila C1<ref name="Visser 214–223" /> إلى منصات تعبير لفحص وإنتاج [[إنزيمات صناعية|الإنزيمات الصناعية]] المتنوعة. يُظهر نظام التعبير C1 مورفولوجيا منخفضة اللزوجة في الثقافة المغمورة ، مما يتيح استخدام وسائط النمو والإنتاج المعقدة.',
168 => 'تسمح الخلايا الحشرية المصابة [[فيروس عصوي|بفيروس باكولوفيروس]]<ref name="ReferenceA">{{استشهاد بدورية محكمة',
169 => '| عدة مؤلفين = Altmann F, Staudacher E, Wilson IB, März L',
170 => '| عنوان = Insect cells as hosts for the expression of recombinant glycoproteins',
171 => '| صحيفة = Glycoconjugate Journal',
172 => '| المجلد = 16',
173 => '| العدد = 2',
174 => '| صفحات = 109–23',
175 => '| تاريخ = February 1999',
176 => '}}</ref> (Sf9 ، Sf21 ، خمسة سلالات عالية) أو خلايا الثدييات<ref>{{استشهاد بدورية محكمة',
177 => '| عدة مؤلفين = Kost TA, Condreay JP',
178 => '| عنوان = Recombinant baculoviruses as expression vectors for insect and mammalian cells',
179 => '| صحيفة = Current Opinion in Biotechnology',
180 => '| المجلد = 10',
181 => '| العدد = 5',
182 => '| صفحات = 428–33',
183 => '| تاريخ = October 1999',
184 => '}}</ref> ([[خلايا هيلا]]، و خلايا HEK 293) بإنتاج بروتينات غشائية أو غليكوزيلات لا يمكن إنتاجها باستخدام أنظمة فطرية أو بكتيرية.<ref name="ReferenceA" /> يفيد في إنتاج البروتينات بكميات عالية. لا يتم التعبير عن الجينات بشكل مستمر لأن الخلايا المضيفة المصابة تتلاشى في النهاية وتموت خلال كل دورة عدوى.<ref>{{استشهاد بدورية محكمة',
185 => '| عدة مؤلفين = Yin J, Li G, Ren X, Herrler G',
186 => '| عنوان = Select what you need: a comparative evaluation of the advantages and limitations of frequently used expression systems for foreign genes',
187 => '| صحيفة = Journal of Biotechnology',
188 => '| المجلد = 127',
189 => '| العدد = 3',
190 => '| صفحات = 335–47',
191 => '| تاريخ = January 2007',
192 => 'يُعد التعبير عن خلية الحشرات غير اللايتية بديلاً لنظام التعبير عن فيروس باكولوفيروس. في التعبير غير الليلي، يتم [[تعداء|نقل]] النواقل بشكل عابر أو ثابت إلى الحمض النووي الصبغي لخلايا الحشرات من أجل التعبير الجيني اللاحق.<ref name="Dyring">{{استشهاد بدورية محكمة',
193 => '| الأخير1 = Dyring',
194 => '| الأول1 = Charlotte',
195 => '| سنة = 2011',
196 => '| عنوان = Optimising the drosophila S2 expression system for production of therapeutic vaccines',
197 => '| صحيفة = BioProcessing Journal',
198 => '| المجلد = 10',
199 => '| العدد = 2',
200 => '| صفحات = 28–35',
201 => '}}</ref><ref name="Olczak">{{استشهاد بدورية محكمة',
202 => '| عدة مؤلفين = Olczak M, Olczak T',
203 => '| عنوان = Comparison of different signal peptides for protein secretion in nonlytic insect cell system',
204 => '| صحيفة = Analytical Biochemistry',
205 => '| المجلد = 359',
206 => '| العدد = 1',
207 => '| صفحات = 45–53',
208 => '| تاريخ = December 2006',
209 => '}}</ref> ويتبع ذلك اختيار وفحص الحيوانات المستنسخة المؤتلفة.<ref name="McCarroll">{{استشهاد بدورية محكمة',
210 => '| عدة مؤلفين = McCarroll L, King LA',
211 => '| عنوان = Stable insect cell cultures for recombinant protein production',
212 => '| صحيفة = Current Opinion in Biotechnology',
213 => '| المجلد = 8',
214 => '| العدد = 5',
215 => '| صفحات = 590–4',
216 => '| تاريخ = October 1997',
217 => '}}</ref> تم استخدام النظام غير اللاحلالي لإعطاء إنتاجية أعلى للبروتين وتعبير أسرع عن الجينات المؤتلفة مقارنة بالتعبير الخلوي المصاب بالفيروس البكتيري.<ref name="Olczak" /> خطوط الخلايا المستخدمة لهذا النظام تشمل: Sf9 ، Sf21 من خلايا [[دودة الحشد الخريفية]]، Hi-5 من خلايا [[وبير الملفوف]]، وخلايا Schneider 2 وخلايا Schneider 3 من خلايا [[ذبابة فاكهة شائعة]].<ref name="Dyring" /><ref name="McCarroll" /> مع هذا النظام، لا تتلاشى الخلايا ويمكن استخدام العديد من طرق الزراعة.<ref name="Dyring" /> بالإضافة إلى ذلك، عمليات إنتاج البروتين قابلة للتكاثر.<ref name="Dyring" /><ref name="Olczak" /> يعطي هذا النظام منتجًا متجانسًا.<ref name="Olczak" /> عيب هذا النظام هو الحاجة إلى خطوة فرز إضافية لاختيار الحيوانات [[استنساخ (علم الأحياء الخلوي)|المستنسخة]] القابلة للحياة.<ref name="McCarroll" />',
218 => 'تسمح أنظمة تعبير [[ليشمانيا]] (لا يمكن أن تصيب الثدييات) بإنتاج مستقر ودائم للبروتينات بإنتاجية عالية، في وسائط محددة كيميائيًا. تُظهر البروتينات المُنتجة تعديلات ما بعد الترجمة حقيقية النواة بالكامل، بما في ذلك الارتباط [[غلكزة|بالجليكوزيل]] وتشكيل رابطة ثنائي كبريتيد.',
219 => '* أنظمة التعبير الأكثر شيوعًا للثدييات هي خلايا مبيض الهامستر الصيني (CHO) وخلايا الكلى الجنينية البشرية (HEK).<ref name="Zhu 1158–1170">{{استشهاد بدورية محكمة',
220 => '| عدة مؤلفين = Zhu J',
221 => '| عنوان = Mammalian cell protein expression for biopharmaceutical production',
222 => '| صحيفة = Biotechnology Advances',
223 => '| المجلد = 30',
224 => '| العدد = 5',
225 => '| صفحات = 1158–70',
226 => '| تاريخ = 2012-09-01',
227 => '}}</ref><ref name=":0">{{استشهاد بدورية محكمة',
228 => '| عدة مؤلفين = Almo SC, Love JD',
229 => '| عنوان = Better and faster: improvements and optimization for mammalian recombinant protein production',
230 => '| صحيفة = Current Opinion in Structural Biology',
231 => '| المجلد = 26',
232 => '| صفحات = 39–43',
233 => '| تاريخ = June 2014',
234 => '| سلسلة = New constructs and expression of proteins / Sequences and topology',
235 => '}}</ref><ref>{{استشهاد بدورية محكمة',
236 => '| عدة مؤلفين = Hacker DL, Balasubramanian S',
237 => '| عنوان = Recombinant protein production from stable mammalian cell lines and pools',
238 => '| صحيفة = Current Opinion in Structural Biology',
239 => '| المجلد = 38',
240 => '| صفحات = 129–36',
241 => '| تاريخ = June 2016',
242 => '| سلسلة = New constructs and expression of proteins • Sequences and topology',
243 => '** خلايا الكلى الجنينية البشرية (HEK-293)<ref name=":0" />',
244 => '** خلايا الشبكية الجنينية البشرية (Cru cell's Per.C6)<ref name=":0" />',
245 => '** خلايا السلى البشرية (Glycotope و CEVEC)',
246 => 'يتم إنتاج البروتينات الخالية من الخلايا في المختبر باستخدام بوليميراز الحمض النووي الريبي المنقى، والريبوسومات، و tRNA، والنيوكليوتيدات الريبية. يمكن إنتاج هذه الكواشف عن طريق الاستخراج من الخلايا أو من نظام التعبير القائم على الخلية. نظرًا لانخفاض مستويات التعبير والتكلفة العالية للأنظمة الخالية من الخلايا، تُستخدم الأنظمة القائمة على الخلايا على نطاق واسع.<ref>{{استشهاد بدورية محكمة',
247 => '| عدة مؤلفين = Rosenblum G, Cooperman BS',
248 => '| عنوان = Engine out of the chassis: cell-free protein synthesis and its uses',
249 => '| صحيفة = FEBS Letters',
250 => '| المجلد = 588',
251 => '| العدد = 2',
252 => '| صفحات = 261–8',
253 => '| تاريخ = January 2014',
254 => '== انظر أيضًا ==',
255 => '{{مراجع}}'
] |
كل الوصلات الخارجية المضافة في التعديل (added_links) | [] |
كل الوصلات الخارجية المزالة في التعديل (removed_links) | [
0 => 'https://web.archive.org/web/20081221225545/http://cancerweb.ncl.ac.uk/cgi-bin/omd?expression+system',
1 => 'https://web.archive.org/web/20180625050654/https://www.biology-online.org/dictionary/Expression_system',
2 => 'https://web.archive.org/web/20181020095243/https://en.oxforddictionaries.com/definition/overexpression'
] |
نص الصفحة الجديد، مجردا من أية تهيئة (new_text) | ' العقيدة المركزية التي تصور النسخ من كود الحمض النووي إلى كود الحمض النووي الريبي إلى البروتينات في الخطوة الثانية التي تغطي إنتاج البروتين.
إنتاج البروتين هي تقانة حيوية لتوليد بروتين معين. يتم تحقيقه عادةً عن طريق التلاعب بالتعبير الجيني في كائن حي بحيث يعبر عن كميات كبيرة من حمض نووي معاد التركيب. يتضمن ذلك نسخ الحمض النووي معاد التركيب إلى الحمض النووي الريبوزي الرسول (mRNA)، وترجمة الحمض النووي الريبوزي الرسول إلى سلاسل متعددة الببتيد، والتي يتم طيها في النهاية إلى بروتينات وظيفية ويمكن توجيه البروتين لمواقع محددة تحت خلوية أو خارج خلوية.[1]
تُستخدم أنظمة إنتاج البروتين (المعروفة أيضًا باسم أنظمة التعبير) في علوم الحياة والتكنولوجيا الحيوية والطب. تستخدم أبحاث البيولوجيا الجزيئية العديد من البروتينات والإنزيمات، وكثير منها من أنظمة التعبير؛ بشكل خاص بوليميريز الحمض النووي الريبوزي منقوص الأكسجين لـتفاعل البوليمراز المتسلسل، النسخ العكسي لتحليل الحمض النووي الريبوزي، إنزيمات الاقتطاع للاستنساخ، ولصنع البروتينات التي يتم فحصها في اكتشاف الأدوية كأهداف بيولوجية أو كأدوية محتملة بحد ذاتها. هناك أيضًا تطبيقات مهمة لأنظمة التعبير في التخمر الصناعي، ولا سيما إنتاج الأدوية الحيوية مثل الأنسولين البشري لعلاج مرض السكري، وتصنيع الإنزيمات.
محتويات
1 أنظمة إنتاج البروتين
1.1 الأنظمة المستندة إلى الخلية
1.1.1 الأنظمة البكتيرية
1.1.1.1 الإشريكية القولونية
1.1.1.2 الوتدية
1.1.1.3 زائفة متألقة
1.1.2 أنظمة حقيقية النواة
1.1.2.1 الخميرة
1.1.2.2 الفطريات الخيطية
1.1.2.3 الخلايا المصابة بفيروس باكولوفيروس
1.1.2.4 تعبير خلية حشرية غير ليتي
1.1.2.5 طلائعيات كهفية
1.1.2.6 أنظمة الثدييات
1.2 أنظمة خالية من الخلايا
2 أنظر أيضاً
3 مراجع
أنظمة إنتاج البروتين[عدل المصدر]
تشمل أنظمة إنتاج البروتين المستخدمة بشكل شائع تلك المشتقة من البكتيريا،[2] الخميرة،[3][4] الفيروس البكتيري/الحشرات،[5] خلايا الثدييات،[6][7] ومؤخرًا الفطريات الخيطية.[8] عندما يتم إنتاج المستحضرات الصيدلانية الحيوية باستخدام أحد هذه الأنظمة، فإن الشوائب المرتبطة بالعملية المسماة بروتينات الخلية المضيفة تصل أيضًا إلى المنتج النهائي بكميات ضئيلة.[9]
الأنظمة المستندة إلى الخلية[عدل المصدر]
تعتمد أنظمة التعبير الأقدم والأكثر استخدامًا على الخلايا ويمكن تعريفها على أنها "مزيج من ناقل العبارة، وحمضه النووي المستنسخ، والمضيف للناقل الذي يوفر سياقًا للسماح بوظيفة الجين الأجنبي في خلية مضيفة، والذي هو إنتاج بروتينات على مستوى عالٍ".[10][11] الإفراط في التعبير هو مستوى مرتفع بشكل غير طبيعي ومفرط من التعبير الجيني الذي ينتج عنه نمط ظاهري مرتبط بالجين.[12][13]
هناك العديد من الطرق لإدخال الحمض النووي الريبوزي منقوص الأكسجين غريب إلى خلية للتعبير، ويمكن استخدام العديد من الخلايا المضيفة المختلفة للتعبير- لكل نظام تعبير مزايا ومسؤوليات مميزة. عادةً ما يُشار إلى أنظمة التعبير من قبل المضيف ومصدر الحمض النووي أو آلية توصيل المادة الجينية. على سبيل المثال، العوائل الشائعة هي البكتيريا (مثل البكتيريا الإشريكية القولونية، والعصوية الرقيقة)، والخميرة (مثل السكيراء الجعوية أو فطريات الخميرة [4]) أو سلالات الخلايا حقيقية النواة. مصادر الحمض النووي وآليات التوصيل الشائعة هي الفيروسات (مثل الفيروس العصوي والفيروسات القهقرية والفيروسات الغدية) والبلازميدات والكروموسومات الاصطناعية والعاثية (مثل لامدا). يعتمد أفضل نظام تعبير على الجين المعني، على سبيل المثال، غالبًا ما يُفضل السكيراء الجعوية للبروتينات التي تتطلب تعديلًا كبيرًا بعد الترجمة. تُستخدم خطوط الخلايا الحشرية أو الثديية عند الحاجة إلى ربط مرنا يشبه الإنسان. ومع ذلك، فإن التعبير البكتيري يتميز بسهولة إنتاج كميات كبيرة من البروتين ، وهو أمر ضروري لتصوير البلورات بالأشعة السينية أو تجارب الرنين المغناطيسي النووي لتحديد الهيكل.
نظرًا لأن البكتيريا بدائيات النوى، فهي غير مجهزة بالآلية الأنزيمية الكاملة لتحقيق التعديلات المطلوبة بعد الترجمة أو الطي الجزيئي. ومن ثم، فإن البروتينات حقيقية النواة متعددة المجالات التي يتم التعبير عنها في البكتيريا غالبًا ما تكون غير وظيفية. أيضًا، تصبح العديد من البروتينات غير قابلة للذوبان كأجسام متضمنة يصعب استردادها دون عوامل تغيير طبيعة قاسية وما تلاه من إعادة تقوية البروتين المرهقة.
لمعالجة هذه المخاوف، تم تطوير أنظمة التعبيرات باستخدام العديد من الخلايا حقيقية النواة للتطبيقات التي تتطلب تطابق البروتينات كما هو الحال في الكائنات حقيقية النواة أو أقرب إليها: يتم نقل خلايا النباتات (مثل التبغ) أو الحشرات أو الثدييات (مثل الأبقار) مع الجينات ومزروعة في المعلق وحتى الأنسجة أو الكائنات الحية الكاملة، لإنتاج البروتينات مطوية بالكامل. ومع ذلك، فإن أنظمة التعبير عن الثدييات في الجسم الحي لها عائد منخفض وقيود أخرى (تستغرق وقتًا طويلاً، وسمية للخلايا المضيفة، …). للجمع بين الغلة/الإنتاجية العالية وميزات البروتين القابلة للتطوير للبكتيريا والخميرة، والميزات اللاجينية المتقدمة للنباتات والحشرات وأنظمة الثدييات، تم تطوير أنظمة إنتاج البروتين الأخرى باستخدام حقيقيات النوى أحادية الخلية (أي خلايا "ليشمانيا" غير المسببة للأمراض).
الأنظمة البكتيرية[عدل المصدر]
الإشريكية القولونية[عدل المصدر]
E. coli ، أحد أكثر العوائل شهرة للتعبير الجيني الاصطناعي
تعتبر الإشريكية القولونية (E. coli ) واحدة من أكثر مضيفات التعبير استخدامًا، وعادةً ما يتم إدخال الحمض النووي في ناقل التعبير البلازميدي. تم تطوير تقنيات الإفراط في التعبير في الإشريكية القولونية بشكل جيد وتعمل عن طريق زيادة عدد نسخ الجين أو زيادة قوة الارتباط لمنطقة المحفز، مما يساعد على النسخ.
على سبيل المثال، يمكن استنساخ تسلسل الحمض النووي الريبوزي منقوص الأكسجين لبروتين ذي أهمية أو استنساخه جزئيًا في بلازميد ذي رقم نسخ مرتفع يحتوي على محفز lac (غالبًا LacUV5)، والذي يتم تحويله بعد ذلك إلى بكتيريا E. coli. تعمل إضافة تناظرية اللاكتوز على تنشيط محفز اللاكتوز (lac) ويسبب البكتيريا للتعبير عن البروتين الفائدة.
سلالة الإشريكية القولونية BL21 وBL21 (DE3) سلالتان تستخدمان بشكل شائع لإنتاج البروتين. كأعضاء في سلالة B، فإنهم يفتقرون إلى البروتياز lon وOmpT، مما يحمي البروتينات المنتجة من التدهور. يوفر طليعة العاثية الموجود في BL21 (DE3) بوليميريز تي 7 بوليميراز الحمض النووي الرايبوزي (مدفوعًا بمحفز LacUV5)، مما يسمح باستخدام نواقل مع محفز T7 بدلاً من ذلك.[14]
الوتدية[عدل المصدر]
تستخدم الأنواع غير المسببة للأمراض من الوتديات موجبة الجرام للإنتاج التجاري للأحماض الأمينية المختلفة. تُستخدم أنواع الوتدية الجلوتاميك على نطاق واسع لإنتاج الغلوتامات والليسين،[15] ومكونات أغذية الإنسان وعلف الحيوانات والمنتجات الصيدلانية.
تم التعبير عن عامل نمو البشرة البشري النشط وظيفيًا في الوتدية الجلوتاميك،[16] مما يدل على إمكانية الإنتاج على نطاق صناعي للبروتينات البشرية. يمكن استهداف البروتينات المعبر عنها للإفراز إما من خلال المسار الإفرازي العام (Sec) أو مسار الانتقال التوأم أرجينين (Tat).[17]
على عكس البكتيريا سالبة الجرام، تفتقر الوتدية موجبة الجرام إلى عديدات السكاريد الدهنية التي تعمل كسموم داخلية مستضدية في البشر.
زائفة متألقة[عدل المصدر]
تُستخدم البكتيريا غير الممرضة وسالبة الجرام، زائفة متألقة، لإنتاج البروتينات المؤتلفة عالية المستوى؛ عادة لتطوير المداواة الحيوية واللقاحات. الزائفة المتألقة هي كائن حي متعدد الاستخدامات من الناحية الأيضية، مما يسمح بفحص الإنتاجية العالية والتطور السريع للبروتينات المعقدة. تشتهر الزائفة المتألقة بقدرتها على إنتاج عيارات عالية من البروتين النشط والقابل للذوبان بشكل سريع وناجح.[18]
أنظمة حقيقية النواة[عدل المصدر]
الخميرة[عدل المصدر]
تسمح أنظمة التعبير التي تستخدم إما سكيراء جعوية أو Pichia pastoris بإنتاج مستقر ودائم للبروتينات التي تتم معالجتها بشكل مشابه لخلايا الثدييات، بإنتاجية عالية، في وسائط محددة كيميائيًا من البروتينات.
الفطريات الخيطية[عدل المصدر]
تم تطوير الفطريات الخيطية، خاصة الرشاشيات والتريكوديرما، ولكن مؤخرًا تم تطوير Myceliophthora thermophila C1[8] إلى منصات تعبير لفحص وإنتاج الإنزيمات الصناعية المتنوعة. يُظهر نظام التعبير C1 مورفولوجيا منخفضة اللزوجة في الثقافة المغمورة، مما يتيح استخدام وسائط النمو والإنتاج المعقدة.
الخلايا المصابة بفيروس باكولوفيروس[عدل المصدر]
تسمح الخلايا الحشرية المصابة بفيروس باكولوفيروس[19] (Sf9 ، Sf21 ، خمسة سلالات عالية) أو خلايا الثدييات[20] (خلايا هيلا، و خلايا HEK 293) بإنتاج بروتينات غشائية أو غليكوزيلات لا يمكن إنتاجها باستخدام أنظمة فطرية أو بكتيرية.[19] يفيد في إنتاج البروتينات بكميات عالية. لا يتم التعبير عن الجينات بشكل مستمر لأن الخلايا المضيفة المصابة تتلاشى في النهاية وتموت خلال كل دورة عدوى.[21]
تعبير خلية حشرية غير ليتي[عدل المصدر]
يُعد التعبير عن خلية الحشرات غير اللايتية بديلاً لنظام التعبير عن فيروس باكولوفيروس. في التعبير غير الليلي، يتم نقل النواقل بشكل عابر أو ثابت إلى الحمض النووي الصبغي لخلايا الحشرات من أجل التعبير الجيني اللاحق.[22][23] ويتبع ذلك اختيار وفحص الحيوانات المستنسخة المؤتلفة.[24] تم استخدام النظام غير اللاحلالي لإعطاء إنتاجية أعلى للبروتين وتعبير أسرع عن الجينات المؤتلفة مقارنة بالتعبير الخلوي المصاب بالفيروس البكتيري.[23] خطوط الخلايا المستخدمة لهذا النظام تشمل: Sf9 ، Sf21 من خلايا دودة الحشد الخريفية، Hi-5 من خلايا وبير الملفوف، وخلايا Schneider 2 وخلايا Schneider 3 من خلايا ذبابة فاكهة شائعة.[22][24] مع هذا النظام، لا تتلاشى الخلايا ويمكن استخدام العديد من طرق الزراعة.[22] بالإضافة إلى ذلك، عمليات إنتاج البروتين قابلة للتكاثر.[22][23] يعطي هذا النظام منتجًا متجانسًا.[23] عيب هذا النظام هو الحاجة إلى خطوة فرز إضافية لاختيار الحيوانات المستنسخة القابلة للحياة.[24]
طلائعيات كهفية[عدل المصدر]
تسمح أنظمة تعبير ليشمانيا (لا يمكن أن تصيب الثدييات) بإنتاج مستقر ودائم للبروتينات بإنتاجية عالية، في وسائط محددة كيميائيًا. تُظهر البروتينات المُنتجة تعديلات ما بعد الترجمة حقيقية النواة بالكامل، بما في ذلك الارتباط بالجليكوزيل وتشكيل رابطة ثنائي كبريتيد.
أنظمة الثدييات[عدل المصدر]
أنظمة التعبير الأكثر شيوعًا للثدييات هي خلايا مبيض الهامستر الصيني (CHO) وخلايا الكلى الجنينية البشرية (HEK).[25][26][27]
خلية مبيض الهامستر الصيني[26]
الورم اللمفاوي النخاعي الفأر (على سبيل المثال خلية NS0)[25]
إنسان كامل
خلايا الكلى الجنينية البشرية[26]
خلايا الشبكية الجنينية البشرية[26]
خلايا السلى البشرية
أنظمة خالية من الخلايا[عدل المصدر]
يتم إنتاج البروتينات الخالية من الخلايا في المختبر باستخدام بوليميراز الحمض النووي الريبي المنقى، والريبوسومات، والحمض النووي الريبوزي الناقل، والنيوكليوتيدات الريبية. يمكن إنتاج هذه الكواشف عن طريق الاستخراج من الخلايا أو من نظام التعبير القائم على الخلية. نظرًا لانخفاض مستويات التعبير والتكلفة العالية للأنظمة الخالية من الخلايا، تُستخدم الأنظمة القائمة على الخلايا على نطاق واسع.[28]
أنظر أيضاً[عدل المصدر]
تعبير جيني
بروتين وحيد الخلية
تنقية البروتين
تخمر (كيمياء حيوية)
بروتينات الخلية المضيف
مراجع[عدل المصدر]
^ Gräslund S, Nordlund P, Weigelt J, Hallberg BM, Bray J, Gileadi O, et al. (February 2008). "Protein production and purification". Nature Methods. 5 (2): 135–46. doi:10.1038/nmeth.f.202. PMC 3178102. PMID 18235434. الوسيط |CitationClass= تم تجاهله (مساعدة).mw-parser-output cite.citation{font-style:inherit}.mw-parser-output .citation q{quotes:"\"""\"""'""'"}.mw-parser-output .id-lock-free a,.mw-parser-output .citation .cs1-lock-free a{background-image:url("//upload.wikimedia.org/wikipedia/commons/thumb/6/65/Lock-green.svg/9px-Lock-green.svg.png");background-image:linear-gradient(transparent,transparent),url("//upload.wikimedia.org/wikipedia/commons/6/65/Lock-green.svg");background-repeat:no-repeat;background-size:9px;background-position:right .1em center}.mw-parser-output .id-lock-limited a,.mw-parser-output .id-lock-registration a,.mw-parser-output .citation .cs1-lock-limited a,.mw-parser-output .citation .cs1-lock-registration a{background-image:url("//upload.wikimedia.org/wikipedia/commons/thumb/d/d6/Lock-gray-alt-2.svg/9px-Lock-gray-alt-2.svg.png");background-image:linear-gradient(transparent,transparent),url("//upload.wikimedia.org/wikipedia/commons/d/d6/Lock-gray-alt-2.svg");background-repeat:no-repeat;background-size:9px;background-position:right .1em center}.mw-parser-output .id-lock-subscription a,.mw-parser-output .citation .cs1-lock-subscription a{background-image:url("//upload.wikimedia.org/wikipedia/commons/thumb/a/aa/Lock-red-alt-2.svg/9px-Lock-red-alt-2.svg.png");background-image:linear-gradient(transparent,transparent),url("//upload.wikimedia.org/wikipedia/commons/a/aa/Lock-red-alt-2.svg");background-repeat:no-repeat;background-size:9px;background-position:right .1em center}.mw-parser-output .cs1-subscription,.mw-parser-output .cs1-registration{color:#555}.mw-parser-output .cs1-subscription span,.mw-parser-output .cs1-registration span{border-bottom:1px dotted;cursor:help}.mw-parser-output .cs1-ws-icon a{background-image:url("//upload.wikimedia.org/wikipedia/commons/thumb/4/4c/Wikisource-logo.svg/12px-Wikisource-logo.svg.png");background-image:linear-gradient(transparent,transparent),url("//upload.wikimedia.org/wikipedia/commons/4/4c/Wikisource-logo.svg");background-repeat:no-repeat;background-size:12px;background-position:right .1em center}.mw-parser-output code.cs1-code{color:inherit;background:inherit;border:inherit;padding:inherit}.mw-parser-output .cs1-hidden-error{display:none;font-size:100%}.mw-parser-output .cs1-visible-error{font-size:100%}.mw-parser-output .cs1-maint{display:none;color:#33aa33;margin-left:0.3em}.mw-parser-output .cs1-subscription,.mw-parser-output .cs1-registration,.mw-parser-output .cs1-format{font-size:95%}.mw-parser-output .cs1-kern-left,.mw-parser-output .cs1-kern-wl-left{padding-left:0.2em}.mw-parser-output .cs1-kern-right,.mw-parser-output .cs1-kern-wl-right{padding-right:0.2em}.mw-parser-output .citation .mw-selflink{font-weight:inherit}
^ Baneyx F (October 1999). "Recombinant protein expression in Escherichia coli". Current Opinion in Biotechnology. 10 (5): 411–21. doi:10.1016/s0958-1669(99)00003-8. PMID 10508629. الوسيط |CitationClass= تم تجاهله (مساعدة)
^ Cregg JM, Cereghino JL, Shi J, Higgins DR (September 2000). "Recombinant protein expression in Pichia pastoris". Molecular Biotechnology. 16 (1): 23–52. doi:10.1385/MB:16:1:23. PMID 11098467. S2CID 35874864. الوسيط |CitationClass= تم تجاهله (مساعدة)
↑ أ ب Malys N, Wishart JA, Oliver SG, McCarthy JE (2011). "Protein production in Saccharomyces cerevisiae for systems biology studies". Methods in Systems Biology. Methods in Enzymology. 500. صفحات 197–212. doi:10.1016/B978-0-12-385118-5.00011-6. ISBN 9780123851185. PMID 21943899. الوسيط |CitationClass= تم تجاهله (مساعدة)
^ Kost TA, Condreay JP, Jarvis DL (May 2005). "Baculovirus as versatile vectors for protein expression in insect and mammalian cells". Nature Biotechnology. 23 (5): 567–75. doi:10.1038/nbt1095. PMC 3610534. PMID 15877075. الوسيط |CitationClass= تم تجاهله (مساعدة)
^ Rosser MP, Xia W, Hartsell S, McCaman M, Zhu Y, Wang S, Harvey S, Bringmann P, Cobb RR (April 2005). "Transient transfection of CHO-K1-S using serum-free medium in suspension: a rapid mammalian protein expression system". Protein Expression and Purification. 40 (2): 237–43. doi:10.1016/j.pep.2004.07.015. PMID 15766864. الوسيط |CitationClass= تم تجاهله (مساعدة)
^ Lackner A, Genta K, Koppensteiner H, Herbacek I, Holzmann K, Spiegl-Kreinecker S, Berger W, Grusch M (September 2008). "A bicistronic baculovirus vector for transient and stable protein expression in mammalian cells". Analytical Biochemistry. 380 (1): 146–8. doi:10.1016/j.ab.2008.05.020. PMID 18541133. الوسيط |CitationClass= تم تجاهله (مساعدة)
↑ أ ب Visser, Hans; Joosten, Vivi; Punt, Peter J.; Gusakov, Alexander V.; Olson, Phil T.; Joosten, Rob; et al. (June 2011). "Development of a mature fungal technology and production platform for industrial enzymes based on a Myceliophthora thermophila isolate, previously known as Chrysosporium lucknowense C1". Industrial Biotechnology. 7 (3): 214–223. doi:10.1089/ind.2011.7.214. الوسيط |CitationClass= تم تجاهله (مساعدة)
^ Wang, Xing; Hunter, Alan K.; Mozier, Ned M. (2009-06-15). "Host cell proteins in biologics development: Identification, quantitation and risk assessment". Biotechnology and Bioengineering (باللغة الإنجليزية). 103 (3): 446–458. doi:10.1002/bit.22304. ISSN 0006-3592. PMID 19388135. S2CID 22707536. الوسيط |CitationClass= تم تجاهله (مساعدة)
^ "Definition: expression system". Online Medical Dictionary. Centre for Cancer Education, University of Newcastle upon Tyne: Cancerweb. 1997-11-13. اطلع عليه بتاريخ 10 يونيو 2008. الوسيط |CitationClass= تم تجاهله (مساعدة)
^ "Expression system - definition". Biology Online. Biology-Online.org. 2005-10-03. اطلع عليه بتاريخ 10 يونيو 2008. الوسيط |CitationClass= تم تجاهله (مساعدة)
^ "overexpression". Oxford Living Dictionary. Oxford University Press. 2017. اطلع عليه بتاريخ 18 مايو 2017. The production of abnormally large amounts of a substance which is coded for by a particular gene or group of genes; the appearance in the phenotype to an abnormally high degree of a character or effect attributed to a particular gene. الوسيط |CitationClass= تم تجاهله (مساعدة)
^ Jeong, H; Barbe, V; Lee, CH; Vallenet, D; Yu, DS; Choi, SH; Couloux, A; Lee, SW; Yoon, SH; Cattolico, L; Hur, CG; Park, HS; Ségurens, B; Kim, SC; Oh, TK; Lenski, RE; Studier, FW; Daegelen, P; Kim, JF (11 December 2009). "Genome sequences of Escherichia coli B strains REL606 and BL21(DE3)". Journal of Molecular Biology. 394 (4): 644–52. doi:10.1016/j.jmb.2009.09.052. PMID 19786035. الوسيط |CitationClass= تم تجاهله (مساعدة)
^ Jeong, H; Barbe, V; Lee, CH; Vallenet, D; Yu, DS; Choi, SH; Couloux, A; Lee, SW; Yoon, SH; Cattolico, L; Hur, CG; Park, HS; Ségurens, B; Kim, SC; Oh, TK; Lenski, RE; Studier, FW; Daegelen, P; Kim, JF (11 December 2009). "Genome sequences of Escherichia coli B strains REL606 and BL21(DE3)". Journal of Molecular Biology. 394 (4): 644–52. doi:10.1016/j.jmb.2009.09.052. PMID 19786035. الوسيط |CitationClass= تم تجاهله (مساعدة)
^ Brinkrolf K, Schröder J, Pühler A, Tauch A (September 2010). "The transcriptional regulatory repertoire of Corynebacterium glutamicum: reconstruction of the network controlling pathways involved in lysine and glutamate production". Journal of Biotechnology. 149 (3): 173–82. doi:10.1016/j.jbiotec.2009.12.004. PMID 19963020. الوسيط |CitationClass= تم تجاهله (مساعدة)
^ Date M, Itaya H, Matsui H, Kikuchi Y (January 2006). "Secretion of human epidermal growth factor by Corynebacterium glutamicum". Letters in Applied Microbiology. 42 (1): 66–70. doi:10.1111/j.1472-765x.2005.01802.x. PMID 16411922. الوسيط |CitationClass= تم تجاهله (مساعدة)
^ Meissner D, Vollstedt A, van Dijl JM, Freudl R (September 2007). "Comparative analysis of twin-arginine (Tat)-dependent protein secretion of a heterologous model protein (GFP) in three different Gram-positive bacteria". Applied Microbiology and Biotechnology. 76 (3): 633–42. doi:10.1007/s00253-007-0934-8. PMID 17453196. S2CID 6238466. الوسيط |CitationClass= تم تجاهله (مساعدة)
^ Retallack DM, Jin H, Chew L (February 2012). "Reliable protein production in a Pseudomonas fluorescens expression system". Protein Expression and Purification. 81 (2): 157–65. doi:10.1016/j.pep.2011.09.010. PMID 21968453. الوسيط |CitationClass= تم تجاهله (مساعدة)
↑ أ ب Altmann F, Staudacher E, Wilson IB, März L (February 1999). "Insect cells as hosts for the expression of recombinant glycoproteins". Glycoconjugate Journal. 16 (2): 109–23. doi:10.1023/A:1026488408951. PMID 10612411. S2CID 34863069. الوسيط |CitationClass= تم تجاهله (مساعدة)
^ Kost TA, Condreay JP (October 1999). "Recombinant baculoviruses as expression vectors for insect and mammalian cells". Current Opinion in Biotechnology. 10 (5): 428–33. doi:10.1016/S0958-1669(99)00005-1. PMID 10508635. الوسيط |CitationClass= تم تجاهله (مساعدة)
^ Yin J, Li G, Ren X, Herrler G (January 2007). "Select what you need: a comparative evaluation of the advantages and limitations of frequently used expression systems for foreign genes". Journal of Biotechnology. 127 (3): 335–47. doi:10.1016/j.jbiotec.2006.07.012. PMID 16959350. الوسيط |CitationClass= تم تجاهله (مساعدة)
↑ أ ب ت ث Dyring, Charlotte (2011). "Optimising the drosophila S2 expression system for production of therapeutic vaccines". BioProcessing Journal. 10 (2): 28–35. doi:10.12665/j102.dyring. الوسيط |CitationClass= تم تجاهله (مساعدة)
↑ أ ب ت ث Olczak M, Olczak T (December 2006). "Comparison of different signal peptides for protein secretion in nonlytic insect cell system". Analytical Biochemistry. 359 (1): 45–53. doi:10.1016/j.ab.2006.09.003. PMID 17046707. الوسيط |CitationClass= تم تجاهله (مساعدة)
↑ أ ب ت McCarroll L, King LA (October 1997). "Stable insect cell cultures for recombinant protein production". Current Opinion in Biotechnology. 8 (5): 590–4. doi:10.1016/s0958-1669(97)80034-1. PMID 9353223. الوسيط |CitationClass= تم تجاهله (مساعدة)
↑ أ ب Zhu J (2012-09-01). "Mammalian cell protein expression for biopharmaceutical production". Biotechnology Advances. 30 (5): 1158–70. doi:10.1016/j.biotechadv.2011.08.022. PMID 21968146. الوسيط |CitationClass= تم تجاهله (مساعدة)
↑ أ ب ت ث Almo SC, Love JD (June 2014). "Better and faster: improvements and optimization for mammalian recombinant protein production". Current Opinion in Structural Biology. 26: 39–43. doi:10.1016/j.sbi.2014.03.006. PMC 4766836. PMID 24721463. الوسيط |CitationClass= تم تجاهله (مساعدة)
^ Hacker DL, Balasubramanian S (June 2016). "Recombinant protein production from stable mammalian cell lines and pools". Current Opinion in Structural Biology. 38: 129–36. doi:10.1016/j.sbi.2016.06.005. PMID 27322762. الوسيط |CitationClass= تم تجاهله (مساعدة)
^ Rosenblum G, Cooperman BS (January 2014). "Engine out of the chassis: cell-free protein synthesis and its uses". FEBS Letters. 588 (2): 261–8. doi:10.1016/j.febslet.2013.10.016. PMC 4133780. PMID 24161673. الوسيط |CitationClass= تم تجاهله (مساعدة)
بوابة علوم' |
كل الوصلات الخارجية في النص الجديد (all_links) | [
0 => '//www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC3178102',
1 => '//doi.org/10.1038%2Fnmeth.f.202',
2 => '//pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/18235434',
3 => '//doi.org/10.1016%2Fs0958-1669(99)00003-8',
4 => '//pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/10508629',
5 => '//doi.org/10.1385%2FMB:16:1:23',
6 => '//pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/11098467',
7 => 'https://api.semanticscholar.org/CorpusID:35874864',
8 => '//doi.org/10.1016%2FB978-0-12-385118-5.00011-6',
9 => '//pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/21943899',
10 => '//www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC3610534',
11 => '//doi.org/10.1038%2Fnbt1095',
12 => '//pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/15877075',
13 => '//doi.org/10.1016%2Fj.pep.2004.07.015',
14 => '//pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/15766864',
15 => '//doi.org/10.1016%2Fj.ab.2008.05.020',
16 => '//pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/18541133',
17 => '//doi.org/10.1089%2Find.2011.7.214',
18 => '//doi.org/10.1002%2Fbit.22304',
19 => '//www.worldcat.org/issn/0006-3592',
20 => '//pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/19388135',
21 => 'https://api.semanticscholar.org/CorpusID:22707536',
22 => 'http://cancerweb.ncl.ac.uk/cgi-bin/omd?expression+system',
23 => 'http://www.biology-online.org/dictionary/Expression_system',
24 => 'https://en.oxforddictionaries.com/definition/overexpression',
25 => '//doi.org/10.1016%2Fj.jmb.2009.09.052',
26 => '//pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/19786035',
27 => '//doi.org/10.1016%2Fj.jbiotec.2009.12.004',
28 => '//pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/19963020',
29 => '//doi.org/10.1111%2Fj.1472-765x.2005.01802.x',
30 => '//pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/16411922',
31 => '//doi.org/10.1007%2Fs00253-007-0934-8',
32 => '//pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/17453196',
33 => 'https://api.semanticscholar.org/CorpusID:6238466',
34 => '//doi.org/10.1016%2Fj.pep.2011.09.010',
35 => '//pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/21968453',
36 => '//doi.org/10.1023%2FA:1026488408951',
37 => '//pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/10612411',
38 => 'https://api.semanticscholar.org/CorpusID:34863069',
39 => '//doi.org/10.1016%2FS0958-1669(99)00005-1',
40 => '//pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/10508635',
41 => '//doi.org/10.1016%2Fj.jbiotec.2006.07.012',
42 => '//pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/16959350',
43 => '//doi.org/10.12665%2Fj102.dyring',
44 => '//doi.org/10.1016%2Fj.ab.2006.09.003',
45 => '//pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/17046707',
46 => '//doi.org/10.1016%2Fs0958-1669(97)80034-1',
47 => '//pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/9353223',
48 => '//doi.org/10.1016%2Fj.biotechadv.2011.08.022',
49 => '//pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/21968146',
50 => '//www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC4766836',
51 => '//doi.org/10.1016%2Fj.sbi.2014.03.006',
52 => '//pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/24721463',
53 => '//doi.org/10.1016%2Fj.sbi.2016.06.005',
54 => '//pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/27322762',
55 => '//www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC4133780',
56 => '//doi.org/10.1016%2Fj.febslet.2013.10.016',
57 => '//pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/24161673'
] |
الوصلات في الصفحة، قبل التعديل (old_links) | [
0 => '//doi.org/10.1002%2Fbit.22304',
1 => '//doi.org/10.1002%2Fbit.22304',
2 => '//doi.org/10.1007%2Fs00253-007-0934-8',
3 => '//doi.org/10.1007%2Fs00253-007-0934-8',
4 => '//doi.org/10.1016%2FB978-0-12-385118-5.00011-6',
5 => '//doi.org/10.1016%2FB978-0-12-385118-5.00011-6',
6 => '//doi.org/10.1016%2FS0958-1669(99)00005-1',
7 => '//doi.org/10.1016%2FS0958-1669(99)00005-1',
8 => '//doi.org/10.1016%2Fj.ab.2006.09.003',
9 => '//doi.org/10.1016%2Fj.ab.2006.09.003',
10 => '//doi.org/10.1016%2Fj.ab.2008.05.020',
11 => '//doi.org/10.1016%2Fj.ab.2008.05.020',
12 => '//doi.org/10.1016%2Fj.biotechadv.2011.08.022',
13 => '//doi.org/10.1016%2Fj.biotechadv.2011.08.022',
14 => '//doi.org/10.1016%2Fj.febslet.2013.10.016',
15 => '//doi.org/10.1016%2Fj.febslet.2013.10.016',
16 => '//doi.org/10.1016%2Fj.jbiotec.2006.07.012',
17 => '//doi.org/10.1016%2Fj.jbiotec.2006.07.012',
18 => '//doi.org/10.1016%2Fj.jbiotec.2009.12.004',
19 => '//doi.org/10.1016%2Fj.jbiotec.2009.12.004',
20 => '//doi.org/10.1016%2Fj.jmb.2009.09.052',
21 => '//doi.org/10.1016%2Fj.jmb.2009.09.052',
22 => '//doi.org/10.1016%2Fj.pep.2004.07.015',
23 => '//doi.org/10.1016%2Fj.pep.2004.07.015',
24 => '//doi.org/10.1016%2Fj.pep.2011.09.010',
25 => '//doi.org/10.1016%2Fj.pep.2011.09.010',
26 => '//doi.org/10.1016%2Fj.sbi.2014.03.006',
27 => '//doi.org/10.1016%2Fj.sbi.2014.03.006',
28 => '//doi.org/10.1016%2Fj.sbi.2016.06.005',
29 => '//doi.org/10.1016%2Fj.sbi.2016.06.005',
30 => '//doi.org/10.1016%2Fs0958-1669(97)80034-1',
31 => '//doi.org/10.1016%2Fs0958-1669(97)80034-1',
32 => '//doi.org/10.1016%2Fs0958-1669(99)00003-8',
33 => '//doi.org/10.1016%2Fs0958-1669(99)00003-8',
34 => '//doi.org/10.1023%2FA:1026488408951',
35 => '//doi.org/10.1023%2FA:1026488408951',
36 => '//doi.org/10.1038%2Fnbt1095',
37 => '//doi.org/10.1038%2Fnbt1095',
38 => '//doi.org/10.1038%2Fnmeth.f.202',
39 => '//doi.org/10.1038%2Fnmeth.f.202',
40 => '//doi.org/10.1089%2Find.2011.7.214',
41 => '//doi.org/10.1089%2Find.2011.7.214',
42 => '//doi.org/10.1111%2Fj.1472-765x.2005.01802.x',
43 => '//doi.org/10.1111%2Fj.1472-765x.2005.01802.x',
44 => '//doi.org/10.12665%2Fj102.dyring',
45 => '//doi.org/10.12665%2Fj102.dyring',
46 => '//doi.org/10.1385%2FMB:16:1:23',
47 => '//doi.org/10.1385%2FMB:16:1:23',
48 => '//pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/10508629',
49 => '//pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/10508629',
50 => '//pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/10508635',
51 => '//pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/10508635',
52 => '//pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/10612411',
53 => '//pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/10612411',
54 => '//pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/11098467',
55 => '//pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/11098467',
56 => '//pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/15766864',
57 => '//pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/15766864',
58 => '//pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/15877075',
59 => '//pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/15877075',
60 => '//pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/16411922',
61 => '//pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/16411922',
62 => '//pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/16959350',
63 => '//pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/16959350',
64 => '//pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/17046707',
65 => '//pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/17046707',
66 => '//pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/17453196',
67 => '//pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/17453196',
68 => '//pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/18235434',
69 => '//pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/18235434',
70 => '//pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/18541133',
71 => '//pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/18541133',
72 => '//pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/19388135',
73 => '//pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/19388135',
74 => '//pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/19786035',
75 => '//pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/19786035',
76 => '//pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/19963020',
77 => '//pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/19963020',
78 => '//pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/21943899',
79 => '//pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/21943899',
80 => '//pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/21968146',
81 => '//pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/21968146',
82 => '//pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/21968453',
83 => '//pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/21968453',
84 => '//pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/24161673',
85 => '//pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/24161673',
86 => '//pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/24721463',
87 => '//pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/24721463',
88 => '//pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/27322762',
89 => '//pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/27322762',
90 => '//pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/9353223',
91 => '//pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/9353223',
92 => '//www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC3178102',
93 => '//www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC3178102',
94 => '//www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC3610534',
95 => '//www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC3610534',
96 => '//www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC4766836',
97 => '//www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC4766836',
98 => '//www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC4133780',
99 => '//www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC4133780',
100 => '//www.worldcat.org/issn/0006-3592',
101 => '//www.worldcat.org/issn/0006-3592',
102 => 'http://cancerweb.ncl.ac.uk/cgi-bin/omd?expression+system',
103 => 'http://www.biology-online.org/dictionary/Expression_system',
104 => 'https://api.semanticscholar.org/CorpusID:35874864',
105 => 'https://api.semanticscholar.org/CorpusID:22707536',
106 => 'https://api.semanticscholar.org/CorpusID:6238466',
107 => 'https://api.semanticscholar.org/CorpusID:34863069',
108 => 'https://en.oxforddictionaries.com/definition/overexpression',
109 => 'https://web.archive.org/web/20081221225545/http://cancerweb.ncl.ac.uk/cgi-bin/omd?expression+system',
110 => 'https://web.archive.org/web/20180625050654/https://www.biology-online.org/dictionary/Expression_system',
111 => 'https://web.archive.org/web/20181020095243/https://en.oxforddictionaries.com/definition/overexpression'
] |
مصدر HTML المعروض للمراجعة الجديدة (new_html) | '<div class="mw-parser-output"><div class="thumb tleft"><div class="thumbinner" style="width:222px;"><a href="/wiki/%D9%85%D9%84%D9%81:Genetic_code.svg" class="image"><img alt="" src="//upload.wikimedia.org/wikipedia/commons/thumb/3/37/Genetic_code.svg/220px-Genetic_code.svg.png" decoding="async" width="220" height="83" class="thumbimage" srcset="//upload.wikimedia.org/wikipedia/commons/thumb/3/37/Genetic_code.svg/330px-Genetic_code.svg.png 1.5x, //upload.wikimedia.org/wikipedia/commons/thumb/3/37/Genetic_code.svg/440px-Genetic_code.svg.png 2x" data-file-width="580" data-file-height="220" /></a> <div class="thumbcaption"><div class="magnify"><a href="/wiki/%D9%85%D9%84%D9%81:Genetic_code.svg" class="internal" title="كبّر"></a></div>العقيدة المركزية التي تصور النسخ من كود الحمض النووي إلى كود الحمض النووي الريبي إلى البروتينات في الخطوة الثانية التي تغطي إنتاج البروتين.</div></div></div>
<p><b>إنتاج البروتين</b> هي تقانة حيوية لتوليد بروتين معين. يتم تحقيقه عادةً عن طريق التلاعب <a href="/wiki/%D8%AA%D8%B9%D8%A8%D9%8A%D8%B1_%D8%AC%D9%8A%D9%86%D9%8A" title="تعبير جيني">بالتعبير الجيني</a> في كائن حي بحيث يعبر عن كميات كبيرة من <a href="/wiki/%D8%AD%D9%85%D8%B6_%D9%86%D9%88%D9%88%D9%8A_%D9%85%D8%B9%D8%A7%D8%AF_%D8%A7%D9%84%D8%AA%D8%B1%D9%83%D9%8A%D8%A8" title="حمض نووي معاد التركيب">حمض نووي معاد التركيب</a>. يتضمن ذلك نسخ الحمض النووي معاد التركيب إلى <a href="/wiki/%D8%AD%D9%85%D8%B6_%D9%86%D9%88%D9%88%D9%8A_%D8%B1%D9%8A%D8%A8%D9%88%D8%B2%D9%8A_%D8%B1%D8%B3%D9%88%D9%84" title="حمض نووي ريبوزي رسول">الحمض النووي الريبوزي الرسول</a> (mRNA)، وترجمة الحمض النووي الريبوزي الرسول إلى سلاسل <a href="/wiki/%D8%A8%D8%A8%D8%AA%D9%8A%D8%AF" title="ببتيد">متعددة الببتيد</a>، والتي يتم طيها في النهاية إلى <a href="/wiki/%D8%A8%D8%B1%D9%88%D8%AA%D9%8A%D9%86" title="بروتين">بروتينات</a> وظيفية ويمكن <a href="/wiki/%D8%AA%D9%88%D8%AC%D9%8A%D9%87_%D8%A7%D9%84%D8%A8%D8%B1%D9%88%D8%AA%D9%8A%D9%86" title="توجيه البروتين">توجيه البروتين</a> لمواقع محددة تحت خلوية أو خارج خلوية.<sup id="cite_ref-1" class="reference"><a href="#cite_note-1">[1]</a></sup>
</p><p>تُستخدم أنظمة إنتاج البروتين (المعروفة أيضًا باسم أنظمة <a href="/wiki/%D8%AA%D8%B9%D8%A8%D9%8A%D8%B1_%D8%AC%D9%8A%D9%86%D9%8A" title="تعبير جيني">التعبير</a>) في <a href="/wiki/%D9%82%D8%A7%D8%A6%D9%85%D8%A9_%D8%B9%D9%84%D9%88%D9%85_%D8%A7%D9%84%D8%AD%D9%8A%D8%A7%D8%A9" title="قائمة علوم الحياة">علوم الحياة</a> و<a href="/wiki/%D8%AA%D9%82%D8%A7%D9%86%D8%A9_%D8%AD%D9%8A%D9%88%D9%8A%D8%A9" title="تقانة حيوية">التكنولوجيا الحيوية</a> و<a href="/wiki/%D8%B7%D8%A8" title="طب">الطب</a>. تستخدم أبحاث <a href="/wiki/%D8%B9%D9%84%D9%85_%D8%A7%D9%84%D8%A3%D8%AD%D9%8A%D8%A7%D8%A1_%D8%A7%D9%84%D8%AC%D8%B2%D9%8A%D8%A6%D9%8A" title="علم الأحياء الجزيئي">البيولوجيا الجزيئية</a> العديد من <a href="/wiki/%D8%A8%D8%B1%D9%88%D8%AA%D9%8A%D9%86" title="بروتين">البروتينات</a> و<a href="/wiki/%D8%A5%D9%86%D8%B2%D9%8A%D9%85" title="إنزيم">الإنزيمات</a>، وكثير منها من أنظمة التعبير؛ بشكل خاص <a href="/wiki/%D8%A8%D9%88%D9%84%D9%8A%D9%85%D8%B1%D8%A7%D8%B2_%D8%A7%D9%84%D8%AF%D9%86%D8%A7" title="بوليمراز الدنا">بوليميريز الحمض النووي الريبوزي منقوص الأكسجين</a> <a href="/wiki/%D8%AA%D9%81%D8%A7%D8%B9%D9%84_%D8%A7%D9%84%D8%A8%D9%88%D9%84%D9%8A%D9%85%D8%B1%D8%A7%D8%B2_%D8%A7%D9%84%D9%85%D8%AA%D8%B3%D9%84%D8%B3%D9%84" title="تفاعل البوليمراز المتسلسل">لـتفاعل البوليمراز المتسلسل</a>، <a href="/wiki/%D9%85%D9%86%D8%AA%D8%B3%D8%AE%D8%A9_%D8%B9%D9%83%D8%B3%D9%8A%D8%A9" title="منتسخة عكسية">النسخ العكسي</a> لتحليل الحمض النووي الريبوزي، <a href="/wiki/%D8%A5%D9%86%D8%B2%D9%8A%D9%85%D8%A7%D8%AA_%D8%A7%D9%84%D8%A7%D9%82%D8%AA%D8%B7%D8%A7%D8%B9" title="إنزيمات الاقتطاع">إنزيمات الاقتطاع</a> للاستنساخ، ولصنع البروتينات التي يتم فحصها في <a href="/wiki/%D8%A7%D9%83%D8%AA%D8%B4%D8%A7%D9%81_%D8%A7%D9%84%D8%AF%D9%88%D8%A7%D8%A1" title="اكتشاف الدواء">اكتشاف الأدوية</a> <a href="/wiki/%D9%85%D8%B3%D8%AA%D9%87%D8%AF%D9%81_%D8%AD%D9%8A%D9%88%D9%8A" title="مستهدف حيوي">كأهداف بيولوجية</a> أو كأدوية محتملة بحد ذاتها. هناك أيضًا تطبيقات مهمة لأنظمة التعبير في <a href="/wiki/%D8%AA%D8%AE%D9%85%D8%B1_%D8%B5%D9%86%D8%A7%D8%B9%D9%8A" title="تخمر صناعي">التخمر الصناعي</a>، ولا سيما إنتاج <a href="/wiki/%D9%85%D8%B3%D8%AA%D8%AD%D8%B6%D8%B1%D8%A7%D8%AA_%D8%AF%D9%88%D8%A7%D8%A6%D9%8A%D8%A9_%D8%AD%D9%8A%D9%88%D9%8A%D8%A9" title="مستحضرات دوائية حيوية">الأدوية الحيوية</a> مثل <a href="/wiki/%D8%A5%D9%86%D8%B3%D9%88%D9%84%D9%8A%D9%86" title="إنسولين">الأنسولين</a> البشري لعلاج <a href="/wiki/%D8%A7%D9%84%D8%B3%D9%83%D8%B1%D9%8A" title="السكري">مرض السكري</a>، وتصنيع <a href="/wiki/%D8%A5%D9%86%D8%B2%D9%8A%D9%85" title="إنزيم">الإنزيمات</a>.
</p>
<div id="toc" class="toc" role="navigation" aria-labelledby="mw-toc-heading"><input type="checkbox" role="button" id="toctogglecheckbox" class="toctogglecheckbox" style="display:none" /><div class="toctitle" lang="ar" dir="rtl"><h2 id="mw-toc-heading">محتويات</h2><span class="toctogglespan"><label class="toctogglelabel" for="toctogglecheckbox"></label></span></div>
<ul>
<li class="toclevel-1 tocsection-1"><a href="#أنظمة_إنتاج_البروتين"><span class="tocnumber">1</span> <span class="toctext">أنظمة إنتاج البروتين</span></a>
<ul>
<li class="toclevel-2 tocsection-2"><a href="#الأنظمة_المستندة_إلى_الخلية"><span class="tocnumber">1.1</span> <span class="toctext">الأنظمة المستندة إلى الخلية</span></a>
<ul>
<li class="toclevel-3 tocsection-3"><a href="#الأنظمة_البكتيرية"><span class="tocnumber">1.1.1</span> <span class="toctext">الأنظمة البكتيرية</span></a>
<ul>
<li class="toclevel-4 tocsection-4"><a href="#الإشريكية_القولونية"><span class="tocnumber">1.1.1.1</span> <span class="toctext">الإشريكية القولونية</span></a></li>
<li class="toclevel-4 tocsection-5"><a href="#الوتدية"><span class="tocnumber">1.1.1.2</span> <span class="toctext">الوتدية</span></a></li>
<li class="toclevel-4 tocsection-6"><a href="#زائفة_متألقة"><span class="tocnumber">1.1.1.3</span> <span class="toctext">زائفة متألقة</span></a></li>
</ul>
</li>
<li class="toclevel-3 tocsection-7"><a href="#أنظمة_حقيقية_النواة"><span class="tocnumber">1.1.2</span> <span class="toctext">أنظمة حقيقية النواة</span></a>
<ul>
<li class="toclevel-4 tocsection-8"><a href="#الخميرة"><span class="tocnumber">1.1.2.1</span> <span class="toctext">الخميرة</span></a></li>
<li class="toclevel-4 tocsection-9"><a href="#الفطريات_الخيطية"><span class="tocnumber">1.1.2.2</span> <span class="toctext">الفطريات الخيطية</span></a></li>
<li class="toclevel-4 tocsection-10"><a href="#الخلايا_المصابة_بفيروس_باكولوفيروس"><span class="tocnumber">1.1.2.3</span> <span class="toctext">الخلايا المصابة بفيروس باكولوفيروس</span></a></li>
<li class="toclevel-4 tocsection-11"><a href="#تعبير_خلية_حشرية_غير_ليتي"><span class="tocnumber">1.1.2.4</span> <span class="toctext">تعبير خلية حشرية غير ليتي</span></a></li>
<li class="toclevel-4 tocsection-12"><a href="#طلائعيات_كهفية"><span class="tocnumber">1.1.2.5</span> <span class="toctext">طلائعيات كهفية</span></a></li>
<li class="toclevel-4 tocsection-13"><a href="#أنظمة_الثدييات"><span class="tocnumber">1.1.2.6</span> <span class="toctext">أنظمة الثدييات</span></a></li>
</ul>
</li>
</ul>
</li>
<li class="toclevel-2 tocsection-14"><a href="#أنظمة_خالية_من_الخلايا"><span class="tocnumber">1.2</span> <span class="toctext">أنظمة خالية من الخلايا</span></a></li>
</ul>
</li>
<li class="toclevel-1 tocsection-15"><a href="#أنظر_أيضاً"><span class="tocnumber">2</span> <span class="toctext">أنظر أيضاً</span></a></li>
<li class="toclevel-1 tocsection-16"><a href="#مراجع"><span class="tocnumber">3</span> <span class="toctext">مراجع</span></a></li>
</ul>
</div>
<h2><span id=".D8.A3.D9.86.D8.B8.D9.85.D8.A9_.D8.A5.D9.86.D8.AA.D8.A7.D8.AC_.D8.A7.D9.84.D8.A8.D8.B1.D9.88.D8.AA.D9.8A.D9.86"></span><span class="mw-headline" id="أنظمة_إنتاج_البروتين">أنظمة إنتاج البروتين</span><span class="mw-editsection"><span class="mw-editsection-bracket">[</span><a href="/w/index.php?title=%D8%A5%D9%86%D8%AA%D8%A7%D8%AC_%D8%A7%D9%84%D8%A8%D8%B1%D9%88%D8%AA%D9%8A%D9%86&action=edit&section=1" title="عدل القسم: أنظمة إنتاج البروتين">عدل المصدر</a><span class="mw-editsection-bracket">]</span></span></h2>
<p>تشمل أنظمة إنتاج البروتين المستخدمة بشكل شائع تلك المشتقة من <a href="/wiki/%D8%A8%D9%83%D8%AA%D9%8A%D8%B1%D9%8A%D8%A7" title="بكتيريا">البكتيريا</a>،<sup id="cite_ref-pmid10508629_2-0" class="reference"><a href="#cite_note-pmid10508629-2">[2]</a></sup> <a href="/wiki/%D8%AE%D9%85%D9%8A%D8%B1%D8%A9" title="خميرة">الخميرة</a>،<sup id="cite_ref-pmid11098467_3-0" class="reference"><a href="#cite_note-pmid11098467-3">[3]</a></sup><sup id="cite_ref-pmid21943899_4-0" class="reference"><a href="#cite_note-pmid21943899-4">[4]</a></sup> <a href="/wiki/%D9%81%D9%8A%D8%B1%D9%88%D8%B3_%D8%B9%D8%B5%D9%88%D9%8A" title="فيروس عصوي">الفيروس البكتيري</a>/<a href="/wiki/%D8%AD%D8%B4%D8%B1%D8%A9" title="حشرة">الحشرات</a>،<sup id="cite_ref-pmid15877075_5-0" class="reference"><a href="#cite_note-pmid15877075-5">[5]</a></sup> خلايا <a href="/wiki/%D8%AB%D8%AF%D9%8A%D9%8A%D8%A7%D8%AA" title="ثدييات">الثدييات</a>،<sup id="cite_ref-pmid15766864_6-0" class="reference"><a href="#cite_note-pmid15766864-6">[6]</a></sup><sup id="cite_ref-pmid18541133_7-0" class="reference"><a href="#cite_note-pmid18541133-7">[7]</a></sup> ومؤخرًا الفطريات الخيطية.<sup id="cite_ref-Visser_214–223_8-0" class="reference"><a href="#cite_note-Visser_214–223-8">[8]</a></sup> عندما يتم إنتاج المستحضرات الصيدلانية الحيوية باستخدام أحد هذه الأنظمة، فإن الشوائب المرتبطة بالعملية المسماة <a href="/wiki/%D8%A8%D8%B1%D9%88%D8%AA%D9%8A%D9%86%D8%A7%D8%AA_%D8%A7%D9%84%D8%AE%D9%84%D9%8A%D8%A9_%D8%A7%D9%84%D9%85%D8%B6%D9%8A%D9%81" title="بروتينات الخلية المضيف">بروتينات الخلية المضيفة</a> تصل أيضًا إلى المنتج النهائي بكميات ضئيلة.<sup id="cite_ref-9" class="reference"><a href="#cite_note-9">[9]</a></sup>
</p>
<h3><span id=".D8.A7.D9.84.D8.A3.D9.86.D8.B8.D9.85.D8.A9_.D8.A7.D9.84.D9.85.D8.B3.D8.AA.D9.86.D8.AF.D8.A9_.D8.A5.D9.84.D9.89_.D8.A7.D9.84.D8.AE.D9.84.D9.8A.D8.A9"></span><span class="mw-headline" id="الأنظمة_المستندة_إلى_الخلية">الأنظمة المستندة إلى الخلية</span><span class="mw-editsection"><span class="mw-editsection-bracket">[</span><a href="/w/index.php?title=%D8%A5%D9%86%D8%AA%D8%A7%D8%AC_%D8%A7%D9%84%D8%A8%D8%B1%D9%88%D8%AA%D9%8A%D9%86&action=edit&section=2" title="عدل القسم: الأنظمة المستندة إلى الخلية">عدل المصدر</a><span class="mw-editsection-bracket">]</span></span></h3>
<p>تعتمد أنظمة التعبير الأقدم والأكثر استخدامًا على الخلايا ويمكن تعريفها على أنها "مزيج من <a href="/wiki/%D9%86%D8%A7%D9%82%D9%84_%D8%A7%D9%84%D8%B9%D8%A8%D8%A7%D8%B1%D8%A9" title="ناقل العبارة">ناقل العبارة</a>، وحمضه النووي المستنسخ، والمضيف للناقل الذي يوفر سياقًا للسماح بوظيفة الجين الأجنبي في خلية مضيفة، والذي هو إنتاج بروتينات على مستوى عالٍ".<sup id="cite_ref-urlDefinition:_expression_system_from_Online_Medical_Dictionary_10-0" class="reference"><a href="#cite_note-urlDefinition:_expression_system_from_Online_Medical_Dictionary-10">[10]</a></sup><sup id="cite_ref-urlExpression_system_11-0" class="reference"><a href="#cite_note-urlExpression_system-11">[11]</a></sup> الإفراط في التعبير هو مستوى مرتفع بشكل غير طبيعي ومفرط من <a href="/wiki/%D8%AA%D8%B9%D8%A8%D9%8A%D8%B1_%D8%AC%D9%8A%D9%86%D9%8A" title="تعبير جيني">التعبير الجيني</a> الذي ينتج عنه <a href="/wiki/%D9%86%D9%85%D8%B7_%D8%B8%D8%A7%D9%87%D8%B1%D9%8A" title="نمط ظاهري">نمط ظاهري</a> مرتبط بالجين.<sup id="cite_ref-Overexpression_-_Oxford_12-0" class="reference"><a href="#cite_note-Overexpression_-_Oxford-12">[12]</a></sup><sup id="cite_ref-13" class="reference"><a href="#cite_note-13">[13]</a></sup>
</p><p>هناك العديد من الطرق لإدخال <a href="/wiki/%D8%AD%D9%85%D8%B6_%D9%86%D9%88%D9%88%D9%8A_%D8%B1%D9%8A%D8%A8%D9%88%D8%B2%D9%8A_%D9%85%D9%86%D9%82%D9%88%D8%B5_%D8%A7%D9%84%D8%A3%D9%83%D8%B3%D8%AC%D9%8A%D9%86" title="حمض نووي ريبوزي منقوص الأكسجين">الحمض النووي الريبوزي منقوص الأكسجين</a> غريب إلى خلية للتعبير، ويمكن استخدام العديد من الخلايا المضيفة المختلفة للتعبير- لكل نظام تعبير مزايا ومسؤوليات مميزة. عادةً ما يُشار إلى أنظمة التعبير من قبل المضيف ومصدر الحمض النووي أو آلية توصيل المادة الجينية. على سبيل المثال، <a href="/wiki/%D8%B9%D8%A7%D8%A6%D9%84_(%D8%A3%D8%AD%D9%8A%D8%A7%D8%A1)" title="عائل (أحياء)">العوائل</a> الشائعة هي <a href="/wiki/%D8%A8%D9%83%D8%AA%D9%8A%D8%B1%D9%8A%D8%A7" title="بكتيريا">البكتيريا</a> (مثل <a href="/wiki/%D8%A5%D8%B4%D8%B1%D9%8A%D9%83%D9%8A%D8%A9_%D9%82%D9%88%D9%84%D9%88%D9%86%D9%8A%D8%A9" title="إشريكية قولونية">البكتيريا الإشريكية القولونية</a>، و<a href="/wiki/%D8%B9%D8%B5%D9%88%D9%8A%D8%A9_%D8%B1%D9%82%D9%8A%D9%82%D8%A9" title="عصوية رقيقة">العصوية الرقيقة</a>)، و<a href="/wiki/%D8%AE%D9%85%D9%8A%D8%B1%D8%A9" title="خميرة">الخميرة</a> (مثل السكيراء الجعوية أو فطريات الخميرة <sup id="cite_ref-pmid21943899_4-1" class="reference"><a href="#cite_note-pmid21943899-4">[4]</a></sup>) أو <a href="/wiki/%D8%AD%D9%82%D9%8A%D9%82%D9%8A%D8%A7%D8%AA_%D8%A7%D9%84%D9%86%D9%88%D9%89" title="حقيقيات النوى">سلالات الخلايا حقيقية النواة</a>. مصادر الحمض النووي وآليات التوصيل الشائعة هي <a href="/wiki/%D9%81%D9%8A%D8%B1%D9%88%D8%B3" title="فيروس">الفيروسات</a> (مثل <a href="/wiki/%D9%81%D9%8A%D8%B1%D9%88%D8%B3_%D8%B9%D8%B5%D9%88%D9%8A" title="فيروس عصوي">الفيروس العصوي</a> و<a href="/wiki/%D9%81%D9%8A%D8%B1%D9%88%D8%B3_%D8%B1%D8%A7%D8%AC%D8%B9" title="فيروس راجع">الفيروسات القهقرية</a> و<a href="/wiki/%D9%81%D9%8A%D8%B1%D9%88%D8%B3%D8%A7%D8%AA_%D8%BA%D8%AF%D8%A7%D9%86%D9%8A%D8%A9" title="فيروسات غدانية">الفيروسات الغدية</a>) و<a href="/wiki/%D8%A8%D9%84%D8%A7%D8%B2%D9%85%D9%8A%D8%AF" title="بلازميد">البلازميدات</a> و<a href="/wiki/%D9%83%D8%B1%D9%88%D9%85%D9%88%D8%B3%D9%88%D9%85_%D8%A7%D8%B5%D8%B7%D9%86%D8%A7%D8%B9%D9%8A_%D9%84%D9%84%D8%AE%D9%85%D9%8A%D8%B1%D8%A9" title="كروموسوم اصطناعي للخميرة">الكروموسومات الاصطناعية</a> و<a href="/wiki/%D8%B9%D8%A7%D8%AB%D9%8A%D8%A9" title="عاثية">العاثية</a> (مثل لامدا). يعتمد أفضل نظام تعبير على الجين المعني، على سبيل المثال، غالبًا ما يُفضل <a href="/wiki/%D8%B3%D9%83%D9%8A%D8%B1%D8%A7%D8%A1_%D8%AC%D8%B9%D9%88%D9%8A%D8%A9" title="سكيراء جعوية">السكيراء الجعوية</a> للبروتينات التي تتطلب <a href="/wiki/%D8%AA%D8%B9%D8%AF%D9%8A%D9%84_%D9%85%D8%A7_%D8%A8%D8%B9%D8%AF_%D8%A7%D9%84%D8%AA%D8%B1%D8%AC%D9%85%D8%A9" title="تعديل ما بعد الترجمة">تعديلًا كبيرًا بعد الترجمة</a>. تُستخدم خطوط <a href="/wiki/%D8%AD%D8%B4%D8%B1%D8%A9" title="حشرة">الخلايا الحشرية</a> أو <a href="/wiki/%D8%AB%D8%AF%D9%8A%D9%8A%D8%A7%D8%AA" title="ثدييات">الثديية</a> عند الحاجة إلى ربط مرنا يشبه الإنسان. ومع ذلك، فإن التعبير البكتيري يتميز بسهولة إنتاج كميات كبيرة من البروتين ، وهو أمر ضروري <a href="/wiki/%D8%AF%D8%B1%D8%A7%D8%B3%D8%A9_%D8%A7%D9%84%D8%A8%D9%84%D9%88%D8%B1%D8%A7%D8%AA_%D8%A8%D8%A7%D9%84%D8%A3%D8%B4%D8%B9%D8%A9_%D8%A7%D9%84%D8%B3%D9%8A%D9%86%D9%8A%D8%A9" title="دراسة البلورات بالأشعة السينية">لتصوير البلورات بالأشعة السينية</a> أو تجارب <a href="/wiki/%D8%B1%D9%86%D9%8A%D9%86_%D9%85%D8%BA%D9%86%D8%A7%D8%B7%D9%8A%D8%B3%D9%8A_%D9%86%D9%88%D9%88%D9%8A" title="رنين مغناطيسي نووي">الرنين المغناطيسي النووي</a> لتحديد الهيكل.
</p><p>نظرًا لأن <a href="/wiki/%D8%A8%D8%AF%D8%A7%D8%A6%D9%8A%D8%A7%D8%AA_%D8%A7%D9%84%D9%86%D9%88%D9%89" title="بدائيات النوى">البكتيريا بدائيات النوى</a>، فهي غير مجهزة بالآلية الأنزيمية الكاملة لتحقيق التعديلات المطلوبة بعد الترجمة أو الطي الجزيئي. ومن ثم، فإن البروتينات حقيقية النواة متعددة المجالات التي يتم التعبير عنها في البكتيريا غالبًا ما تكون غير وظيفية. أيضًا، تصبح العديد من البروتينات غير قابلة للذوبان كأجسام متضمنة يصعب استردادها دون عوامل تغيير طبيعة قاسية وما تلاه من إعادة تقوية البروتين المرهقة.
</p><p>لمعالجة هذه المخاوف، تم تطوير أنظمة التعبيرات باستخدام العديد من الخلايا حقيقية النواة للتطبيقات التي تتطلب تطابق البروتينات كما هو الحال في الكائنات حقيقية النواة أو أقرب إليها: يتم نقل خلايا النباتات (مثل التبغ) أو الحشرات أو الثدييات (مثل الأبقار) مع الجينات ومزروعة في المعلق وحتى الأنسجة أو الكائنات الحية الكاملة، لإنتاج البروتينات مطوية بالكامل. ومع ذلك، فإن أنظمة التعبير عن الثدييات <a href="/wiki/%D9%81%D9%8A_%D8%A7%D9%84%D8%AC%D8%B3%D9%85_%D8%A7%D9%84%D8%AD%D9%8A" title="في الجسم الحي">في الجسم الحي</a> لها عائد منخفض وقيود أخرى (تستغرق وقتًا طويلاً، وسمية للخلايا المضيفة، …). للجمع بين الغلة/الإنتاجية العالية وميزات البروتين القابلة للتطوير للبكتيريا والخميرة، والميزات اللاجينية المتقدمة للنباتات والحشرات وأنظمة الثدييات، تم تطوير أنظمة إنتاج البروتين الأخرى باستخدام حقيقيات النوى أحادية الخلية (أي خلايا "<a href="/wiki/%D9%84%D9%8A%D8%B4%D9%85%D8%A7%D9%86%D9%8A%D8%A7" title="ليشمانيا">ليشمانيا</a>" غير المسببة للأمراض).
</p>
<h4><span id=".D8.A7.D9.84.D8.A3.D9.86.D8.B8.D9.85.D8.A9_.D8.A7.D9.84.D8.A8.D9.83.D8.AA.D9.8A.D8.B1.D9.8A.D8.A9"></span><span class="mw-headline" id="الأنظمة_البكتيرية">الأنظمة البكتيرية</span><span class="mw-editsection"><span class="mw-editsection-bracket">[</span><a href="/w/index.php?title=%D8%A5%D9%86%D8%AA%D8%A7%D8%AC_%D8%A7%D9%84%D8%A8%D8%B1%D9%88%D8%AA%D9%8A%D9%86&action=edit&section=3" title="عدل القسم: الأنظمة البكتيرية">عدل المصدر</a><span class="mw-editsection-bracket">]</span></span></h4>
<h5><span id=".D8.A7.D9.84.D8.A5.D8.B4.D8.B1.D9.8A.D9.83.D9.8A.D8.A9_.D8.A7.D9.84.D9.82.D9.88.D9.84.D9.88.D9.86.D9.8A.D8.A9"></span><span class="mw-headline" id="الإشريكية_القولونية">الإشريكية القولونية</span><span class="mw-editsection"><span class="mw-editsection-bracket">[</span><a href="/w/index.php?title=%D8%A5%D9%86%D8%AA%D8%A7%D8%AC_%D8%A7%D9%84%D8%A8%D8%B1%D9%88%D8%AA%D9%8A%D9%86&action=edit&section=4" title="عدل القسم: الإشريكية القولونية">عدل المصدر</a><span class="mw-editsection-bracket">]</span></span></h5>
<div class="thumb tleft"><div class="thumbinner" style="width:222px;"><a href="/wiki/%D9%85%D9%84%D9%81:EscherichiaColi_NIAID.jpg" class="image"><img alt="" src="//upload.wikimedia.org/wikipedia/commons/thumb/3/32/EscherichiaColi_NIAID.jpg/220px-EscherichiaColi_NIAID.jpg" decoding="async" width="220" height="185" class="thumbimage" srcset="//upload.wikimedia.org/wikipedia/commons/thumb/3/32/EscherichiaColi_NIAID.jpg/330px-EscherichiaColi_NIAID.jpg 1.5x, //upload.wikimedia.org/wikipedia/commons/thumb/3/32/EscherichiaColi_NIAID.jpg/440px-EscherichiaColi_NIAID.jpg 2x" data-file-width="1024" data-file-height="861" /></a> <div class="thumbcaption"><div class="magnify"><a href="/wiki/%D9%85%D9%84%D9%81:EscherichiaColi_NIAID.jpg" class="internal" title="كبّر"></a></div>E. coli ، أحد أكثر العوائل شهرة للتعبير الجيني الاصطناعي</div></div></div>
<p>تعتبر الإشريكية القولونية (E. coli ) واحدة من أكثر مضيفات التعبير استخدامًا، وعادةً ما يتم إدخال الحمض النووي في ناقل التعبير <a href="/wiki/%D8%A8%D9%84%D8%A7%D8%B2%D9%85%D9%8A%D8%AF" title="بلازميد">البلازميدي</a>. تم تطوير تقنيات الإفراط في التعبير في الإشريكية القولونية بشكل جيد وتعمل عن طريق زيادة عدد نسخ الجين أو زيادة قوة الارتباط لمنطقة المحفز، مما يساعد على النسخ.
</p><p>على سبيل المثال، يمكن <a href="/wiki/%D8%A7%D8%B3%D8%AA%D9%86%D8%B3%D8%A7%D8%AE" title="استنساخ">استنساخ</a> تسلسل الحمض النووي الريبوزي منقوص الأكسجين لبروتين ذي أهمية أو <a href="/wiki/%D8%A7%D8%B3%D8%AA%D9%86%D8%B3%D8%A7%D8%AE_%D9%81%D8%B1%D8%B9%D9%8A" title="استنساخ فرعي">استنساخه جزئيًا</a> في بلازميد ذي رقم نسخ مرتفع يحتوي على محفز lac (غالبًا LacUV5)، والذي يتم <a href="/wiki/%D8%AA%D8%AD%D9%88%D9%84_(%D9%88%D8%B1%D8%A7%D8%AB%D8%A9)" title="تحول (وراثة)">تحويله</a> بعد ذلك إلى بكتيريا E. coli. تعمل إضافة تناظرية اللاكتوز على تنشيط محفز اللاكتوز (lac) ويسبب البكتيريا للتعبير عن البروتين الفائدة.
</p><p>سلالة الإشريكية القولونية BL21 وBL21 (DE3) سلالتان تستخدمان بشكل شائع لإنتاج البروتين. كأعضاء في سلالة B، فإنهم يفتقرون إلى البروتياز lon وOmpT، مما يحمي البروتينات المنتجة من التدهور. يوفر <a href="/wiki/%D8%B7%D9%84%D9%8A%D8%B9%D8%A9_%D8%A7%D9%84%D8%B9%D8%A7%D8%AB%D9%8A%D8%A9" title="طليعة العاثية">طليعة العاثية</a> الموجود في BL21 (DE3) بوليميريز <a href="/wiki/%D8%AA%D9%8A_7_%D8%A8%D9%88%D9%84%D9%8A%D9%85%D9%8A%D8%B1%D8%A7%D8%B2_%D8%A7%D9%84%D8%AD%D9%85%D8%B6_%D8%A7%D9%84%D9%86%D9%88%D9%88%D9%8A_%D8%A7%D9%84%D8%B1%D8%A7%D9%8A%D8%A8%D9%88%D8%B2%D9%8A" title="تي 7 بوليميراز الحمض النووي الرايبوزي">تي 7 بوليميراز الحمض النووي الرايبوزي</a> (مدفوعًا بمحفز LacUV5)، مما يسمح باستخدام نواقل مع محفز T7 بدلاً من ذلك.<sup id="cite_ref-14" class="reference"><a href="#cite_note-14">[14]</a></sup>
</p>
<h5><span id=".D8.A7.D9.84.D9.88.D8.AA.D8.AF.D9.8A.D8.A9"></span><span class="mw-headline" id="الوتدية">الوتدية</span><span class="mw-editsection"><span class="mw-editsection-bracket">[</span><a href="/w/index.php?title=%D8%A5%D9%86%D8%AA%D8%A7%D8%AC_%D8%A7%D9%84%D8%A8%D8%B1%D9%88%D8%AA%D9%8A%D9%86&action=edit&section=5" title="عدل القسم: الوتدية">عدل المصدر</a><span class="mw-editsection-bracket">]</span></span></h5>
<p>تستخدم الأنواع غير المسببة للأمراض من <a href="/wiki/%D9%88%D8%AA%D8%AF%D9%8A%D8%A9" title="وتدية">الوتديات</a> موجبة الجرام للإنتاج التجاري للأحماض الأمينية المختلفة. تُستخدم أنواع الوتدية الجلوتاميك على نطاق واسع لإنتاج <a href="/wiki/%D8%AD%D9%85%D8%B6_%D8%A7%D9%84%D8%AC%D9%84%D9%88%D8%AA%D8%A7%D9%85%D9%8A%D9%83" title="حمض الجلوتاميك">الغلوتامات</a> و<a href="/wiki/%D9%84%D8%A7%D9%8A%D8%B3%D9%8A%D9%86" title="لايسين">الليسين</a>،<sup id="cite_ref-15" class="reference"><a href="#cite_note-15">[15]</a></sup> ومكونات أغذية الإنسان وعلف الحيوانات والمنتجات الصيدلانية.
</p><p>تم التعبير عن عامل نمو البشرة البشري النشط وظيفيًا في الوتدية الجلوتاميك،<sup id="cite_ref-16" class="reference"><a href="#cite_note-16">[16]</a></sup> مما يدل على إمكانية الإنتاج على نطاق صناعي للبروتينات البشرية. يمكن استهداف البروتينات المعبر عنها <a href="/wiki/%D8%A5%D9%81%D8%B1%D8%A7%D8%B2" title="إفراز">للإفراز</a> إما من خلال المسار الإفرازي العام (Sec) أو مسار الانتقال التوأم أرجينين (Tat).<sup id="cite_ref-17" class="reference"><a href="#cite_note-17">[17]</a></sup>
</p><p>على عكس <a href="/wiki/%D8%A8%D9%83%D8%AA%D9%8A%D8%B1%D9%8A%D8%A7_%D8%B3%D9%84%D8%A8%D9%8A%D8%A9_%D8%A7%D9%84%D8%BA%D8%B1%D8%A7%D9%85" title="بكتيريا سلبية الغرام">البكتيريا سالبة الجرام</a>، تفتقر الوتدية موجبة الجرام إلى <a href="/wiki/%D8%B9%D8%AF%D9%8A%D8%AF_%D8%A7%D9%84%D8%B3%D9%83%D8%A7%D8%B1%D9%8A%D8%AF_%D8%A7%D9%84%D8%B4%D8%AD%D9%85%D9%8A" title="عديد السكاريد الشحمي">عديدات السكاريد الدهنية</a> التي تعمل كسموم داخلية مستضدية في البشر.
</p>
<h5><span id=".D8.B2.D8.A7.D8.A6.D9.81.D8.A9_.D9.85.D8.AA.D8.A3.D9.84.D9.82.D8.A9"></span><span class="mw-headline" id="زائفة_متألقة">زائفة متألقة</span><span class="mw-editsection"><span class="mw-editsection-bracket">[</span><a href="/w/index.php?title=%D8%A5%D9%86%D8%AA%D8%A7%D8%AC_%D8%A7%D9%84%D8%A8%D8%B1%D9%88%D8%AA%D9%8A%D9%86&action=edit&section=6" title="عدل القسم: زائفة متألقة">عدل المصدر</a><span class="mw-editsection-bracket">]</span></span></h5>
<p>تُستخدم البكتيريا غير الممرضة وسالبة الجرام، <a href="/wiki/%D8%B2%D8%A7%D8%A6%D9%81%D8%A9_%D9%85%D8%AA%D8%A3%D9%84%D9%82%D8%A9" title="زائفة متألقة">زائفة متألقة</a>، لإنتاج البروتينات المؤتلفة عالية المستوى؛ عادة لتطوير المداواة الحيوية واللقاحات. الزائفة المتألقة هي كائن حي متعدد الاستخدامات من الناحية الأيضية، مما يسمح بفحص الإنتاجية العالية والتطور السريع للبروتينات المعقدة. تشتهر الزائفة المتألقة بقدرتها على إنتاج عيارات عالية من البروتين النشط والقابل للذوبان بشكل سريع وناجح.<sup id="cite_ref-18" class="reference"><a href="#cite_note-18">[18]</a></sup>
</p>
<h4><span id=".D8.A3.D9.86.D8.B8.D9.85.D8.A9_.D8.AD.D9.82.D9.8A.D9.82.D9.8A.D8.A9_.D8.A7.D9.84.D9.86.D9.88.D8.A7.D8.A9"></span><span class="mw-headline" id="أنظمة_حقيقية_النواة">أنظمة حقيقية النواة</span><span class="mw-editsection"><span class="mw-editsection-bracket">[</span><a href="/w/index.php?title=%D8%A5%D9%86%D8%AA%D8%A7%D8%AC_%D8%A7%D9%84%D8%A8%D8%B1%D9%88%D8%AA%D9%8A%D9%86&action=edit&section=7" title="عدل القسم: أنظمة حقيقية النواة">عدل المصدر</a><span class="mw-editsection-bracket">]</span></span></h4>
<h5><span id=".D8.A7.D9.84.D8.AE.D9.85.D9.8A.D8.B1.D8.A9"></span><span class="mw-headline" id="الخميرة">الخميرة</span><span class="mw-editsection"><span class="mw-editsection-bracket">[</span><a href="/w/index.php?title=%D8%A5%D9%86%D8%AA%D8%A7%D8%AC_%D8%A7%D9%84%D8%A8%D8%B1%D9%88%D8%AA%D9%8A%D9%86&action=edit&section=8" title="عدل القسم: الخميرة">عدل المصدر</a><span class="mw-editsection-bracket">]</span></span></h5>
<p>تسمح أنظمة التعبير التي تستخدم إما <a href="/wiki/%D8%B3%D9%83%D9%8A%D8%B1%D8%A7%D8%A1_%D8%AC%D8%B9%D9%88%D9%8A%D8%A9" title="سكيراء جعوية">سكيراء جعوية</a> أو Pichia pastoris بإنتاج مستقر ودائم للبروتينات التي تتم معالجتها بشكل مشابه لخلايا الثدييات، بإنتاجية عالية، في وسائط محددة كيميائيًا من البروتينات.
</p>
<h5><span id=".D8.A7.D9.84.D9.81.D8.B7.D8.B1.D9.8A.D8.A7.D8.AA_.D8.A7.D9.84.D8.AE.D9.8A.D8.B7.D9.8A.D8.A9"></span><span class="mw-headline" id="الفطريات_الخيطية">الفطريات الخيطية</span><span class="mw-editsection"><span class="mw-editsection-bracket">[</span><a href="/w/index.php?title=%D8%A5%D9%86%D8%AA%D8%A7%D8%AC_%D8%A7%D9%84%D8%A8%D8%B1%D9%88%D8%AA%D9%8A%D9%86&action=edit&section=9" title="عدل القسم: الفطريات الخيطية">عدل المصدر</a><span class="mw-editsection-bracket">]</span></span></h5>
<p>تم تطوير الفطريات الخيطية، خاصة <a href="/wiki/%D8%B1%D8%B4%D8%A7%D8%B4%D9%8A%D8%A9" title="رشاشية">الرشاشيات</a> والتريكوديرما، ولكن مؤخرًا تم تطوير Myceliophthora thermophila C1<sup id="cite_ref-Visser_214–223_8-1" class="reference"><a href="#cite_note-Visser_214–223-8">[8]</a></sup> إلى منصات تعبير لفحص وإنتاج <a href="/wiki/%D8%A5%D9%86%D8%B2%D9%8A%D9%85%D8%A7%D8%AA_%D8%B5%D9%86%D8%A7%D8%B9%D9%8A%D8%A9" title="إنزيمات صناعية">الإنزيمات الصناعية</a> المتنوعة. يُظهر نظام التعبير C1 مورفولوجيا منخفضة اللزوجة في الثقافة المغمورة، مما يتيح استخدام وسائط النمو والإنتاج المعقدة.
</p>
<h5><span id=".D8.A7.D9.84.D8.AE.D9.84.D8.A7.D9.8A.D8.A7_.D8.A7.D9.84.D9.85.D8.B5.D8.A7.D8.A8.D8.A9_.D8.A8.D9.81.D9.8A.D8.B1.D9.88.D8.B3_.D8.A8.D8.A7.D9.83.D9.88.D9.84.D9.88.D9.81.D9.8A.D8.B1.D9.88.D8.B3"></span><span class="mw-headline" id="الخلايا_المصابة_بفيروس_باكولوفيروس">الخلايا المصابة بفيروس باكولوفيروس</span><span class="mw-editsection"><span class="mw-editsection-bracket">[</span><a href="/w/index.php?title=%D8%A5%D9%86%D8%AA%D8%A7%D8%AC_%D8%A7%D9%84%D8%A8%D8%B1%D9%88%D8%AA%D9%8A%D9%86&action=edit&section=10" title="عدل القسم: الخلايا المصابة بفيروس باكولوفيروس">عدل المصدر</a><span class="mw-editsection-bracket">]</span></span></h5>
<p>تسمح الخلايا الحشرية المصابة <a href="/wiki/%D9%81%D9%8A%D8%B1%D9%88%D8%B3_%D8%B9%D8%B5%D9%88%D9%8A" title="فيروس عصوي">بفيروس باكولوفيروس</a><sup id="cite_ref-ReferenceA_19-0" class="reference"><a href="#cite_note-ReferenceA-19">[19]</a></sup> (Sf9 ، Sf21 ، خمسة سلالات عالية) أو خلايا الثدييات<sup id="cite_ref-20" class="reference"><a href="#cite_note-20">[20]</a></sup> (<a href="/wiki/%D8%AE%D9%84%D8%A7%D9%8A%D8%A7_%D9%87%D9%8A%D9%84%D8%A7" title="خلايا هيلا">خلايا هيلا</a>، و خلايا HEK 293) بإنتاج بروتينات غشائية أو غليكوزيلات لا يمكن إنتاجها باستخدام أنظمة فطرية أو بكتيرية.<sup id="cite_ref-ReferenceA_19-1" class="reference"><a href="#cite_note-ReferenceA-19">[19]</a></sup> يفيد في إنتاج البروتينات بكميات عالية. لا يتم التعبير عن الجينات بشكل مستمر لأن الخلايا المضيفة المصابة تتلاشى في النهاية وتموت خلال كل دورة عدوى.<sup id="cite_ref-21" class="reference"><a href="#cite_note-21">[21]</a></sup>
</p>
<h5><span id=".D8.AA.D8.B9.D8.A8.D9.8A.D8.B1_.D8.AE.D9.84.D9.8A.D8.A9_.D8.AD.D8.B4.D8.B1.D9.8A.D8.A9_.D8.BA.D9.8A.D8.B1_.D9.84.D9.8A.D8.AA.D9.8A"></span><span class="mw-headline" id="تعبير_خلية_حشرية_غير_ليتي">تعبير خلية حشرية غير ليتي</span><span class="mw-editsection"><span class="mw-editsection-bracket">[</span><a href="/w/index.php?title=%D8%A5%D9%86%D8%AA%D8%A7%D8%AC_%D8%A7%D9%84%D8%A8%D8%B1%D9%88%D8%AA%D9%8A%D9%86&action=edit&section=11" title="عدل القسم: تعبير خلية حشرية غير ليتي">عدل المصدر</a><span class="mw-editsection-bracket">]</span></span></h5>
<p>يُعد التعبير عن خلية الحشرات غير اللايتية بديلاً لنظام التعبير عن فيروس باكولوفيروس. في التعبير غير الليلي، يتم <a href="/wiki/%D8%AA%D8%B9%D8%AF%D8%A7%D8%A1" title="تعداء">نقل</a> النواقل بشكل عابر أو ثابت إلى الحمض النووي الصبغي لخلايا الحشرات من أجل التعبير الجيني اللاحق.<sup id="cite_ref-Dyring_22-0" class="reference"><a href="#cite_note-Dyring-22">[22]</a></sup><sup id="cite_ref-Olczak_23-0" class="reference"><a href="#cite_note-Olczak-23">[23]</a></sup> ويتبع ذلك اختيار وفحص الحيوانات المستنسخة المؤتلفة.<sup id="cite_ref-McCarroll_24-0" class="reference"><a href="#cite_note-McCarroll-24">[24]</a></sup> تم استخدام النظام غير اللاحلالي لإعطاء إنتاجية أعلى للبروتين وتعبير أسرع عن الجينات المؤتلفة مقارنة بالتعبير الخلوي المصاب بالفيروس البكتيري.<sup id="cite_ref-Olczak_23-1" class="reference"><a href="#cite_note-Olczak-23">[23]</a></sup> خطوط الخلايا المستخدمة لهذا النظام تشمل: Sf9 ، Sf21 من خلايا <a href="/wiki/%D8%AF%D9%88%D8%AF%D8%A9_%D8%A7%D9%84%D8%AD%D8%B4%D8%AF_%D8%A7%D9%84%D8%AE%D8%B1%D9%8A%D9%81%D9%8A%D8%A9" title="دودة الحشد الخريفية">دودة الحشد الخريفية</a>، Hi-5 من خلايا <a href="/wiki/%D9%88%D8%A8%D9%8A%D8%B1_%D8%A7%D9%84%D9%85%D9%84%D9%81%D9%88%D9%81" title="وبير الملفوف">وبير الملفوف</a>، وخلايا Schneider 2 وخلايا Schneider 3 من خلايا <a href="/wiki/%D8%B0%D8%A8%D8%A7%D8%A8%D8%A9_%D9%81%D8%A7%D9%83%D9%87%D8%A9_%D8%B4%D8%A7%D8%A6%D8%B9%D8%A9" title="ذبابة فاكهة شائعة">ذبابة فاكهة شائعة</a>.<sup id="cite_ref-Dyring_22-1" class="reference"><a href="#cite_note-Dyring-22">[22]</a></sup><sup id="cite_ref-McCarroll_24-1" class="reference"><a href="#cite_note-McCarroll-24">[24]</a></sup> مع هذا النظام، لا تتلاشى الخلايا ويمكن استخدام العديد من طرق الزراعة.<sup id="cite_ref-Dyring_22-2" class="reference"><a href="#cite_note-Dyring-22">[22]</a></sup> بالإضافة إلى ذلك، عمليات إنتاج البروتين قابلة للتكاثر.<sup id="cite_ref-Dyring_22-3" class="reference"><a href="#cite_note-Dyring-22">[22]</a></sup><sup id="cite_ref-Olczak_23-2" class="reference"><a href="#cite_note-Olczak-23">[23]</a></sup> يعطي هذا النظام منتجًا متجانسًا.<sup id="cite_ref-Olczak_23-3" class="reference"><a href="#cite_note-Olczak-23">[23]</a></sup> عيب هذا النظام هو الحاجة إلى خطوة فرز إضافية لاختيار الحيوانات <a href="/wiki/%D8%A7%D8%B3%D8%AA%D9%86%D8%B3%D8%A7%D8%AE_(%D8%B9%D9%84%D9%85_%D8%A7%D9%84%D8%A3%D8%AD%D9%8A%D8%A7%D8%A1_%D8%A7%D9%84%D8%AE%D9%84%D9%88%D9%8A)" title="استنساخ (علم الأحياء الخلوي)">المستنسخة</a> القابلة للحياة.<sup id="cite_ref-McCarroll_24-2" class="reference"><a href="#cite_note-McCarroll-24">[24]</a></sup>
</p>
<h5><span id=".D8.B7.D9.84.D8.A7.D8.A6.D8.B9.D9.8A.D8.A7.D8.AA_.D9.83.D9.87.D9.81.D9.8A.D8.A9"></span><span class="mw-headline" id="طلائعيات_كهفية">طلائعيات كهفية</span><span class="mw-editsection"><span class="mw-editsection-bracket">[</span><a href="/w/index.php?title=%D8%A5%D9%86%D8%AA%D8%A7%D8%AC_%D8%A7%D9%84%D8%A8%D8%B1%D9%88%D8%AA%D9%8A%D9%86&action=edit&section=12" title="عدل القسم: طلائعيات كهفية">عدل المصدر</a><span class="mw-editsection-bracket">]</span></span></h5>
<p>تسمح أنظمة تعبير <a href="/wiki/%D9%84%D9%8A%D8%B4%D9%85%D8%A7%D9%86%D9%8A%D8%A7" title="ليشمانيا">ليشمانيا</a> (لا يمكن أن تصيب الثدييات) بإنتاج مستقر ودائم للبروتينات بإنتاجية عالية، في وسائط محددة كيميائيًا. تُظهر البروتينات المُنتجة تعديلات ما بعد الترجمة حقيقية النواة بالكامل، بما في ذلك الارتباط <a href="/wiki/%D8%BA%D9%84%D9%83%D8%B2%D8%A9" title="غلكزة">بالجليكوزيل</a> وتشكيل رابطة ثنائي كبريتيد.
</p>
<h5><span id=".D8.A3.D9.86.D8.B8.D9.85.D8.A9_.D8.A7.D9.84.D8.AB.D8.AF.D9.8A.D9.8A.D8.A7.D8.AA"></span><span class="mw-headline" id="أنظمة_الثدييات">أنظمة الثدييات</span><span class="mw-editsection"><span class="mw-editsection-bracket">[</span><a href="/w/index.php?title=%D8%A5%D9%86%D8%AA%D8%A7%D8%AC_%D8%A7%D9%84%D8%A8%D8%B1%D9%88%D8%AA%D9%8A%D9%86&action=edit&section=13" title="عدل القسم: أنظمة الثدييات">عدل المصدر</a><span class="mw-editsection-bracket">]</span></span></h5>
<ul><li>أنظمة التعبير الأكثر شيوعًا للثدييات هي خلايا مبيض الهامستر الصيني (CHO) وخلايا الكلى الجنينية البشرية (HEK).<sup id="cite_ref-Zhu_1158–1170_25-0" class="reference"><a href="#cite_note-Zhu_1158–1170-25">[25]</a></sup><sup id="cite_ref-:0_26-0" class="reference"><a href="#cite_note-:0-26">[26]</a></sup><sup id="cite_ref-27" class="reference"><a href="#cite_note-27">[27]</a></sup></li>
<li>خلية مبيض الهامستر الصيني<sup id="cite_ref-:0_26-1" class="reference"><a href="#cite_note-:0-26">[26]</a></sup></li>
<li>الورم اللمفاوي النخاعي الفأر (على سبيل المثال خلية NS0)<sup id="cite_ref-Zhu_1158–1170_25-1" class="reference"><a href="#cite_note-Zhu_1158–1170-25">[25]</a></sup></li>
<li>إنسان كامل
<ul><li>خلايا الكلى الجنينية البشرية<sup id="cite_ref-:0_26-2" class="reference"><a href="#cite_note-:0-26">[26]</a></sup></li>
<li>خلايا الشبكية الجنينية البشرية<sup id="cite_ref-:0_26-3" class="reference"><a href="#cite_note-:0-26">[26]</a></sup></li>
<li>خلايا السلى البشرية</li></ul></li></ul>
<h3><span id=".D8.A3.D9.86.D8.B8.D9.85.D8.A9_.D8.AE.D8.A7.D9.84.D9.8A.D8.A9_.D9.85.D9.86_.D8.A7.D9.84.D8.AE.D9.84.D8.A7.D9.8A.D8.A7"></span><span class="mw-headline" id="أنظمة_خالية_من_الخلايا">أنظمة خالية من الخلايا</span><span class="mw-editsection"><span class="mw-editsection-bracket">[</span><a href="/w/index.php?title=%D8%A5%D9%86%D8%AA%D8%A7%D8%AC_%D8%A7%D9%84%D8%A8%D8%B1%D9%88%D8%AA%D9%8A%D9%86&action=edit&section=14" title="عدل القسم: أنظمة خالية من الخلايا">عدل المصدر</a><span class="mw-editsection-bracket">]</span></span></h3>
<p>يتم إنتاج البروتينات الخالية من الخلايا في المختبر باستخدام بوليميراز الحمض النووي الريبي المنقى، والريبوسومات، و<a href="/wiki/%D8%AD%D9%85%D8%B6_%D9%86%D9%88%D9%88%D9%8A_%D8%B1%D9%8A%D8%A8%D9%88%D8%B2%D9%8A_%D9%86%D8%A7%D9%82%D9%84" title="حمض نووي ريبوزي ناقل">الحمض النووي الريبوزي الناقل</a>، والنيوكليوتيدات الريبية. يمكن إنتاج هذه الكواشف عن طريق الاستخراج من الخلايا أو من نظام التعبير القائم على الخلية. نظرًا لانخفاض مستويات التعبير والتكلفة العالية للأنظمة الخالية من الخلايا، تُستخدم الأنظمة القائمة على الخلايا على نطاق واسع.<sup id="cite_ref-28" class="reference"><a href="#cite_note-28">[28]</a></sup>
</p>
<h2><span id=".D8.A3.D9.86.D8.B8.D8.B1_.D8.A3.D9.8A.D8.B6.D8.A7.D9.8B"></span><span class="mw-headline" id="أنظر_أيضاً">أنظر أيضاً</span><span class="mw-editsection"><span class="mw-editsection-bracket">[</span><a href="/w/index.php?title=%D8%A5%D9%86%D8%AA%D8%A7%D8%AC_%D8%A7%D9%84%D8%A8%D8%B1%D9%88%D8%AA%D9%8A%D9%86&action=edit&section=15" title="عدل القسم: أنظر أيضاً">عدل المصدر</a><span class="mw-editsection-bracket">]</span></span></h2>
<ul><li><a href="/wiki/%D8%AA%D8%B9%D8%A8%D9%8A%D8%B1_%D8%AC%D9%8A%D9%86%D9%8A" title="تعبير جيني">تعبير جيني</a></li>
<li><a href="/wiki/%D8%A8%D8%B1%D9%88%D8%AA%D9%8A%D9%86_%D9%88%D8%AD%D9%8A%D8%AF_%D8%A7%D9%84%D8%AE%D9%84%D9%8A%D8%A9" title="بروتين وحيد الخلية">بروتين وحيد الخلية</a></li>
<li><a href="/wiki/%D8%AA%D9%86%D9%82%D9%8A%D8%A9_%D8%A7%D9%84%D8%A8%D8%B1%D9%88%D8%AA%D9%8A%D9%86" title="تنقية البروتين">تنقية البروتين</a></li>
<li><a href="/wiki/%D8%AA%D8%AE%D9%85%D8%B1_(%D9%83%D9%8A%D9%85%D9%8A%D8%A7%D8%A1_%D8%AD%D9%8A%D9%88%D9%8A%D8%A9)" title="تخمر (كيمياء حيوية)">تخمر (كيمياء حيوية)</a></li>
<li><a href="/wiki/%D8%A8%D8%B1%D9%88%D8%AA%D9%8A%D9%86%D8%A7%D8%AA_%D8%A7%D9%84%D8%AE%D9%84%D9%8A%D8%A9_%D8%A7%D9%84%D9%85%D8%B6%D9%8A%D9%81" title="بروتينات الخلية المضيف">بروتينات الخلية المضيف</a></li></ul>
<h2><span id=".D9.85.D8.B1.D8.A7.D8.AC.D8.B9"></span><span class="mw-headline" id="مراجع">مراجع</span><span class="mw-editsection"><span class="mw-editsection-bracket">[</span><a href="/w/index.php?title=%D8%A5%D9%86%D8%AA%D8%A7%D8%AC_%D8%A7%D9%84%D8%A8%D8%B1%D9%88%D8%AA%D9%8A%D9%86&action=edit&section=16" title="عدل القسم: مراجع">عدل المصدر</a><span class="mw-editsection-bracket">]</span></span></h2>
<ol class="references">
<li id="cite_note-1"><span class="mw-cite-backlink"><b><a href="#cite_ref-1">^</a></b></span> <span class="reference-text"><cite id="CITEREFGräslundNordlundWeigeltHallberg2008" class="citation journal">Gräslund S, Nordlund P, Weigelt J, Hallberg BM, Bray J, Gileadi O, et al. (February 2008). <a rel="nofollow" class="external text" href="//www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC3178102">"Protein production and purification"</a>. <i>Nature Methods</i>. <b>5</b> (2): 135–46. <a href="/wiki/%D9%85%D8%B9%D8%B1%D9%81_%D8%A7%D9%84%D8%BA%D8%B1%D8%B6_%D8%A7%D9%84%D8%B1%D9%82%D9%85%D9%8A" title="معرف الغرض الرقمي">doi</a>:<a rel="nofollow" class="external text" href="https://doi.org/10.1038%2Fnmeth.f.202">10.1038/nmeth.f.202</a>. <a href="/wiki/%D8%A8%D8%A8%D9%85%D8%AF_%D8%B3%D9%86%D8%AA%D8%B1%D8%A7%D9%84" title="ببمد سنترال">PMC</a> <span class="cs1-lock-free" title="يمكن الوصول إليها بحرية"><a rel="nofollow" class="external text" href="//www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC3178102">3178102</a></span>. <a href="/wiki/%D8%A8%D8%A8%D9%85%D8%AF" title="ببمد">PMID</a> <a rel="nofollow" class="external text" href="//pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/18235434">18235434</a>.</cite><span title="ctx_ver=Z39.88-2004&rft_val_fmt=info%3Aofi%2Ffmt%3Akev%3Amtx%3Ajournal&rft.genre=article&rft.jtitle=Nature+Methods&rft.atitle=Protein+production+and+purification&rft.volume=5&rft.issue=2&rft.pages=135-46&rft.date=2008-02&rft_id=%2F%2Fwww.ncbi.nlm.nih.gov%2Fpmc%2Farticles%2FPMC3178102&rft_id=info%3Apmid%2F18235434&rft_id=info%3Adoi%2F10.1038%2Fnmeth.f.202&rft.aulast=Gr%C3%A4slund&rft.aufirst=S&rft.au=Nordlund%2C+P&rft.au=Weigelt%2C+J&rft.au=Hallberg%2C+BM&rft.au=Bray%2C+J&rft.au=Gileadi%2C+O&rft.au=Knapp%2C+S&rft.au=Oppermann%2C+U&rft.au=Arrowsmith%2C+C&rft.au=Hui%2C+R&rft.au=Ming%2C+J&rft.au=dhe-Paganon%2C+S&rft.au=Park%2C+HW&rft.au=Savchenko%2C+A&rft.au=Yee%2C+A&rft.au=Edwards%2C+A&rft.au=Vincentelli%2C+R&rft.au=Cambillau%2C+C&rft.au=Kim%2C+R&rft.au=Kim%2C+SH&rft.au=Rao%2C+Z&rft.au=Shi%2C+Y&rft.au=Terwilliger%2C+TC&rft.au=Kim%2C+CY&rft.au=Hung%2C+LW&rft.au=Waldo%2C+GS&rft.au=Peleg%2C+Y&rft.au=Albeck%2C+S&rft.au=Unger%2C+T&rft.au=Dym%2C+O&rft.au=Prilusky%2C+J&rft.au=Sussman%2C+JL&rft.au=Stevens%2C+RC&rft.au=Lesley%2C+SA&rft.au=Wilson%2C+IA&rft.au=Joachimiak%2C+A&rft.au=Collart%2C+F&rft.au=Dementieva%2C+I&rft.au=Donnelly%2C+MI&rft.au=Eschenfeldt%2C+WH&rft.au=Kim%2C+Y&rft.au=Stols%2C+L&rft.au=Wu%2C+R&rft.au=Zhou%2C+M&rft.au=Burley%2C+SK&rft.au=Emtage%2C+JS&rft.au=Sauder%2C+JM&rft.au=Thompson%2C+D&rft.au=Bain%2C+K&rft.au=Luz%2C+J&rft.au=Gheyi%2C+T&rft.au=Zhang%2C+F&rft.au=Atwell%2C+S&rft.au=Almo%2C+SC&rft.au=Bonanno%2C+JB&rft.au=Fiser%2C+A&rft.au=Swaminathan%2C+S&rft.au=Studier%2C+FW&rft.au=Chance%2C+MR&rft.au=Sali%2C+A&rft.au=Acton%2C+TB&rft.au=Xiao%2C+R&rft.au=Zhao%2C+L&rft.au=Ma%2C+LC&rft.au=Hunt%2C+JF&rft.au=Tong%2C+L&rft.au=Cunningham%2C+K&rft.au=Inouye%2C+M&rft.au=Anderson%2C+S&rft.au=Janjua%2C+H&rft.au=Shastry%2C+R&rft.au=Ho%2C+CK&rft.au=Wang%2C+D&rft.au=Wang%2C+H&rft.au=Jiang%2C+M&rft.au=Montelione%2C+GT&rft.au=Stuart%2C+DI&rft.au=Owens%2C+RJ&rft.au=Daenke%2C+S&rft.au=Sch%C3%BCtz%2C+A&rft.au=Heinemann%2C+U&rft.au=Yokoyama%2C+S&rft.au=B%C3%BCssow%2C+K&rft.au=Gunsalus%2C+KC&rft_id=%2F%2Fwww.ncbi.nlm.nih.gov%2Fpmc%2Farticles%2FPMC3178102&rfr_id=info%3Asid%2Far.wikipedia.org%3A%D8%A5%D9%86%D8%AA%D8%A7%D8%AC+%D8%A7%D9%84%D8%A8%D8%B1%D9%88%D8%AA%D9%8A%D9%86" class="Z3988"></span> <span class="cs1-hidden-error error citation-comment">الوسيط <code class="cs1-code">|CitationClass=</code> تم تجاهله (<a href="/wiki/%D9%85%D8%B3%D8%A7%D8%B9%D8%AF%D8%A9:CS1_errors#parameter_ignored" title="مساعدة:CS1 errors">مساعدة</a>)</span><style data-mw-deduplicate="TemplateStyles:r47703133">.mw-parser-output cite.citation{font-style:inherit}.mw-parser-output .citation q{quotes:"\"""\"""'""'"}.mw-parser-output .id-lock-free a,.mw-parser-output .citation .cs1-lock-free a{background-image:url("//upload.wikimedia.org/wikipedia/commons/thumb/6/65/Lock-green.svg/9px-Lock-green.svg.png");background-image:linear-gradient(transparent,transparent),url("//upload.wikimedia.org/wikipedia/commons/6/65/Lock-green.svg");background-repeat:no-repeat;background-size:9px;background-position:right .1em center}.mw-parser-output .id-lock-limited a,.mw-parser-output .id-lock-registration a,.mw-parser-output .citation .cs1-lock-limited a,.mw-parser-output .citation .cs1-lock-registration a{background-image:url("//upload.wikimedia.org/wikipedia/commons/thumb/d/d6/Lock-gray-alt-2.svg/9px-Lock-gray-alt-2.svg.png");background-image:linear-gradient(transparent,transparent),url("//upload.wikimedia.org/wikipedia/commons/d/d6/Lock-gray-alt-2.svg");background-repeat:no-repeat;background-size:9px;background-position:right .1em center}.mw-parser-output .id-lock-subscription a,.mw-parser-output .citation .cs1-lock-subscription a{background-image:url("//upload.wikimedia.org/wikipedia/commons/thumb/a/aa/Lock-red-alt-2.svg/9px-Lock-red-alt-2.svg.png");background-image:linear-gradient(transparent,transparent),url("//upload.wikimedia.org/wikipedia/commons/a/aa/Lock-red-alt-2.svg");background-repeat:no-repeat;background-size:9px;background-position:right .1em center}.mw-parser-output .cs1-subscription,.mw-parser-output .cs1-registration{color:#555}.mw-parser-output .cs1-subscription span,.mw-parser-output .cs1-registration span{border-bottom:1px dotted;cursor:help}.mw-parser-output .cs1-ws-icon a{background-image:url("//upload.wikimedia.org/wikipedia/commons/thumb/4/4c/Wikisource-logo.svg/12px-Wikisource-logo.svg.png");background-image:linear-gradient(transparent,transparent),url("//upload.wikimedia.org/wikipedia/commons/4/4c/Wikisource-logo.svg");background-repeat:no-repeat;background-size:12px;background-position:right .1em center}.mw-parser-output code.cs1-code{color:inherit;background:inherit;border:inherit;padding:inherit}.mw-parser-output .cs1-hidden-error{display:none;font-size:100%}.mw-parser-output .cs1-visible-error{font-size:100%}.mw-parser-output .cs1-maint{display:none;color:#33aa33;margin-left:0.3em}.mw-parser-output .cs1-subscription,.mw-parser-output .cs1-registration,.mw-parser-output .cs1-format{font-size:95%}.mw-parser-output .cs1-kern-left,.mw-parser-output .cs1-kern-wl-left{padding-left:0.2em}.mw-parser-output .cs1-kern-right,.mw-parser-output .cs1-kern-wl-right{padding-right:0.2em}.mw-parser-output .citation .mw-selflink{font-weight:inherit}</style></span>
</li>
<li id="cite_note-pmid10508629-2"><span class="mw-cite-backlink"><b><a href="#cite_ref-pmid10508629_2-0">^</a></b></span> <span class="reference-text"><cite id="CITEREFBaneyx1999" class="citation journal">Baneyx F (October 1999). "Recombinant protein expression in Escherichia coli". <i>Current Opinion in Biotechnology</i>. <b>10</b> (5): 411–21. <a href="/wiki/%D9%85%D8%B9%D8%B1%D9%81_%D8%A7%D9%84%D8%BA%D8%B1%D8%B6_%D8%A7%D9%84%D8%B1%D9%82%D9%85%D9%8A" title="معرف الغرض الرقمي">doi</a>:<a rel="nofollow" class="external text" href="https://doi.org/10.1016%2Fs0958-1669%2899%2900003-8">10.1016/s0958-1669(99)00003-8</a>. <a href="/wiki/%D8%A8%D8%A8%D9%85%D8%AF" title="ببمد">PMID</a> <a rel="nofollow" class="external text" href="//pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/10508629">10508629</a>.</cite><span title="ctx_ver=Z39.88-2004&rft_val_fmt=info%3Aofi%2Ffmt%3Akev%3Amtx%3Ajournal&rft.genre=article&rft.jtitle=Current+Opinion+in+Biotechnology&rft.atitle=Recombinant+protein+expression+in+Escherichia+coli&rft.volume=10&rft.issue=5&rft.pages=411-21&rft.date=1999-10&rft_id=info%3Adoi%2F10.1016%2Fs0958-1669%2899%2900003-8&rft_id=info%3Apmid%2F10508629&rft.aulast=Baneyx&rft.aufirst=F&rfr_id=info%3Asid%2Far.wikipedia.org%3A%D8%A5%D9%86%D8%AA%D8%A7%D8%AC+%D8%A7%D9%84%D8%A8%D8%B1%D9%88%D8%AA%D9%8A%D9%86" class="Z3988"></span> <span class="cs1-hidden-error error citation-comment">الوسيط <code class="cs1-code">|CitationClass=</code> تم تجاهله (<a href="/wiki/%D9%85%D8%B3%D8%A7%D8%B9%D8%AF%D8%A9:CS1_errors#parameter_ignored" title="مساعدة:CS1 errors">مساعدة</a>)</span><link rel="mw-deduplicated-inline-style" href="mw-data:TemplateStyles:r47703133"/></span>
</li>
<li id="cite_note-pmid11098467-3"><span class="mw-cite-backlink"><b><a href="#cite_ref-pmid11098467_3-0">^</a></b></span> <span class="reference-text"><cite id="CITEREFCreggCereghinoShiHiggins2000" class="citation journal">Cregg JM, Cereghino JL, Shi J, Higgins DR (September 2000). "Recombinant protein expression in Pichia pastoris". <i>Molecular Biotechnology</i>. <b>16</b> (1): 23–52. <a href="/wiki/%D9%85%D8%B9%D8%B1%D9%81_%D8%A7%D9%84%D8%BA%D8%B1%D8%B6_%D8%A7%D9%84%D8%B1%D9%82%D9%85%D9%8A" title="معرف الغرض الرقمي">doi</a>:<a rel="nofollow" class="external text" href="https://doi.org/10.1385%2FMB%3A16%3A1%3A23">10.1385/MB:16:1:23</a>. <a href="/wiki/%D8%A8%D8%A8%D9%85%D8%AF" title="ببمد">PMID</a> <a rel="nofollow" class="external text" href="//pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/11098467">11098467</a>. <a href="/wiki/S2CID_(identifier)" class="mw-redirect" title="S2CID (identifier)">S2CID</a> <a rel="nofollow" class="external text" href="https://api.semanticscholar.org/CorpusID:35874864">35874864</a>.</cite><span title="ctx_ver=Z39.88-2004&rft_val_fmt=info%3Aofi%2Ffmt%3Akev%3Amtx%3Ajournal&rft.genre=article&rft.jtitle=Molecular+Biotechnology&rft.atitle=Recombinant+protein+expression+in+Pichia+pastoris&rft.volume=16&rft.issue=1&rft.pages=23-52&rft.date=2000-09&rft_id=https%3A%2F%2Fapi.semanticscholar.org%2FCorpusID%3A35874864&rft_id=info%3Apmid%2F11098467&rft_id=info%3Adoi%2F10.1385%2FMB%3A16%3A1%3A23&rft.aulast=Cregg&rft.aufirst=JM&rft.au=Cereghino%2C+JL&rft.au=Shi%2C+J&rft.au=Higgins%2C+DR&rfr_id=info%3Asid%2Far.wikipedia.org%3A%D8%A5%D9%86%D8%AA%D8%A7%D8%AC+%D8%A7%D9%84%D8%A8%D8%B1%D9%88%D8%AA%D9%8A%D9%86" class="Z3988"></span> <span class="cs1-hidden-error error citation-comment">الوسيط <code class="cs1-code">|CitationClass=</code> تم تجاهله (<a href="/wiki/%D9%85%D8%B3%D8%A7%D8%B9%D8%AF%D8%A9:CS1_errors#parameter_ignored" title="مساعدة:CS1 errors">مساعدة</a>)</span><link rel="mw-deduplicated-inline-style" href="mw-data:TemplateStyles:r47703133"/></span>
</li>
<li id="cite_note-pmid21943899-4"><span class="mw-cite-backlink">↑ <a href="#cite_ref-pmid21943899_4-0"><sup><i><b>أ</b></i></sup></a> <a href="#cite_ref-pmid21943899_4-1"><sup><i><b>ب</b></i></sup></a></span> <span class="reference-text"><cite id="CITEREFMalysWishartOliverMcCarthy2011" class="citation book">Malys N, Wishart JA, Oliver SG, McCarthy JE (2011). "Protein production in Saccharomyces cerevisiae for systems biology studies". <i>Methods in Systems Biology</i>. <i>Methods in Enzymology</i>. <b>500</b>. صفحات 197–212. <a href="/wiki/%D9%85%D8%B9%D8%B1%D9%81_%D8%A7%D9%84%D8%BA%D8%B1%D8%B6_%D8%A7%D9%84%D8%B1%D9%82%D9%85%D9%8A" title="معرف الغرض الرقمي">doi</a>:<a rel="nofollow" class="external text" href="https://doi.org/10.1016%2FB978-0-12-385118-5.00011-6">10.1016/B978-0-12-385118-5.00011-6</a>. <a href="/wiki/%D8%A7%D9%84%D9%86%D8%B8%D8%A7%D9%85_%D8%A7%D9%84%D9%82%D9%8A%D8%A7%D8%B3%D9%8A_%D8%A7%D9%84%D8%AF%D9%88%D9%84%D9%8A_%D9%84%D8%AA%D8%B1%D9%82%D9%8A%D9%85_%D8%A7%D9%84%D9%83%D8%AA%D8%A8" title="النظام القياسي الدولي لترقيم الكتب">ISBN</a> <a href="/wiki/%D8%AE%D8%A7%D8%B5:%D9%85%D8%B5%D8%A7%D8%AF%D8%B1_%D9%83%D8%AA%D8%A7%D8%A8/9780123851185" title="خاص:مصادر كتاب/9780123851185"><bdi>9780123851185</bdi></a>. <a href="/wiki/%D8%A8%D8%A8%D9%85%D8%AF" title="ببمد">PMID</a> <a rel="nofollow" class="external text" href="//pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/21943899">21943899</a>.</cite><span title="ctx_ver=Z39.88-2004&rft_val_fmt=info%3Aofi%2Ffmt%3Akev%3Amtx%3Abook&rft.genre=bookitem&rft.atitle=Protein+production+in+Saccharomyces+cerevisiae+for+systems+biology+studies&rft.btitle=Methods+in+Systems+Biology&rft.pages=197-212&rft.date=2011&rft_id=info%3Apmid%2F21943899&rft_id=info%3Adoi%2F10.1016%2FB978-0-12-385118-5.00011-6&rft.isbn=9780123851185&rft.aulast=Malys&rft.aufirst=N&rft.au=Wishart%2C+JA&rft.au=Oliver%2C+SG&rft.au=McCarthy%2C+JE&rfr_id=info%3Asid%2Far.wikipedia.org%3A%D8%A5%D9%86%D8%AA%D8%A7%D8%AC+%D8%A7%D9%84%D8%A8%D8%B1%D9%88%D8%AA%D9%8A%D9%86" class="Z3988"></span> <span class="cs1-hidden-error error citation-comment">الوسيط <code class="cs1-code">|CitationClass=</code> تم تجاهله (<a href="/wiki/%D9%85%D8%B3%D8%A7%D8%B9%D8%AF%D8%A9:CS1_errors#parameter_ignored" title="مساعدة:CS1 errors">مساعدة</a>)</span><link rel="mw-deduplicated-inline-style" href="mw-data:TemplateStyles:r47703133"/></span>
</li>
<li id="cite_note-pmid15877075-5"><span class="mw-cite-backlink"><b><a href="#cite_ref-pmid15877075_5-0">^</a></b></span> <span class="reference-text"><cite id="CITEREFKostCondreayJarvis2005" class="citation journal">Kost TA, Condreay JP, Jarvis DL (May 2005). <a rel="nofollow" class="external text" href="//www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC3610534">"Baculovirus as versatile vectors for protein expression in insect and mammalian cells"</a>. <i>Nature Biotechnology</i>. <b>23</b> (5): 567–75. <a href="/wiki/%D9%85%D8%B9%D8%B1%D9%81_%D8%A7%D9%84%D8%BA%D8%B1%D8%B6_%D8%A7%D9%84%D8%B1%D9%82%D9%85%D9%8A" title="معرف الغرض الرقمي">doi</a>:<a rel="nofollow" class="external text" href="https://doi.org/10.1038%2Fnbt1095">10.1038/nbt1095</a>. <a href="/wiki/%D8%A8%D8%A8%D9%85%D8%AF_%D8%B3%D9%86%D8%AA%D8%B1%D8%A7%D9%84" title="ببمد سنترال">PMC</a> <span class="cs1-lock-free" title="يمكن الوصول إليها بحرية"><a rel="nofollow" class="external text" href="//www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC3610534">3610534</a></span>. <a href="/wiki/%D8%A8%D8%A8%D9%85%D8%AF" title="ببمد">PMID</a> <a rel="nofollow" class="external text" href="//pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/15877075">15877075</a>.</cite><span title="ctx_ver=Z39.88-2004&rft_val_fmt=info%3Aofi%2Ffmt%3Akev%3Amtx%3Ajournal&rft.genre=article&rft.jtitle=Nature+Biotechnology&rft.atitle=Baculovirus+as+versatile+vectors+for+protein+expression+in+insect+and+mammalian+cells&rft.volume=23&rft.issue=5&rft.pages=567-75&rft.date=2005-05&rft_id=%2F%2Fwww.ncbi.nlm.nih.gov%2Fpmc%2Farticles%2FPMC3610534&rft_id=info%3Apmid%2F15877075&rft_id=info%3Adoi%2F10.1038%2Fnbt1095&rft.aulast=Kost&rft.aufirst=TA&rft.au=Condreay%2C+JP&rft.au=Jarvis%2C+DL&rft_id=%2F%2Fwww.ncbi.nlm.nih.gov%2Fpmc%2Farticles%2FPMC3610534&rfr_id=info%3Asid%2Far.wikipedia.org%3A%D8%A5%D9%86%D8%AA%D8%A7%D8%AC+%D8%A7%D9%84%D8%A8%D8%B1%D9%88%D8%AA%D9%8A%D9%86" class="Z3988"></span> <span class="cs1-hidden-error error citation-comment">الوسيط <code class="cs1-code">|CitationClass=</code> تم تجاهله (<a href="/wiki/%D9%85%D8%B3%D8%A7%D8%B9%D8%AF%D8%A9:CS1_errors#parameter_ignored" title="مساعدة:CS1 errors">مساعدة</a>)</span><link rel="mw-deduplicated-inline-style" href="mw-data:TemplateStyles:r47703133"/></span>
</li>
<li id="cite_note-pmid15766864-6"><span class="mw-cite-backlink"><b><a href="#cite_ref-pmid15766864_6-0">^</a></b></span> <span class="reference-text"><cite id="CITEREFRosserXiaHartsellMcCaman2005" class="citation journal">Rosser MP, Xia W, Hartsell S, McCaman M, Zhu Y, Wang S, Harvey S, Bringmann P, Cobb RR (April 2005). "Transient transfection of CHO-K1-S using serum-free medium in suspension: a rapid mammalian protein expression system". <i>Protein Expression and Purification</i>. <b>40</b> (2): 237–43. <a href="/wiki/%D9%85%D8%B9%D8%B1%D9%81_%D8%A7%D9%84%D8%BA%D8%B1%D8%B6_%D8%A7%D9%84%D8%B1%D9%82%D9%85%D9%8A" title="معرف الغرض الرقمي">doi</a>:<a rel="nofollow" class="external text" href="https://doi.org/10.1016%2Fj.pep.2004.07.015">10.1016/j.pep.2004.07.015</a>. <a href="/wiki/%D8%A8%D8%A8%D9%85%D8%AF" title="ببمد">PMID</a> <a rel="nofollow" class="external text" href="//pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/15766864">15766864</a>.</cite><span title="ctx_ver=Z39.88-2004&rft_val_fmt=info%3Aofi%2Ffmt%3Akev%3Amtx%3Ajournal&rft.genre=article&rft.jtitle=Protein+Expression+and+Purification&rft.atitle=Transient+transfection+of+CHO-K1-S+using+serum-free+medium+in+suspension%3A+a+rapid+mammalian+protein+expression+system&rft.volume=40&rft.issue=2&rft.pages=237-43&rft.date=2005-04&rft_id=info%3Adoi%2F10.1016%2Fj.pep.2004.07.015&rft_id=info%3Apmid%2F15766864&rft.aulast=Rosser&rft.aufirst=MP&rft.au=Xia%2C+W&rft.au=Hartsell%2C+S&rft.au=McCaman%2C+M&rft.au=Zhu%2C+Y&rft.au=Wang%2C+S&rft.au=Harvey%2C+S&rft.au=Bringmann%2C+P&rft.au=Cobb%2C+RR&rfr_id=info%3Asid%2Far.wikipedia.org%3A%D8%A5%D9%86%D8%AA%D8%A7%D8%AC+%D8%A7%D9%84%D8%A8%D8%B1%D9%88%D8%AA%D9%8A%D9%86" class="Z3988"></span> <span class="cs1-hidden-error error citation-comment">الوسيط <code class="cs1-code">|CitationClass=</code> تم تجاهله (<a href="/wiki/%D9%85%D8%B3%D8%A7%D8%B9%D8%AF%D8%A9:CS1_errors#parameter_ignored" title="مساعدة:CS1 errors">مساعدة</a>)</span><link rel="mw-deduplicated-inline-style" href="mw-data:TemplateStyles:r47703133"/></span>
</li>
<li id="cite_note-pmid18541133-7"><span class="mw-cite-backlink"><b><a href="#cite_ref-pmid18541133_7-0">^</a></b></span> <span class="reference-text"><cite id="CITEREFLacknerGentaKoppensteinerHerbacek2008" class="citation journal">Lackner A, Genta K, Koppensteiner H, Herbacek I, Holzmann K, Spiegl-Kreinecker S, Berger W, Grusch M (September 2008). "A bicistronic baculovirus vector for transient and stable protein expression in mammalian cells". <i>Analytical Biochemistry</i>. <b>380</b> (1): 146–8. <a href="/wiki/%D9%85%D8%B9%D8%B1%D9%81_%D8%A7%D9%84%D8%BA%D8%B1%D8%B6_%D8%A7%D9%84%D8%B1%D9%82%D9%85%D9%8A" title="معرف الغرض الرقمي">doi</a>:<a rel="nofollow" class="external text" href="https://doi.org/10.1016%2Fj.ab.2008.05.020">10.1016/j.ab.2008.05.020</a>. <a href="/wiki/%D8%A8%D8%A8%D9%85%D8%AF" title="ببمد">PMID</a> <a rel="nofollow" class="external text" href="//pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/18541133">18541133</a>.</cite><span title="ctx_ver=Z39.88-2004&rft_val_fmt=info%3Aofi%2Ffmt%3Akev%3Amtx%3Ajournal&rft.genre=article&rft.jtitle=Analytical+Biochemistry&rft.atitle=A+bicistronic+baculovirus+vector+for+transient+and+stable+protein+expression+in+mammalian+cells&rft.volume=380&rft.issue=1&rft.pages=146-8&rft.date=2008-09&rft_id=info%3Adoi%2F10.1016%2Fj.ab.2008.05.020&rft_id=info%3Apmid%2F18541133&rft.aulast=Lackner&rft.aufirst=A&rft.au=Genta%2C+K&rft.au=Koppensteiner%2C+H&rft.au=Herbacek%2C+I&rft.au=Holzmann%2C+K&rft.au=Spiegl-Kreinecker%2C+S&rft.au=Berger%2C+W&rft.au=Grusch%2C+M&rfr_id=info%3Asid%2Far.wikipedia.org%3A%D8%A5%D9%86%D8%AA%D8%A7%D8%AC+%D8%A7%D9%84%D8%A8%D8%B1%D9%88%D8%AA%D9%8A%D9%86" class="Z3988"></span> <span class="cs1-hidden-error error citation-comment">الوسيط <code class="cs1-code">|CitationClass=</code> تم تجاهله (<a href="/wiki/%D9%85%D8%B3%D8%A7%D8%B9%D8%AF%D8%A9:CS1_errors#parameter_ignored" title="مساعدة:CS1 errors">مساعدة</a>)</span><link rel="mw-deduplicated-inline-style" href="mw-data:TemplateStyles:r47703133"/></span>
</li>
<li id="cite_note-Visser_214–223-8"><span class="mw-cite-backlink">↑ <a href="#cite_ref-Visser_214–223_8-0"><sup><i><b>أ</b></i></sup></a> <a href="#cite_ref-Visser_214–223_8-1"><sup><i><b>ب</b></i></sup></a></span> <span class="reference-text"><cite id="CITEREFVisserJoostenPuntGusakov2011" class="citation journal">Visser, Hans; Joosten, Vivi; Punt, Peter J.; Gusakov, Alexander V.; Olson, Phil T.; Joosten, Rob; et al. (June 2011). "Development of a mature fungal technology and production platform for industrial enzymes based on a Myceliophthora thermophila isolate, previously known as Chrysosporium lucknowense C1". <i>Industrial Biotechnology</i>. <b>7</b> (3): 214–223. <a href="/wiki/%D9%85%D8%B9%D8%B1%D9%81_%D8%A7%D9%84%D8%BA%D8%B1%D8%B6_%D8%A7%D9%84%D8%B1%D9%82%D9%85%D9%8A" title="معرف الغرض الرقمي">doi</a>:<a rel="nofollow" class="external text" href="https://doi.org/10.1089%2Find.2011.7.214">10.1089/ind.2011.7.214</a>.</cite><span title="ctx_ver=Z39.88-2004&rft_val_fmt=info%3Aofi%2Ffmt%3Akev%3Amtx%3Ajournal&rft.genre=article&rft.jtitle=Industrial+Biotechnology&rft.atitle=Development+of+a+mature+fungal+technology+and+production+platform+for+industrial+enzymes+based+on+a+Myceliophthora+thermophila+isolate%2C+previously+known+as+Chrysosporium+lucknowense+C1&rft.volume=7&rft.issue=3&rft.pages=214-223&rft.date=2011-06&rft_id=info%3Adoi%2F10.1089%2Find.2011.7.214&rft.aulast=Visser&rft.aufirst=Hans&rft.au=Joosten%2C+Vivi&rft.au=Punt%2C+Peter+J.&rft.au=Gusakov%2C+Alexander+V.&rft.au=Olson%2C+Phil+T.&rft.au=Joosten%2C+Rob&rft.au=Bartels%2C+Jeffrey&rft.au=Visser%2C+Jaap&rft.au=Sinitsyn%2C+Arkady+P.&rfr_id=info%3Asid%2Far.wikipedia.org%3A%D8%A5%D9%86%D8%AA%D8%A7%D8%AC+%D8%A7%D9%84%D8%A8%D8%B1%D9%88%D8%AA%D9%8A%D9%86" class="Z3988"></span> <span class="cs1-hidden-error error citation-comment">الوسيط <code class="cs1-code">|CitationClass=</code> تم تجاهله (<a href="/wiki/%D9%85%D8%B3%D8%A7%D8%B9%D8%AF%D8%A9:CS1_errors#parameter_ignored" title="مساعدة:CS1 errors">مساعدة</a>)</span><link rel="mw-deduplicated-inline-style" href="mw-data:TemplateStyles:r47703133"/></span>
</li>
<li id="cite_note-9"><span class="mw-cite-backlink"><b><a href="#cite_ref-9">^</a></b></span> <span class="reference-text"><cite id="CITEREFWangHunterMozier2009" class="citation journal">Wang, Xing; Hunter, Alan K.; Mozier, Ned M. (2009-06-15). "Host cell proteins in biologics development: Identification, quantitation and risk assessment". <i>Biotechnology and Bioengineering</i> (باللغة الإنجليزية). <b>103</b> (3): 446–458. <a href="/wiki/%D9%85%D8%B9%D8%B1%D9%81_%D8%A7%D9%84%D8%BA%D8%B1%D8%B6_%D8%A7%D9%84%D8%B1%D9%82%D9%85%D9%8A" title="معرف الغرض الرقمي">doi</a>:<span class="cs1-lock-free" title="يمكن الوصول إليها بحرية"><a rel="nofollow" class="external text" href="https://doi.org/10.1002%2Fbit.22304">10.1002/bit.22304</a></span>. <a href="/wiki/%D8%B1%D9%82%D9%85_%D8%A7%D9%84%D8%AF%D9%88%D8%B1%D9%8A%D8%A7%D8%AA_%D8%A7%D9%84%D9%85%D8%B9%D9%8A%D8%A7%D8%B1%D9%8A_%D8%A7%D9%84%D8%AF%D9%88%D9%84%D9%8A" class="mw-redirect" title="رقم الدوريات المعياري الدولي">ISSN</a> <a rel="nofollow" class="external text" href="//www.worldcat.org/issn/0006-3592">0006-3592</a>. <a href="/wiki/%D8%A8%D8%A8%D9%85%D8%AF" title="ببمد">PMID</a> <a rel="nofollow" class="external text" href="//pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/19388135">19388135</a>. <a href="/wiki/S2CID_(identifier)" class="mw-redirect" title="S2CID (identifier)">S2CID</a> <a rel="nofollow" class="external text" href="https://api.semanticscholar.org/CorpusID:22707536">22707536</a>.</cite><span title="ctx_ver=Z39.88-2004&rft_val_fmt=info%3Aofi%2Ffmt%3Akev%3Amtx%3Ajournal&rft.genre=article&rft.jtitle=Biotechnology+and+Bioengineering&rft.atitle=Host+cell+proteins+in+biologics+development%3A+Identification%2C+quantitation+and+risk+assessment&rft.volume=103&rft.issue=3&rft.pages=446-458&rft.date=2009-06-15&rft.issn=0006-3592&rft_id=https%3A%2F%2Fapi.semanticscholar.org%2FCorpusID%3A22707536&rft_id=info%3Apmid%2F19388135&rft_id=info%3Adoi%2F10.1002%2Fbit.22304&rft.aulast=Wang&rft.aufirst=Xing&rft.au=Hunter%2C+Alan+K.&rft.au=Mozier%2C+Ned+M.&rfr_id=info%3Asid%2Far.wikipedia.org%3A%D8%A5%D9%86%D8%AA%D8%A7%D8%AC+%D8%A7%D9%84%D8%A8%D8%B1%D9%88%D8%AA%D9%8A%D9%86" class="Z3988"></span> <span class="cs1-hidden-error error citation-comment">الوسيط <code class="cs1-code">|CitationClass=</code> تم تجاهله (<a href="/wiki/%D9%85%D8%B3%D8%A7%D8%B9%D8%AF%D8%A9:CS1_errors#parameter_ignored" title="مساعدة:CS1 errors">مساعدة</a>)</span><link rel="mw-deduplicated-inline-style" href="mw-data:TemplateStyles:r47703133"/></span>
</li>
<li id="cite_note-urlDefinition:_expression_system_from_Online_Medical_Dictionary-10"><span class="mw-cite-backlink"><b><a href="#cite_ref-urlDefinition:_expression_system_from_Online_Medical_Dictionary_10-0">^</a></b></span> <span class="reference-text"><cite class="citation web"><a rel="nofollow" class="external text" href="http://cancerweb.ncl.ac.uk/cgi-bin/omd?expression+system">"Definition: expression system"</a>. <i>Online Medical Dictionary</i>. Centre for Cancer Education, University of Newcastle upon Tyne: Cancerweb. 1997-11-13<span class="reference-accessdate">. اطلع عليه بتاريخ 10 يونيو 2008</span>.</cite><span title="ctx_ver=Z39.88-2004&rft_val_fmt=info%3Aofi%2Ffmt%3Akev%3Amtx%3Ajournal&rft.genre=unknown&rft.jtitle=Online+Medical+Dictionary&rft.atitle=Definition%3A+expression+system&rft.date=1997-11-13&rft_id=http%3A%2F%2Fcancerweb.ncl.ac.uk%2Fcgi-bin%2Fomd%3Fexpression%2Bsystem&rfr_id=info%3Asid%2Far.wikipedia.org%3A%D8%A5%D9%86%D8%AA%D8%A7%D8%AC+%D8%A7%D9%84%D8%A8%D8%B1%D9%88%D8%AA%D9%8A%D9%86" class="Z3988"></span> <span class="cs1-hidden-error error citation-comment">الوسيط <code class="cs1-code">|CitationClass=</code> تم تجاهله (<a href="/wiki/%D9%85%D8%B3%D8%A7%D8%B9%D8%AF%D8%A9:CS1_errors#parameter_ignored" title="مساعدة:CS1 errors">مساعدة</a>)</span><link rel="mw-deduplicated-inline-style" href="mw-data:TemplateStyles:r47703133"/></span>
</li>
<li id="cite_note-urlExpression_system-11"><span class="mw-cite-backlink"><b><a href="#cite_ref-urlExpression_system_11-0">^</a></b></span> <span class="reference-text"><cite class="citation web"><a rel="nofollow" class="external text" href="http://www.biology-online.org/dictionary/Expression_system">"Expression system - definition"</a>. <i>Biology Online</i>. Biology-Online.org. 2005-10-03<span class="reference-accessdate">. اطلع عليه بتاريخ 10 يونيو 2008</span>.</cite><span title="ctx_ver=Z39.88-2004&rft_val_fmt=info%3Aofi%2Ffmt%3Akev%3Amtx%3Ajournal&rft.genre=unknown&rft.jtitle=Biology+Online&rft.atitle=Expression+system+-+definition&rft.date=2005-10-03&rft_id=http%3A%2F%2Fwww.biology-online.org%2Fdictionary%2FExpression_system&rfr_id=info%3Asid%2Far.wikipedia.org%3A%D8%A5%D9%86%D8%AA%D8%A7%D8%AC+%D8%A7%D9%84%D8%A8%D8%B1%D9%88%D8%AA%D9%8A%D9%86" class="Z3988"></span> <span class="cs1-hidden-error error citation-comment">الوسيط <code class="cs1-code">|CitationClass=</code> تم تجاهله (<a href="/wiki/%D9%85%D8%B3%D8%A7%D8%B9%D8%AF%D8%A9:CS1_errors#parameter_ignored" title="مساعدة:CS1 errors">مساعدة</a>)</span><link rel="mw-deduplicated-inline-style" href="mw-data:TemplateStyles:r47703133"/></span>
</li>
<li id="cite_note-Overexpression_-_Oxford-12"><span class="mw-cite-backlink"><b><a href="#cite_ref-Overexpression_-_Oxford_12-0">^</a></b></span> <span class="reference-text"><cite class="citation web"><a rel="nofollow" class="external text" href="https://en.oxforddictionaries.com/definition/overexpression">"overexpression"</a>. <i>Oxford Living Dictionary</i>. Oxford University Press. 2017<span class="reference-accessdate">. اطلع عليه بتاريخ 18 مايو 2017</span>. <q>The production of abnormally large amounts of a substance which is coded for by a particular gene or group of genes; the appearance in the phenotype to an abnormally high degree of a character or effect attributed to a particular gene.</q></cite><span title="ctx_ver=Z39.88-2004&rft_val_fmt=info%3Aofi%2Ffmt%3Akev%3Amtx%3Ajournal&rft.genre=unknown&rft.jtitle=Oxford+Living+Dictionary&rft.atitle=overexpression&rft.date=2017&rft_id=https%3A%2F%2Fen.oxforddictionaries.com%2Fdefinition%2Foverexpression&rfr_id=info%3Asid%2Far.wikipedia.org%3A%D8%A5%D9%86%D8%AA%D8%A7%D8%AC+%D8%A7%D9%84%D8%A8%D8%B1%D9%88%D8%AA%D9%8A%D9%86" class="Z3988"></span> <span class="cs1-hidden-error error citation-comment">الوسيط <code class="cs1-code">|CitationClass=</code> تم تجاهله (<a href="/wiki/%D9%85%D8%B3%D8%A7%D8%B9%D8%AF%D8%A9:CS1_errors#parameter_ignored" title="مساعدة:CS1 errors">مساعدة</a>)</span><link rel="mw-deduplicated-inline-style" href="mw-data:TemplateStyles:r47703133"/></span>
</li>
<li id="cite_note-13"><span class="mw-cite-backlink"><b><a href="#cite_ref-13">^</a></b></span> <span class="reference-text"><cite id="CITEREFJeongBarbeLeeVallenet2009" class="citation journal">Jeong, H; Barbe, V; Lee, CH; Vallenet, D; Yu, DS; Choi, SH; Couloux, A; Lee, SW; Yoon, SH; Cattolico, L; Hur, CG; Park, HS; Ségurens, B; Kim, SC; Oh, TK; Lenski, RE; Studier, FW; Daegelen, P; Kim, JF (11 December 2009). "Genome sequences of Escherichia coli B strains REL606 and BL21(DE3)". <i>Journal of Molecular Biology</i>. <b>394</b> (4): 644–52. <a href="/wiki/%D9%85%D8%B9%D8%B1%D9%81_%D8%A7%D9%84%D8%BA%D8%B1%D8%B6_%D8%A7%D9%84%D8%B1%D9%82%D9%85%D9%8A" title="معرف الغرض الرقمي">doi</a>:<a rel="nofollow" class="external text" href="https://doi.org/10.1016%2Fj.jmb.2009.09.052">10.1016/j.jmb.2009.09.052</a>. <a href="/wiki/%D8%A8%D8%A8%D9%85%D8%AF" title="ببمد">PMID</a> <a rel="nofollow" class="external text" href="//pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/19786035">19786035</a>.</cite><span title="ctx_ver=Z39.88-2004&rft_val_fmt=info%3Aofi%2Ffmt%3Akev%3Amtx%3Ajournal&rft.genre=article&rft.jtitle=Journal+of+Molecular+Biology&rft.atitle=Genome+sequences+of+Escherichia+coli+B+strains+REL606+and+BL21%28DE3%29.&rft.volume=394&rft.issue=4&rft.pages=644-52&rft.date=2009-12-11&rft_id=info%3Adoi%2F10.1016%2Fj.jmb.2009.09.052&rft_id=info%3Apmid%2F19786035&rft.aulast=Jeong&rft.aufirst=H&rft.au=Barbe%2C+V&rft.au=Lee%2C+CH&rft.au=Vallenet%2C+D&rft.au=Yu%2C+DS&rft.au=Choi%2C+SH&rft.au=Couloux%2C+A&rft.au=Lee%2C+SW&rft.au=Yoon%2C+SH&rft.au=Cattolico%2C+L&rft.au=Hur%2C+CG&rft.au=Park%2C+HS&rft.au=S%C3%A9gurens%2C+B&rft.au=Kim%2C+SC&rft.au=Oh%2C+TK&rft.au=Lenski%2C+RE&rft.au=Studier%2C+FW&rft.au=Daegelen%2C+P&rft.au=Kim%2C+JF&rfr_id=info%3Asid%2Far.wikipedia.org%3A%D8%A5%D9%86%D8%AA%D8%A7%D8%AC+%D8%A7%D9%84%D8%A8%D8%B1%D9%88%D8%AA%D9%8A%D9%86" class="Z3988"></span> <span class="cs1-hidden-error error citation-comment">الوسيط <code class="cs1-code">|CitationClass=</code> تم تجاهله (<a href="/wiki/%D9%85%D8%B3%D8%A7%D8%B9%D8%AF%D8%A9:CS1_errors#parameter_ignored" title="مساعدة:CS1 errors">مساعدة</a>)</span><link rel="mw-deduplicated-inline-style" href="mw-data:TemplateStyles:r47703133"/></span>
</li>
<li id="cite_note-14"><span class="mw-cite-backlink"><b><a href="#cite_ref-14">^</a></b></span> <span class="reference-text"><cite id="CITEREFJeongBarbeLeeVallenet2009" class="citation journal">Jeong, H; Barbe, V; Lee, CH; Vallenet, D; Yu, DS; Choi, SH; Couloux, A; Lee, SW; Yoon, SH; Cattolico, L; Hur, CG; Park, HS; Ségurens, B; Kim, SC; Oh, TK; Lenski, RE; Studier, FW; Daegelen, P; Kim, JF (11 December 2009). "Genome sequences of Escherichia coli B strains REL606 and BL21(DE3)". <i>Journal of Molecular Biology</i>. <b>394</b> (4): 644–52. <a href="/wiki/%D9%85%D8%B9%D8%B1%D9%81_%D8%A7%D9%84%D8%BA%D8%B1%D8%B6_%D8%A7%D9%84%D8%B1%D9%82%D9%85%D9%8A" title="معرف الغرض الرقمي">doi</a>:<a rel="nofollow" class="external text" href="https://doi.org/10.1016%2Fj.jmb.2009.09.052">10.1016/j.jmb.2009.09.052</a>. <a href="/wiki/%D8%A8%D8%A8%D9%85%D8%AF" title="ببمد">PMID</a> <a rel="nofollow" class="external text" href="//pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/19786035">19786035</a>.</cite><span title="ctx_ver=Z39.88-2004&rft_val_fmt=info%3Aofi%2Ffmt%3Akev%3Amtx%3Ajournal&rft.genre=article&rft.jtitle=Journal+of+Molecular+Biology&rft.atitle=Genome+sequences+of+Escherichia+coli+B+strains+REL606+and+BL21%28DE3%29.&rft.volume=394&rft.issue=4&rft.pages=644-52&rft.date=2009-12-11&rft_id=info%3Adoi%2F10.1016%2Fj.jmb.2009.09.052&rft_id=info%3Apmid%2F19786035&rft.aulast=Jeong&rft.aufirst=H&rft.au=Barbe%2C+V&rft.au=Lee%2C+CH&rft.au=Vallenet%2C+D&rft.au=Yu%2C+DS&rft.au=Choi%2C+SH&rft.au=Couloux%2C+A&rft.au=Lee%2C+SW&rft.au=Yoon%2C+SH&rft.au=Cattolico%2C+L&rft.au=Hur%2C+CG&rft.au=Park%2C+HS&rft.au=S%C3%A9gurens%2C+B&rft.au=Kim%2C+SC&rft.au=Oh%2C+TK&rft.au=Lenski%2C+RE&rft.au=Studier%2C+FW&rft.au=Daegelen%2C+P&rft.au=Kim%2C+JF&rfr_id=info%3Asid%2Far.wikipedia.org%3A%D8%A5%D9%86%D8%AA%D8%A7%D8%AC+%D8%A7%D9%84%D8%A8%D8%B1%D9%88%D8%AA%D9%8A%D9%86" class="Z3988"></span> <span class="cs1-hidden-error error citation-comment">الوسيط <code class="cs1-code">|CitationClass=</code> تم تجاهله (<a href="/wiki/%D9%85%D8%B3%D8%A7%D8%B9%D8%AF%D8%A9:CS1_errors#parameter_ignored" title="مساعدة:CS1 errors">مساعدة</a>)</span><link rel="mw-deduplicated-inline-style" href="mw-data:TemplateStyles:r47703133"/></span>
</li>
<li id="cite_note-15"><span class="mw-cite-backlink"><b><a href="#cite_ref-15">^</a></b></span> <span class="reference-text"><cite id="CITEREFBrinkrolfSchröderPühlerTauch2010" class="citation journal">Brinkrolf K, Schröder J, Pühler A, Tauch A (September 2010). "The transcriptional regulatory repertoire of Corynebacterium glutamicum: reconstruction of the network controlling pathways involved in lysine and glutamate production". <i>Journal of Biotechnology</i>. <b>149</b> (3): 173–82. <a href="/wiki/%D9%85%D8%B9%D8%B1%D9%81_%D8%A7%D9%84%D8%BA%D8%B1%D8%B6_%D8%A7%D9%84%D8%B1%D9%82%D9%85%D9%8A" title="معرف الغرض الرقمي">doi</a>:<a rel="nofollow" class="external text" href="https://doi.org/10.1016%2Fj.jbiotec.2009.12.004">10.1016/j.jbiotec.2009.12.004</a>. <a href="/wiki/%D8%A8%D8%A8%D9%85%D8%AF" title="ببمد">PMID</a> <a rel="nofollow" class="external text" href="//pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/19963020">19963020</a>.</cite><span title="ctx_ver=Z39.88-2004&rft_val_fmt=info%3Aofi%2Ffmt%3Akev%3Amtx%3Ajournal&rft.genre=article&rft.jtitle=Journal+of+Biotechnology&rft.atitle=The+transcriptional+regulatory+repertoire+of+Corynebacterium+glutamicum%3A+reconstruction+of+the+network+controlling+pathways+involved+in+lysine+and+glutamate+production&rft.volume=149&rft.issue=3&rft.pages=173-82&rft.date=2010-09&rft_id=info%3Adoi%2F10.1016%2Fj.jbiotec.2009.12.004&rft_id=info%3Apmid%2F19963020&rft.aulast=Brinkrolf&rft.aufirst=K&rft.au=Schr%C3%B6der%2C+J&rft.au=P%C3%BChler%2C+A&rft.au=Tauch%2C+A&rfr_id=info%3Asid%2Far.wikipedia.org%3A%D8%A5%D9%86%D8%AA%D8%A7%D8%AC+%D8%A7%D9%84%D8%A8%D8%B1%D9%88%D8%AA%D9%8A%D9%86" class="Z3988"></span> <span class="cs1-hidden-error error citation-comment">الوسيط <code class="cs1-code">|CitationClass=</code> تم تجاهله (<a href="/wiki/%D9%85%D8%B3%D8%A7%D8%B9%D8%AF%D8%A9:CS1_errors#parameter_ignored" title="مساعدة:CS1 errors">مساعدة</a>)</span><link rel="mw-deduplicated-inline-style" href="mw-data:TemplateStyles:r47703133"/></span>
</li>
<li id="cite_note-16"><span class="mw-cite-backlink"><b><a href="#cite_ref-16">^</a></b></span> <span class="reference-text"><cite id="CITEREFDateItayaMatsuiKikuchi2006" class="citation journal">Date M, Itaya H, Matsui H, Kikuchi Y (January 2006). "Secretion of human epidermal growth factor by Corynebacterium glutamicum". <i>Letters in Applied Microbiology</i>. <b>42</b> (1): 66–70. <a href="/wiki/%D9%85%D8%B9%D8%B1%D9%81_%D8%A7%D9%84%D8%BA%D8%B1%D8%B6_%D8%A7%D9%84%D8%B1%D9%82%D9%85%D9%8A" title="معرف الغرض الرقمي">doi</a>:<span class="cs1-lock-free" title="يمكن الوصول إليها بحرية"><a rel="nofollow" class="external text" href="https://doi.org/10.1111%2Fj.1472-765x.2005.01802.x">10.1111/j.1472-765x.2005.01802.x</a></span>. <a href="/wiki/%D8%A8%D8%A8%D9%85%D8%AF" title="ببمد">PMID</a> <a rel="nofollow" class="external text" href="//pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/16411922">16411922</a>.</cite><span title="ctx_ver=Z39.88-2004&rft_val_fmt=info%3Aofi%2Ffmt%3Akev%3Amtx%3Ajournal&rft.genre=article&rft.jtitle=Letters+in+Applied+Microbiology&rft.atitle=Secretion+of+human+epidermal+growth+factor+by+Corynebacterium+glutamicum&rft.volume=42&rft.issue=1&rft.pages=66-70&rft.date=2006-01&rft_id=info%3Adoi%2F10.1111%2Fj.1472-765x.2005.01802.x&rft_id=info%3Apmid%2F16411922&rft.aulast=Date&rft.aufirst=M&rft.au=Itaya%2C+H&rft.au=Matsui%2C+H&rft.au=Kikuchi%2C+Y&rfr_id=info%3Asid%2Far.wikipedia.org%3A%D8%A5%D9%86%D8%AA%D8%A7%D8%AC+%D8%A7%D9%84%D8%A8%D8%B1%D9%88%D8%AA%D9%8A%D9%86" class="Z3988"></span> <span class="cs1-hidden-error error citation-comment">الوسيط <code class="cs1-code">|CitationClass=</code> تم تجاهله (<a href="/wiki/%D9%85%D8%B3%D8%A7%D8%B9%D8%AF%D8%A9:CS1_errors#parameter_ignored" title="مساعدة:CS1 errors">مساعدة</a>)</span><link rel="mw-deduplicated-inline-style" href="mw-data:TemplateStyles:r47703133"/></span>
</li>
<li id="cite_note-17"><span class="mw-cite-backlink"><b><a href="#cite_ref-17">^</a></b></span> <span class="reference-text"><cite id="CITEREFMeissnerVollstedtvan_DijlFreudl2007" class="citation journal">Meissner D, Vollstedt A, van Dijl JM, Freudl R (September 2007). "Comparative analysis of twin-arginine (Tat)-dependent protein secretion of a heterologous model protein (GFP) in three different Gram-positive bacteria". <i>Applied Microbiology and Biotechnology</i>. <b>76</b> (3): 633–42. <a href="/wiki/%D9%85%D8%B9%D8%B1%D9%81_%D8%A7%D9%84%D8%BA%D8%B1%D8%B6_%D8%A7%D9%84%D8%B1%D9%82%D9%85%D9%8A" title="معرف الغرض الرقمي">doi</a>:<a rel="nofollow" class="external text" href="https://doi.org/10.1007%2Fs00253-007-0934-8">10.1007/s00253-007-0934-8</a>. <a href="/wiki/%D8%A8%D8%A8%D9%85%D8%AF" title="ببمد">PMID</a> <a rel="nofollow" class="external text" href="//pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/17453196">17453196</a>. <a href="/wiki/S2CID_(identifier)" class="mw-redirect" title="S2CID (identifier)">S2CID</a> <a rel="nofollow" class="external text" href="https://api.semanticscholar.org/CorpusID:6238466">6238466</a>.</cite><span title="ctx_ver=Z39.88-2004&rft_val_fmt=info%3Aofi%2Ffmt%3Akev%3Amtx%3Ajournal&rft.genre=article&rft.jtitle=Applied+Microbiology+and+Biotechnology&rft.atitle=Comparative+analysis+of+twin-arginine+%28Tat%29-dependent+protein+secretion+of+a+heterologous+model+protein+%28GFP%29+in+three+different+Gram-positive+bacteria&rft.volume=76&rft.issue=3&rft.pages=633-42&rft.date=2007-09&rft_id=https%3A%2F%2Fapi.semanticscholar.org%2FCorpusID%3A6238466&rft_id=info%3Apmid%2F17453196&rft_id=info%3Adoi%2F10.1007%2Fs00253-007-0934-8&rft.aulast=Meissner&rft.aufirst=D&rft.au=Vollstedt%2C+A&rft.au=van+Dijl%2C+JM&rft.au=Freudl%2C+R&rfr_id=info%3Asid%2Far.wikipedia.org%3A%D8%A5%D9%86%D8%AA%D8%A7%D8%AC+%D8%A7%D9%84%D8%A8%D8%B1%D9%88%D8%AA%D9%8A%D9%86" class="Z3988"></span> <span class="cs1-hidden-error error citation-comment">الوسيط <code class="cs1-code">|CitationClass=</code> تم تجاهله (<a href="/wiki/%D9%85%D8%B3%D8%A7%D8%B9%D8%AF%D8%A9:CS1_errors#parameter_ignored" title="مساعدة:CS1 errors">مساعدة</a>)</span><link rel="mw-deduplicated-inline-style" href="mw-data:TemplateStyles:r47703133"/></span>
</li>
<li id="cite_note-18"><span class="mw-cite-backlink"><b><a href="#cite_ref-18">^</a></b></span> <span class="reference-text"><cite id="CITEREFRetallackJinChew2012" class="citation journal">Retallack DM, Jin H, Chew L (February 2012). "Reliable protein production in a Pseudomonas fluorescens expression system". <i>Protein Expression and Purification</i>. <b>81</b> (2): 157–65. <a href="/wiki/%D9%85%D8%B9%D8%B1%D9%81_%D8%A7%D9%84%D8%BA%D8%B1%D8%B6_%D8%A7%D9%84%D8%B1%D9%82%D9%85%D9%8A" title="معرف الغرض الرقمي">doi</a>:<a rel="nofollow" class="external text" href="https://doi.org/10.1016%2Fj.pep.2011.09.010">10.1016/j.pep.2011.09.010</a>. <a href="/wiki/%D8%A8%D8%A8%D9%85%D8%AF" title="ببمد">PMID</a> <a rel="nofollow" class="external text" href="//pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/21968453">21968453</a>.</cite><span title="ctx_ver=Z39.88-2004&rft_val_fmt=info%3Aofi%2Ffmt%3Akev%3Amtx%3Ajournal&rft.genre=article&rft.jtitle=Protein+Expression+and+Purification&rft.atitle=Reliable+protein+production+in+a+Pseudomonas+fluorescens+expression+system&rft.volume=81&rft.issue=2&rft.pages=157-65&rft.date=2012-02&rft_id=info%3Adoi%2F10.1016%2Fj.pep.2011.09.010&rft_id=info%3Apmid%2F21968453&rft.aulast=Retallack&rft.aufirst=DM&rft.au=Jin%2C+H&rft.au=Chew%2C+L&rfr_id=info%3Asid%2Far.wikipedia.org%3A%D8%A5%D9%86%D8%AA%D8%A7%D8%AC+%D8%A7%D9%84%D8%A8%D8%B1%D9%88%D8%AA%D9%8A%D9%86" class="Z3988"></span> <span class="cs1-hidden-error error citation-comment">الوسيط <code class="cs1-code">|CitationClass=</code> تم تجاهله (<a href="/wiki/%D9%85%D8%B3%D8%A7%D8%B9%D8%AF%D8%A9:CS1_errors#parameter_ignored" title="مساعدة:CS1 errors">مساعدة</a>)</span><link rel="mw-deduplicated-inline-style" href="mw-data:TemplateStyles:r47703133"/></span>
</li>
<li id="cite_note-ReferenceA-19"><span class="mw-cite-backlink">↑ <a href="#cite_ref-ReferenceA_19-0"><sup><i><b>أ</b></i></sup></a> <a href="#cite_ref-ReferenceA_19-1"><sup><i><b>ب</b></i></sup></a></span> <span class="reference-text"><cite id="CITEREFAltmannStaudacherWilsonMärz1999" class="citation journal">Altmann F, Staudacher E, Wilson IB, März L (February 1999). "Insect cells as hosts for the expression of recombinant glycoproteins". <i>Glycoconjugate Journal</i>. <b>16</b> (2): 109–23. <a href="/wiki/%D9%85%D8%B9%D8%B1%D9%81_%D8%A7%D9%84%D8%BA%D8%B1%D8%B6_%D8%A7%D9%84%D8%B1%D9%82%D9%85%D9%8A" title="معرف الغرض الرقمي">doi</a>:<a rel="nofollow" class="external text" href="https://doi.org/10.1023%2FA%3A1026488408951">10.1023/A:1026488408951</a>. <a href="/wiki/%D8%A8%D8%A8%D9%85%D8%AF" title="ببمد">PMID</a> <a rel="nofollow" class="external text" href="//pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/10612411">10612411</a>. <a href="/wiki/S2CID_(identifier)" class="mw-redirect" title="S2CID (identifier)">S2CID</a> <a rel="nofollow" class="external text" href="https://api.semanticscholar.org/CorpusID:34863069">34863069</a>.</cite><span title="ctx_ver=Z39.88-2004&rft_val_fmt=info%3Aofi%2Ffmt%3Akev%3Amtx%3Ajournal&rft.genre=article&rft.jtitle=Glycoconjugate+Journal&rft.atitle=Insect+cells+as+hosts+for+the+expression+of+recombinant+glycoproteins&rft.volume=16&rft.issue=2&rft.pages=109-23&rft.date=1999-02&rft_id=https%3A%2F%2Fapi.semanticscholar.org%2FCorpusID%3A34863069&rft_id=info%3Apmid%2F10612411&rft_id=info%3Adoi%2F10.1023%2FA%3A1026488408951&rft.aulast=Altmann&rft.aufirst=F&rft.au=Staudacher%2C+E&rft.au=Wilson%2C+IB&rft.au=M%C3%A4rz%2C+L&rfr_id=info%3Asid%2Far.wikipedia.org%3A%D8%A5%D9%86%D8%AA%D8%A7%D8%AC+%D8%A7%D9%84%D8%A8%D8%B1%D9%88%D8%AA%D9%8A%D9%86" class="Z3988"></span> <span class="cs1-hidden-error error citation-comment">الوسيط <code class="cs1-code">|CitationClass=</code> تم تجاهله (<a href="/wiki/%D9%85%D8%B3%D8%A7%D8%B9%D8%AF%D8%A9:CS1_errors#parameter_ignored" title="مساعدة:CS1 errors">مساعدة</a>)</span><link rel="mw-deduplicated-inline-style" href="mw-data:TemplateStyles:r47703133"/></span>
</li>
<li id="cite_note-20"><span class="mw-cite-backlink"><b><a href="#cite_ref-20">^</a></b></span> <span class="reference-text"><cite id="CITEREFKostCondreay1999" class="citation journal">Kost TA, Condreay JP (October 1999). "Recombinant baculoviruses as expression vectors for insect and mammalian cells". <i>Current Opinion in Biotechnology</i>. <b>10</b> (5): 428–33. <a href="/wiki/%D9%85%D8%B9%D8%B1%D9%81_%D8%A7%D9%84%D8%BA%D8%B1%D8%B6_%D8%A7%D9%84%D8%B1%D9%82%D9%85%D9%8A" title="معرف الغرض الرقمي">doi</a>:<a rel="nofollow" class="external text" href="https://doi.org/10.1016%2FS0958-1669%2899%2900005-1">10.1016/S0958-1669(99)00005-1</a>. <a href="/wiki/%D8%A8%D8%A8%D9%85%D8%AF" title="ببمد">PMID</a> <a rel="nofollow" class="external text" href="//pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/10508635">10508635</a>.</cite><span title="ctx_ver=Z39.88-2004&rft_val_fmt=info%3Aofi%2Ffmt%3Akev%3Amtx%3Ajournal&rft.genre=article&rft.jtitle=Current+Opinion+in+Biotechnology&rft.atitle=Recombinant+baculoviruses+as+expression+vectors+for+insect+and+mammalian+cells&rft.volume=10&rft.issue=5&rft.pages=428-33&rft.date=1999-10&rft_id=info%3Adoi%2F10.1016%2FS0958-1669%2899%2900005-1&rft_id=info%3Apmid%2F10508635&rft.aulast=Kost&rft.aufirst=TA&rft.au=Condreay%2C+JP&rfr_id=info%3Asid%2Far.wikipedia.org%3A%D8%A5%D9%86%D8%AA%D8%A7%D8%AC+%D8%A7%D9%84%D8%A8%D8%B1%D9%88%D8%AA%D9%8A%D9%86" class="Z3988"></span> <span class="cs1-hidden-error error citation-comment">الوسيط <code class="cs1-code">|CitationClass=</code> تم تجاهله (<a href="/wiki/%D9%85%D8%B3%D8%A7%D8%B9%D8%AF%D8%A9:CS1_errors#parameter_ignored" title="مساعدة:CS1 errors">مساعدة</a>)</span><link rel="mw-deduplicated-inline-style" href="mw-data:TemplateStyles:r47703133"/></span>
</li>
<li id="cite_note-21"><span class="mw-cite-backlink"><b><a href="#cite_ref-21">^</a></b></span> <span class="reference-text"><cite id="CITEREFYinLiRenHerrler2007" class="citation journal">Yin J, Li G, Ren X, Herrler G (January 2007). "Select what you need: a comparative evaluation of the advantages and limitations of frequently used expression systems for foreign genes". <i>Journal of Biotechnology</i>. <b>127</b> (3): 335–47. <a href="/wiki/%D9%85%D8%B9%D8%B1%D9%81_%D8%A7%D9%84%D8%BA%D8%B1%D8%B6_%D8%A7%D9%84%D8%B1%D9%82%D9%85%D9%8A" title="معرف الغرض الرقمي">doi</a>:<a rel="nofollow" class="external text" href="https://doi.org/10.1016%2Fj.jbiotec.2006.07.012">10.1016/j.jbiotec.2006.07.012</a>. <a href="/wiki/%D8%A8%D8%A8%D9%85%D8%AF" title="ببمد">PMID</a> <a rel="nofollow" class="external text" href="//pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/16959350">16959350</a>.</cite><span title="ctx_ver=Z39.88-2004&rft_val_fmt=info%3Aofi%2Ffmt%3Akev%3Amtx%3Ajournal&rft.genre=article&rft.jtitle=Journal+of+Biotechnology&rft.atitle=Select+what+you+need%3A+a+comparative+evaluation+of+the+advantages+and+limitations+of+frequently+used+expression+systems+for+foreign+genes&rft.volume=127&rft.issue=3&rft.pages=335-47&rft.date=2007-01&rft_id=info%3Adoi%2F10.1016%2Fj.jbiotec.2006.07.012&rft_id=info%3Apmid%2F16959350&rft.aulast=Yin&rft.aufirst=J&rft.au=Li%2C+G&rft.au=Ren%2C+X&rft.au=Herrler%2C+G&rfr_id=info%3Asid%2Far.wikipedia.org%3A%D8%A5%D9%86%D8%AA%D8%A7%D8%AC+%D8%A7%D9%84%D8%A8%D8%B1%D9%88%D8%AA%D9%8A%D9%86" class="Z3988"></span> <span class="cs1-hidden-error error citation-comment">الوسيط <code class="cs1-code">|CitationClass=</code> تم تجاهله (<a href="/wiki/%D9%85%D8%B3%D8%A7%D8%B9%D8%AF%D8%A9:CS1_errors#parameter_ignored" title="مساعدة:CS1 errors">مساعدة</a>)</span><link rel="mw-deduplicated-inline-style" href="mw-data:TemplateStyles:r47703133"/></span>
</li>
<li id="cite_note-Dyring-22"><span class="mw-cite-backlink">↑ <a href="#cite_ref-Dyring_22-0"><sup><i><b>أ</b></i></sup></a> <a href="#cite_ref-Dyring_22-1"><sup><i><b>ب</b></i></sup></a> <a href="#cite_ref-Dyring_22-2"><sup><i><b>ت</b></i></sup></a> <a href="#cite_ref-Dyring_22-3"><sup><i><b>ث</b></i></sup></a></span> <span class="reference-text"><cite id="CITEREFDyring2011" class="citation journal">Dyring, Charlotte (2011). "Optimising the drosophila S2 expression system for production of therapeutic vaccines". <i>BioProcessing Journal</i>. <b>10</b> (2): 28–35. <a href="/wiki/%D9%85%D8%B9%D8%B1%D9%81_%D8%A7%D9%84%D8%BA%D8%B1%D8%B6_%D8%A7%D9%84%D8%B1%D9%82%D9%85%D9%8A" title="معرف الغرض الرقمي">doi</a>:<a rel="nofollow" class="external text" href="https://doi.org/10.12665%2Fj102.dyring">10.12665/j102.dyring</a>.</cite><span title="ctx_ver=Z39.88-2004&rft_val_fmt=info%3Aofi%2Ffmt%3Akev%3Amtx%3Ajournal&rft.genre=article&rft.jtitle=BioProcessing+Journal&rft.atitle=Optimising+the+drosophila+S2+expression+system+for+production+of+therapeutic+vaccines&rft.volume=10&rft.issue=2&rft.pages=28-35&rft.date=2011&rft_id=info%3Adoi%2F10.12665%2Fj102.dyring&rft.aulast=Dyring&rft.aufirst=Charlotte&rfr_id=info%3Asid%2Far.wikipedia.org%3A%D8%A5%D9%86%D8%AA%D8%A7%D8%AC+%D8%A7%D9%84%D8%A8%D8%B1%D9%88%D8%AA%D9%8A%D9%86" class="Z3988"></span> <span class="cs1-hidden-error error citation-comment">الوسيط <code class="cs1-code">|CitationClass=</code> تم تجاهله (<a href="/wiki/%D9%85%D8%B3%D8%A7%D8%B9%D8%AF%D8%A9:CS1_errors#parameter_ignored" title="مساعدة:CS1 errors">مساعدة</a>)</span><link rel="mw-deduplicated-inline-style" href="mw-data:TemplateStyles:r47703133"/></span>
</li>
<li id="cite_note-Olczak-23"><span class="mw-cite-backlink">↑ <a href="#cite_ref-Olczak_23-0"><sup><i><b>أ</b></i></sup></a> <a href="#cite_ref-Olczak_23-1"><sup><i><b>ب</b></i></sup></a> <a href="#cite_ref-Olczak_23-2"><sup><i><b>ت</b></i></sup></a> <a href="#cite_ref-Olczak_23-3"><sup><i><b>ث</b></i></sup></a></span> <span class="reference-text"><cite id="CITEREFOlczakOlczak2006" class="citation journal">Olczak M, Olczak T (December 2006). "Comparison of different signal peptides for protein secretion in nonlytic insect cell system". <i>Analytical Biochemistry</i>. <b>359</b> (1): 45–53. <a href="/wiki/%D9%85%D8%B9%D8%B1%D9%81_%D8%A7%D9%84%D8%BA%D8%B1%D8%B6_%D8%A7%D9%84%D8%B1%D9%82%D9%85%D9%8A" title="معرف الغرض الرقمي">doi</a>:<a rel="nofollow" class="external text" href="https://doi.org/10.1016%2Fj.ab.2006.09.003">10.1016/j.ab.2006.09.003</a>. <a href="/wiki/%D8%A8%D8%A8%D9%85%D8%AF" title="ببمد">PMID</a> <a rel="nofollow" class="external text" href="//pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/17046707">17046707</a>.</cite><span title="ctx_ver=Z39.88-2004&rft_val_fmt=info%3Aofi%2Ffmt%3Akev%3Amtx%3Ajournal&rft.genre=article&rft.jtitle=Analytical+Biochemistry&rft.atitle=Comparison+of+different+signal+peptides+for+protein+secretion+in+nonlytic+insect+cell+system&rft.volume=359&rft.issue=1&rft.pages=45-53&rft.date=2006-12&rft_id=info%3Adoi%2F10.1016%2Fj.ab.2006.09.003&rft_id=info%3Apmid%2F17046707&rft.aulast=Olczak&rft.aufirst=M&rft.au=Olczak%2C+T&rfr_id=info%3Asid%2Far.wikipedia.org%3A%D8%A5%D9%86%D8%AA%D8%A7%D8%AC+%D8%A7%D9%84%D8%A8%D8%B1%D9%88%D8%AA%D9%8A%D9%86" class="Z3988"></span> <span class="cs1-hidden-error error citation-comment">الوسيط <code class="cs1-code">|CitationClass=</code> تم تجاهله (<a href="/wiki/%D9%85%D8%B3%D8%A7%D8%B9%D8%AF%D8%A9:CS1_errors#parameter_ignored" title="مساعدة:CS1 errors">مساعدة</a>)</span><link rel="mw-deduplicated-inline-style" href="mw-data:TemplateStyles:r47703133"/></span>
</li>
<li id="cite_note-McCarroll-24"><span class="mw-cite-backlink">↑ <a href="#cite_ref-McCarroll_24-0"><sup><i><b>أ</b></i></sup></a> <a href="#cite_ref-McCarroll_24-1"><sup><i><b>ب</b></i></sup></a> <a href="#cite_ref-McCarroll_24-2"><sup><i><b>ت</b></i></sup></a></span> <span class="reference-text"><cite id="CITEREFMcCarrollKing1997" class="citation journal">McCarroll L, King LA (October 1997). "Stable insect cell cultures for recombinant protein production". <i>Current Opinion in Biotechnology</i>. <b>8</b> (5): 590–4. <a href="/wiki/%D9%85%D8%B9%D8%B1%D9%81_%D8%A7%D9%84%D8%BA%D8%B1%D8%B6_%D8%A7%D9%84%D8%B1%D9%82%D9%85%D9%8A" title="معرف الغرض الرقمي">doi</a>:<a rel="nofollow" class="external text" href="https://doi.org/10.1016%2Fs0958-1669%2897%2980034-1">10.1016/s0958-1669(97)80034-1</a>. <a href="/wiki/%D8%A8%D8%A8%D9%85%D8%AF" title="ببمد">PMID</a> <a rel="nofollow" class="external text" href="//pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/9353223">9353223</a>.</cite><span title="ctx_ver=Z39.88-2004&rft_val_fmt=info%3Aofi%2Ffmt%3Akev%3Amtx%3Ajournal&rft.genre=article&rft.jtitle=Current+Opinion+in+Biotechnology&rft.atitle=Stable+insect+cell+cultures+for+recombinant+protein+production&rft.volume=8&rft.issue=5&rft.pages=590-4&rft.date=1997-10&rft_id=info%3Adoi%2F10.1016%2Fs0958-1669%2897%2980034-1&rft_id=info%3Apmid%2F9353223&rft.aulast=McCarroll&rft.aufirst=L&rft.au=King%2C+LA&rfr_id=info%3Asid%2Far.wikipedia.org%3A%D8%A5%D9%86%D8%AA%D8%A7%D8%AC+%D8%A7%D9%84%D8%A8%D8%B1%D9%88%D8%AA%D9%8A%D9%86" class="Z3988"></span> <span class="cs1-hidden-error error citation-comment">الوسيط <code class="cs1-code">|CitationClass=</code> تم تجاهله (<a href="/wiki/%D9%85%D8%B3%D8%A7%D8%B9%D8%AF%D8%A9:CS1_errors#parameter_ignored" title="مساعدة:CS1 errors">مساعدة</a>)</span><link rel="mw-deduplicated-inline-style" href="mw-data:TemplateStyles:r47703133"/></span>
</li>
<li id="cite_note-Zhu_1158–1170-25"><span class="mw-cite-backlink">↑ <a href="#cite_ref-Zhu_1158–1170_25-0"><sup><i><b>أ</b></i></sup></a> <a href="#cite_ref-Zhu_1158–1170_25-1"><sup><i><b>ب</b></i></sup></a></span> <span class="reference-text"><cite id="CITEREFZhu2012" class="citation journal">Zhu J (2012-09-01). "Mammalian cell protein expression for biopharmaceutical production". <i>Biotechnology Advances</i>. <b>30</b> (5): 1158–70. <a href="/wiki/%D9%85%D8%B9%D8%B1%D9%81_%D8%A7%D9%84%D8%BA%D8%B1%D8%B6_%D8%A7%D9%84%D8%B1%D9%82%D9%85%D9%8A" title="معرف الغرض الرقمي">doi</a>:<a rel="nofollow" class="external text" href="https://doi.org/10.1016%2Fj.biotechadv.2011.08.022">10.1016/j.biotechadv.2011.08.022</a>. <a href="/wiki/%D8%A8%D8%A8%D9%85%D8%AF" title="ببمد">PMID</a> <a rel="nofollow" class="external text" href="//pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/21968146">21968146</a>.</cite><span title="ctx_ver=Z39.88-2004&rft_val_fmt=info%3Aofi%2Ffmt%3Akev%3Amtx%3Ajournal&rft.genre=article&rft.jtitle=Biotechnology+Advances&rft.atitle=Mammalian+cell+protein+expression+for+biopharmaceutical+production&rft.volume=30&rft.issue=5&rft.pages=1158-70&rft.date=2012-09-01&rft_id=info%3Adoi%2F10.1016%2Fj.biotechadv.2011.08.022&rft_id=info%3Apmid%2F21968146&rft.aulast=Zhu&rft.aufirst=J&rfr_id=info%3Asid%2Far.wikipedia.org%3A%D8%A5%D9%86%D8%AA%D8%A7%D8%AC+%D8%A7%D9%84%D8%A8%D8%B1%D9%88%D8%AA%D9%8A%D9%86" class="Z3988"></span> <span class="cs1-hidden-error error citation-comment">الوسيط <code class="cs1-code">|CitationClass=</code> تم تجاهله (<a href="/wiki/%D9%85%D8%B3%D8%A7%D8%B9%D8%AF%D8%A9:CS1_errors#parameter_ignored" title="مساعدة:CS1 errors">مساعدة</a>)</span><link rel="mw-deduplicated-inline-style" href="mw-data:TemplateStyles:r47703133"/></span>
</li>
<li id="cite_note-:0-26"><span class="mw-cite-backlink">↑ <a href="#cite_ref-:0_26-0"><sup><i><b>أ</b></i></sup></a> <a href="#cite_ref-:0_26-1"><sup><i><b>ب</b></i></sup></a> <a href="#cite_ref-:0_26-2"><sup><i><b>ت</b></i></sup></a> <a href="#cite_ref-:0_26-3"><sup><i><b>ث</b></i></sup></a></span> <span class="reference-text"><cite id="CITEREFAlmoLove2014" class="citation journal">Almo SC, Love JD (June 2014). <a rel="nofollow" class="external text" href="//www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC4766836">"Better and faster: improvements and optimization for mammalian recombinant protein production"</a>. <i>Current Opinion in Structural Biology</i>. <b>26</b>: 39–43. <a href="/wiki/%D9%85%D8%B9%D8%B1%D9%81_%D8%A7%D9%84%D8%BA%D8%B1%D8%B6_%D8%A7%D9%84%D8%B1%D9%82%D9%85%D9%8A" title="معرف الغرض الرقمي">doi</a>:<a rel="nofollow" class="external text" href="https://doi.org/10.1016%2Fj.sbi.2014.03.006">10.1016/j.sbi.2014.03.006</a>. <a href="/wiki/%D8%A8%D8%A8%D9%85%D8%AF_%D8%B3%D9%86%D8%AA%D8%B1%D8%A7%D9%84" title="ببمد سنترال">PMC</a> <span class="cs1-lock-free" title="يمكن الوصول إليها بحرية"><a rel="nofollow" class="external text" href="//www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC4766836">4766836</a></span>. <a href="/wiki/%D8%A8%D8%A8%D9%85%D8%AF" title="ببمد">PMID</a> <a rel="nofollow" class="external text" href="//pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/24721463">24721463</a>.</cite><span title="ctx_ver=Z39.88-2004&rft_val_fmt=info%3Aofi%2Ffmt%3Akev%3Amtx%3Ajournal&rft.genre=article&rft.jtitle=Current+Opinion+in+Structural+Biology&rft.atitle=Better+and+faster%3A+improvements+and+optimization+for+mammalian+recombinant+protein+production&rft.volume=26&rft.pages=39-43&rft.date=2014-06&rft_id=%2F%2Fwww.ncbi.nlm.nih.gov%2Fpmc%2Farticles%2FPMC4766836&rft_id=info%3Apmid%2F24721463&rft_id=info%3Adoi%2F10.1016%2Fj.sbi.2014.03.006&rft.aulast=Almo&rft.aufirst=SC&rft.au=Love%2C+JD&rft_id=%2F%2Fwww.ncbi.nlm.nih.gov%2Fpmc%2Farticles%2FPMC4766836&rfr_id=info%3Asid%2Far.wikipedia.org%3A%D8%A5%D9%86%D8%AA%D8%A7%D8%AC+%D8%A7%D9%84%D8%A8%D8%B1%D9%88%D8%AA%D9%8A%D9%86" class="Z3988"></span> <span class="cs1-hidden-error error citation-comment">الوسيط <code class="cs1-code">|CitationClass=</code> تم تجاهله (<a href="/wiki/%D9%85%D8%B3%D8%A7%D8%B9%D8%AF%D8%A9:CS1_errors#parameter_ignored" title="مساعدة:CS1 errors">مساعدة</a>)</span><link rel="mw-deduplicated-inline-style" href="mw-data:TemplateStyles:r47703133"/></span>
</li>
<li id="cite_note-27"><span class="mw-cite-backlink"><b><a href="#cite_ref-27">^</a></b></span> <span class="reference-text"><cite id="CITEREFHackerBalasubramanian2016" class="citation journal">Hacker DL, Balasubramanian S (June 2016). "Recombinant protein production from stable mammalian cell lines and pools". <i>Current Opinion in Structural Biology</i>. <b>38</b>: 129–36. <a href="/wiki/%D9%85%D8%B9%D8%B1%D9%81_%D8%A7%D9%84%D8%BA%D8%B1%D8%B6_%D8%A7%D9%84%D8%B1%D9%82%D9%85%D9%8A" title="معرف الغرض الرقمي">doi</a>:<a rel="nofollow" class="external text" href="https://doi.org/10.1016%2Fj.sbi.2016.06.005">10.1016/j.sbi.2016.06.005</a>. <a href="/wiki/%D8%A8%D8%A8%D9%85%D8%AF" title="ببمد">PMID</a> <a rel="nofollow" class="external text" href="//pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/27322762">27322762</a>.</cite><span title="ctx_ver=Z39.88-2004&rft_val_fmt=info%3Aofi%2Ffmt%3Akev%3Amtx%3Ajournal&rft.genre=article&rft.jtitle=Current+Opinion+in+Structural+Biology&rft.atitle=Recombinant+protein+production+from+stable+mammalian+cell+lines+and+pools&rft.volume=38&rft.pages=129-36&rft.date=2016-06&rft_id=info%3Adoi%2F10.1016%2Fj.sbi.2016.06.005&rft_id=info%3Apmid%2F27322762&rft.aulast=Hacker&rft.aufirst=DL&rft.au=Balasubramanian%2C+S&rfr_id=info%3Asid%2Far.wikipedia.org%3A%D8%A5%D9%86%D8%AA%D8%A7%D8%AC+%D8%A7%D9%84%D8%A8%D8%B1%D9%88%D8%AA%D9%8A%D9%86" class="Z3988"></span> <span class="cs1-hidden-error error citation-comment">الوسيط <code class="cs1-code">|CitationClass=</code> تم تجاهله (<a href="/wiki/%D9%85%D8%B3%D8%A7%D8%B9%D8%AF%D8%A9:CS1_errors#parameter_ignored" title="مساعدة:CS1 errors">مساعدة</a>)</span><link rel="mw-deduplicated-inline-style" href="mw-data:TemplateStyles:r47703133"/></span>
</li>
<li id="cite_note-28"><span class="mw-cite-backlink"><b><a href="#cite_ref-28">^</a></b></span> <span class="reference-text"><cite id="CITEREFRosenblumCooperman2014" class="citation journal">Rosenblum G, Cooperman BS (January 2014). <a rel="nofollow" class="external text" href="//www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC4133780">"Engine out of the chassis: cell-free protein synthesis and its uses"</a>. <i>FEBS Letters</i>. <b>588</b> (2): 261–8. <a href="/wiki/%D9%85%D8%B9%D8%B1%D9%81_%D8%A7%D9%84%D8%BA%D8%B1%D8%B6_%D8%A7%D9%84%D8%B1%D9%82%D9%85%D9%8A" title="معرف الغرض الرقمي">doi</a>:<a rel="nofollow" class="external text" href="https://doi.org/10.1016%2Fj.febslet.2013.10.016">10.1016/j.febslet.2013.10.016</a>. <a href="/wiki/%D8%A8%D8%A8%D9%85%D8%AF_%D8%B3%D9%86%D8%AA%D8%B1%D8%A7%D9%84" title="ببمد سنترال">PMC</a> <span class="cs1-lock-free" title="يمكن الوصول إليها بحرية"><a rel="nofollow" class="external text" href="//www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC4133780">4133780</a></span>. <a href="/wiki/%D8%A8%D8%A8%D9%85%D8%AF" title="ببمد">PMID</a> <a rel="nofollow" class="external text" href="//pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/24161673">24161673</a>.</cite><span title="ctx_ver=Z39.88-2004&rft_val_fmt=info%3Aofi%2Ffmt%3Akev%3Amtx%3Ajournal&rft.genre=article&rft.jtitle=FEBS+Letters&rft.atitle=Engine+out+of+the+chassis%3A+cell-free+protein+synthesis+and+its+uses&rft.volume=588&rft.issue=2&rft.pages=261-8&rft.date=2014-01&rft_id=%2F%2Fwww.ncbi.nlm.nih.gov%2Fpmc%2Farticles%2FPMC4133780&rft_id=info%3Apmid%2F24161673&rft_id=info%3Adoi%2F10.1016%2Fj.febslet.2013.10.016&rft.aulast=Rosenblum&rft.aufirst=G&rft.au=Cooperman%2C+BS&rft_id=%2F%2Fwww.ncbi.nlm.nih.gov%2Fpmc%2Farticles%2FPMC4133780&rfr_id=info%3Asid%2Far.wikipedia.org%3A%D8%A5%D9%86%D8%AA%D8%A7%D8%AC+%D8%A7%D9%84%D8%A8%D8%B1%D9%88%D8%AA%D9%8A%D9%86" class="Z3988"></span> <span class="cs1-hidden-error error citation-comment">الوسيط <code class="cs1-code">|CitationClass=</code> تم تجاهله (<a href="/wiki/%D9%85%D8%B3%D8%A7%D8%B9%D8%AF%D8%A9:CS1_errors#parameter_ignored" title="مساعدة:CS1 errors">مساعدة</a>)</span><link rel="mw-deduplicated-inline-style" href="mw-data:TemplateStyles:r47703133"/></span>
</li>
</ol>
<ul class="bandeau-portail إعلام" id="bandeau-portail">
<li class="bandeau-portail-element"><span class="bandeau-portail-icone" style="margin-right:1em"><a href="/wiki/%D8%A8%D9%88%D8%A7%D8%A8%D8%A9:%D8%B9%D9%84%D9%88%D9%85" title="بوابة:علوم"><img alt="أيقونة بوابة" src="//upload.wikimedia.org/wikipedia/commons/thumb/3/37/Sciences_exactes.svg/28px-Sciences_exactes.svg.png" decoding="async" width="28" height="28" class="noviewer" srcset="//upload.wikimedia.org/wikipedia/commons/thumb/3/37/Sciences_exactes.svg/42px-Sciences_exactes.svg.png 1.5x, //upload.wikimedia.org/wikipedia/commons/thumb/3/37/Sciences_exactes.svg/56px-Sciences_exactes.svg.png 2x" data-file-width="256" data-file-height="256" /></a></span><span class="bandeau-portail-texte"><a href="/wiki/%D8%A8%D9%88%D8%A7%D8%A8%D8%A9:%D8%B9%D9%84%D9%88%D9%85" title="بوابة:علوم">بوابة علوم</a></span></li></ul></div>' |
ما إذا كان التعديل قد تم عمله من خلال عقدة خروج تور (tor_exit_node) | false |
طابع زمن التغيير ليونكس (timestamp) | 1642169221 |
